PLP 139-151

目录号: V33257 纯度: ≥98%
PLP (139-151) 是髓磷脂蛋白脂蛋白 (PLP) 的 139 至 151 个氨基酸 (AA) 片段。
PLP 139-151 CAS号: 131334-43-5
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
PLP (139-151) 是髓鞘蛋白脂蛋白 (PLP) 的 139 至 151 位氨基酸片段。用于诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)。
PLP 139-151 是一种合成肽,对应于髓鞘蛋白脂蛋白 (PLP) 的 139 至 151 位氨基酸残基。PLP 是中枢神经系统髓鞘的主要结构蛋白。PLP 139-151 肽广泛用于诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE),EAE 是一种成熟的多发性硬化症 (MS) 动物模型。具体而言,该肽用于在易感小鼠品系(尤其是 SJL/J 小鼠)中诱导复发缓解型 (RR)-EAE。PLP 139-151 仅供实验室研究使用,尚未获准用于人类治疗。它是研究多发性硬化症免疫发病机制和评估潜在治疗干预措施的重要研究工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
PLP 139-151 targets the immune system, specifically T cells that recognize this myelin epitope. The peptide corresponds to amino acid residues 139 to 151 of myelin proteolipid protein (PLP). When administered to susceptible mouse strains (such as SJL/J mice) in the presence of adjuvants, PLP 139-151 activates autoreactive T cells that recognize the PLP epitope. These activated T cells cross the blood-brain barrier and initiate an inflammatory response against central nervous system myelin, leading to demyelination and clinical signs of EAE. The peptide is presented by MHC class II molecules (particularly I-A^s in SJL/J mice) to CD4+ T cells. The resulting immune response mimics the autoimmune attack on myelin that occurs in multiple sclerosis. PLP 139-151 is one of the most well-characterized encephalitogenic peptides used in EAE research.
体外研究 (In Vitro)
肽特异性T细胞系和4个T细胞克隆中的3个的过继转移可诱发严重的临床和组织学EAE。在体外增殖实验中,T细胞系/克隆对PLP(139-151)反应强烈。SPL细胞系及其克隆对整个PLP分子和PLP(139-151)均表现出强大的增殖反应[1]。
在体外,PLP 139-151 可用于刺激 T 细胞增殖和细胞因子产生。来自免疫动物或多发性硬化症患者的 T 细胞可在体外用 PLP 139-151 再次刺激,以评估其对髓鞘表位的反应性。肽刺激后,可通过 [3H]-胸苷掺入或 CFSE 稀释法测定 T 细胞增殖。肽刺激后,可通过 ELISA 或 ELISpot 法测定细胞因子(IFN-γ、IL-17、IL-4、IL-10)的产生。该肽在体外激活 T 细胞的能力呈浓度依赖性,通常在 10-50 ug/mL 的浓度下观察到最佳刺激效果。该肽还用于 MHC II 类分子结合试验,以研究 PLP 139-151 与 MHC 分子之间的相互作用。这些体外试验对于表征 PLP 的免疫反应以及评估潜在的免疫调节疗法至关重要。
体内研究 (In Vivo)
PLP(139-151)可用于在动物中建立自身免疫性脑阻塞模型。
在体内,PLP 139-151 用于诱导易感小鼠品系发生实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)。该肽通常乳化于含有热灭活结核分枝杆菌的弗氏完全佐剂 (CFA) 中,并通过皮下注射给药。百日咳毒素通常在免疫当天和两天后静脉注射,以增强疾病诱导。EAE 的临床症状通常在免疫后 10-14 天出现,在 SJL/J 小鼠中呈复发缓解型病程,其特征是上行性麻痹,从尾部无力开始,逐渐发展至后肢和前肢麻痹。疾病严重程度采用标准临床评分量表 (0-5) 进行评分。PLP 139-151 诱导的 EAE 模型是研究多发性硬化症和评估潜在疗法最广泛使用的模型之一。
酶活实验
PLP 139-151 的体外检测通常包括 T 细胞增殖和细胞因子生成检测。在增殖检测中,将 PLP 139-151 免疫小鼠的淋巴细胞(脾细胞或淋巴结细胞)接种于 96 孔板中,并加入不同浓度的肽(通常为 0.1-100 ug/mL)。培养 48-72 小时后,加入 [3H]-胸苷,并在 16-24 小时后检测其掺入情况。或者,也可以使用 CFSE 标记,通过流式细胞术追踪细胞分裂。在细胞因子生成检测中,收集肽刺激 48-72 小时后的细胞培养上清液,并通过 ELISA 或多重微珠法检测细胞因子水平(如 IFN-γ、IL-17、IL-4、IL-10 等)。 ELISpot 检测可用于定量细胞因子产生细胞的数量。MHC II 类分子结合试验可使用纯化的 MHC 分子和标记肽进行。
细胞实验
PLP 139-151 的体外细胞活性检测采用来自免疫动物或多发性硬化症患者的原代淋巴细胞。从 PLP 139-151 免疫小鼠中分离脾细胞或淋巴结细胞,并在完全培养基中培养。用不同浓度的 PLP 139-151(通常为 1-50 μg/mL)刺激细胞 48-96 小时。T 细胞增殖通过 [3H]-胸苷掺入或 CFSE 稀释法进行检测。细胞因子生成通过 ELISA 或 ELISpot 法进行检测。在人体研究中,用 PLP 139-151 刺激多发性硬化症患者或健康对照者的外周血单核细胞 (PBMC),并以类似方法检测 T 细胞反应。使用标准细胞活力检测评估细胞毒性,以确保观察到的反应并非由细胞死亡引起。使用无关的对照肽验证反应的特异性。
动物实验
PLP 139-151 的体内动物研究旨在诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 并评估其潜在疗效。最常用的品系是 6-8 周龄的雌性 SJL/J 小鼠。将 100-200 μg PLP 139-151 乳化于含有 400-500 μg 热灭活结核分枝杆菌的弗氏完全佐剂 (CFA) 中,皮下注射免疫小鼠。在免疫当天和两天后,静脉注射百日咳毒素 (200-400 ng)。每日使用 0-5 分制对临床症状进行评分:0 分 = 无症状,1 分 = 尾巴无力,2 分 = 后肢无力,3 分 = 后肢瘫痪,4 分 = 前肢无力,5 分 = 濒死或死亡。该疾病通常呈复发缓解型病程。研究结束时,收集脊髓和脑组织进行组织病理学检查,以评估脱髓鞘和炎症情况。
药代性质 (ADME/PK)
PLP 139-151 的药代动力学特性符合免疫用肽的特征。该肽的分子式为 C72H104N20O16S,分子量为 1537.79 g/mol。PLP 139-151 的水溶性为 90 mg/mL。当与弗氏完全佐剂混合使用时,该肽会从乳剂中缓慢释放,从而持续暴露于抗原以激活免疫反应。该肽通常不作为治疗药物使用,而是作为免疫原诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)。由于该肽主要用作研究工具而非治疗候选药物,因此关于 PLP 139-151 的吸收、分布、代谢和消除的全面药代动力学研究报道较少。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
PLP 139-151 仅供实验室研究使用,尚未进行全面的毒理学测试。作为一种源自自身蛋白(髓鞘蛋白脂蛋白)的肽,该化合物具有免疫原性,与佐剂联合使用时可诱发自身免疫性疾病。这是诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 的预期效果,并非毒理学问题。然而,在免疫接种所用的浓度下,该肽本身无毒。通常会进行标准的体外细胞毒性试验以排除非特异性毒性。在体内,用 PLP 139-151 免疫的动物会接受 EAE 临床症状和一般健康状况的监测。目前尚未有关于 PLP 139-151 的全面毒理学表征(包括遗传毒性和重复给药毒性研究)的报道。该肽未获准用于人体,仅供研究用途。
参考文献
[1]. Kuchroo VK, et al. Induction of experimental allergic encephalomyelitis by myelin proteolipid-protein-specific T cell clones and synthetic peptides. Pathobiology. 1991;59(5):305-12.
[2]. Sobel RA, et al. Acute experimental allergic encephalomyelitis in SJL/J mice induced by a synthetic peptide ofmyelin proteolipid protein. J Neuropathol Exp Neurol. 1990 Sep;49(5):468-79.
[3]. Bebo BF Jr, et al. Male SJL mice do not relapse after induction of EAE with PLP 139-151. J Neurosci Res. 1996 Sep 15;45(6):680-9.
其他信息
PLP 139-151 是一种合成肽,对应于髓鞘蛋白脂蛋白 (PLP) 的 139 至 151 位氨基酸残基。它广泛用于诱导 SJL/J 小鼠发生复发缓解型实验性自身免疫性脑脊髓炎 (RR-EAE),SJL/J 小鼠是多发性硬化症的成熟动物模型。该肽的分子式为 C72H104N20O16S,分子量为 1537.79 g/mol。PLP 139-151 可激活识别 PLP 表位的自身反应性 T 细胞,从而导致对中枢神经系统髓鞘的自身免疫攻击。该肽也用于体外研究 T 细胞对髓鞘抗原的反应。PLP 139-151 尚未进入临床试验,也未获得任何适应症的监管批准。它仅可从研究化学品供应商处获得,用于非临床研究用途。 PLP 139-151 是研究多发性硬化症免疫发病机制和评估潜在治疗干预措施的宝贵研究工具。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C72H104N20O16S
分子量
1537.7856
精确质量
1536.77
CAS号
131334-43-5
PubChem CID
102601612
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
LogP
3.976
tPSA
605.02
氢键供体(HBD)数目
20
氢键受体(HBA)数目
22
可旋转键数目(RBC)
47
重原子数目
109
分子复杂度/Complexity
3040
定义原子立体中心数目
11
SMILES
S([H])C([H])([H])[C@@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12)C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N=C([H])N1[H])C(N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])C([H])([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])=O)C([H])([H])C(=O)O[H])=O)=O)=O)=O)C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N=C([H])N1[H])N([H])[H])=O
InChi Key
VTBYVGRYDXYLHZ-UVIWMAFZSA-N
InChi Code
InChI=1S/C72H104N20O16S/c1-40(2)25-51(63(98)80-36-60(94)84-55(30-45-34-77-39-82-45)71(106)92-24-14-21-58(92)70(105)89-54(31-61(95)96)68(103)85-50(20-11-13-23-74)66(101)90-56(72(107)108)27-42-15-6-5-7-16-42)86-67(102)53(28-43-32-78-48-18-9-8-17-46(43)48)88-65(100)49(19-10-12-22-73)83-59(93)35-79-64(99)52(26-41(3)4)87-69(104)57(37-109)91-62(97)47(75)29-44-33-76-38-81-44/h5-9,15-18,32-34,38-41,47,49-58,78,109H,10-14,19-31,35-37,73-75H2,1-4H3,(H,76,81)(H,77,82)(H,79,99)(H,80,98)(H,83,93)(H,84,94)(H,85,103)(H,86,102)(H,87,104)(H,88,100)(H,89,105)(H,90,101)(H,91,97)(H,95,96)(H,107,108)/t47-,49-,50-,51-,52-,53-,54-,55-,56-,57-,58-/m0/s1
化学名
(3S)-3-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-4-[[(2S)-6-amino-1-[[(1S)-1-carboxy-2-phenylethyl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~100 mg/mL (~65.03 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (32.51 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.6503 mL 3.2514 mL 6.5028 mL
5 mM 0.1301 mL 0.6503 mL 1.3006 mL
10 mM 0.0650 mL 0.3251 mL 0.6503 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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