pNPP

别名: 4-硝基苯磷酸二钠;磷酸-4-硝基苯酯二钠盐;六水合4-硝基苯酚磷酸钠;对硝基苯磷酸二钠,六水合物;对硝基苯磷酸二钠;4-硝基苯基磷基二钠盐;4-硝基苯基磷酸二钠盐;4-硝基苯基磷酸二钠盐(易制爆);4-硝基苯基磷酸二钠盐六水合物;4-硝基苯磷酸单钠 PNPP;4-硝基苯磷酸二钠 PNPP;4-硝基苯磷酸二钠(PNPP);4-硝基苯磷酸二钠,BR;4-硝基苯磷酸二钠盐 p-NPP;PNPP 4-硝基苯基磷酸二钠盐;对硝基苯磷酸二钠 六水
目录号: V27684 纯度: ≥98%
PNPP(对硝基苯基磷酸酯)二钠是一种非蛋白质显色底物,适用于 ELISA 和传统分光光度测定中使用的碱性和酸性磷酸酶。
pNPP CAS号: 4264-83-9
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
500mg
1g
5g
Other Sizes

Other Forms of pNPP:

  • 磷酸单硝基苯基酯
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产品描述
对硝基苯磷酸酯 (PNPP) 二钠盐是一种非蛋白显色底物,可用于酶联免疫吸附试验 (ELISA) 和常规分光光度法测定碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性。
对硝基苯磷酸酯 (pNPP,CAS 编号:4264-83-9),也称为对硝基苯磷酸酯二钠盐或 PNPP 二钠盐,是一种非蛋白显色底物,可用于酶联免疫吸附试验 (ELISA) 和常规分光光度法测定碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性。其分子式为 C6H4NNa2O6P,分子量为 263.05 g/mol,是一种广泛用于生化分析的底物,尤其适用于测定碱性磷酸酶活性。作为一种比色试剂,pNPP 是 ELISA 实验中测定碱性磷酸酶活性的首选底物。
生物活性&实验参考方法
靶点
As a substrate, pNPP does not have a biological target. It is a chromogenic substrate that is hydrolyzed by alkaline and acid phosphatases. The enzyme catalyzes the hydrolysis of pNPP to para-nitrophenol and inorganic phosphate. The product, para-nitrophenol, is yellow in alkaline conditions and can be quantified spectrophotometrically. This reaction is the basis for measuring phosphatase activity in biochemical and immunological assays.
体外研究 (In Vitro)
对硝基苯酚磷酸酯 (PNPP) 的水解由磷酸酶催化,释放出无机磷酸盐和对硝基苯酚的共轭碱 (pNP)。生成的酚盐的最大吸收波长为 405 nm,呈黄色[1]。
作为底物,pNPP 本身不具有直接的药理活性。其活性通过磷酸酶的水解速率来评估。在 ELISA 和其他检测方法中,生成的对硝基苯酚的量与酶的量成正比。该化合物在体外的应用价值在于其能够作为一种灵敏便捷的底物来检测磷酸酶的活性。
体内研究 (In Vivo)
pNPP不用于体内药理学应用。它是一种用于生化分析的体外试剂。该化合物不具有任何体内活性或治疗作用。它仅用于实验室研究和诊断应用。
酶活实验
使用对硝基苯酚 (pNPP) 的磷酸酶活性测定可在微孔板或比色皿中进行。将底物溶解于合适的缓冲液中(例如,碱性磷酸酶测定使用 1 M 二乙醇胺缓冲液,pH 9.8)。将酶样品(例如,ELISA 中的碱性磷酸酶偶联抗体)与 pNPP 在 37°C 下孵育 15-60 分钟。加入 NaOH 或其他终止液终止反应。使用分光光度计或微孔板读数仪在 405 nm 处测量吸光度。根据标准曲线计算生成的对硝基苯酚的量。每次测定均包含适当的对照和空白。
细胞实验
pNPP不用于基于细胞的药理学评价检测。它是一种生化试剂,用于ELISA和其他酶活性检测。在这些检测中,将底物添加到反应混合物中,并通过有色产物的生成来测量酶活性。该化合物作为底物不适用于任何细胞培养方案。
动物实验
pNPP不用于动物实验。它是一种用于生化和诊断应用的体外试剂。由于它并非候选药物,因此未进行任何体内研究。它仅用于实验室研究。
药代性质 (ADME/PK)
pNPP的分子量为263.05 g/mol,分子式为C6H4NNa2O6P。它是一种白色至类白色结晶性粉末。溶解性:溶于水。储存:通常在室温下避光保存。作为一种生化试剂,它在推荐的储存条件下稳定。由于它并非候选药物,因此没有药代动力学数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
pNPP被认为对实验室使用安全。它并非候选药物,也没有治疗用途。应遵循化学品操作的标准安全预防措施。它可能刺激眼睛、皮肤和呼吸道。该化合物仅供研究和诊断用途。
参考文献

[1]. Evaluation of the use of chromogenic and fluorogenic substrates in solid-phase enzyme linked immunosorbent assays (ELISA). Biologicals. 1990 Oct;18(4):331-6.

其他信息
pNPP 又称 4-硝基苯基磷酸二钠盐、PNPP 二钠盐和 BNPP 钠盐。它是一种非蛋白显色底物,可用于碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性测定。pNPP 广泛用于酶联免疫吸附试验 (ELISA) 和常规分光光度法测定磷酸酶活性。目前尚未有临床试验或监管部门批准的报道。该化合物仅供研究和诊断用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C6H4NNA2O6P
分子量
263.0524
精确质量
218.993
CAS号
4264-83-9
相关CAS号
330-13-2 (Parent)
PubChem CID
77949
外观&性状
White to yellow solid powder
密度
1.7±0.1 g/cm3
沸点
457.8±47.0 °C at 760 mmHg
熔点
>300 °C(lit.)
闪点
230.7±29.3 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.617
LogP
0.37
tPSA
128.05
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
16
分子复杂度/Complexity
238
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
VIYFPAMJCJLZKD-UHFFFAOYSA-L
InChi Code
InChI=1S/C6H6NO6P.2Na/c8-7(9)5-1-3-6(4-2-5)13-14(10,11)12;;/h1-4H,(H2,10,11,12);;/q;2*+1/p-2
化学名
disodium;(4-nitrophenyl) phosphate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~160 mg/mL (~608.25 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (380.16 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.8016 mL 19.0078 mL 38.0156 mL
5 mM 0.7603 mL 3.8016 mL 7.6031 mL
10 mM 0.3802 mL 1.9008 mL 3.8016 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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