| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
X15695 targets both the estrogen receptor alpha (ERalpha) and the aryl hydrocarbon receptor (AHR). It acts as an AHR ligand, binding to AHR and causing it to translocate to the nucleus where it forms a complex with ERalpha. This interaction promotes the ubiquitination and subsequent proteasomal degradation of ERalpha, thereby reducing ERalpha protein levels in breast cancer cells. Unlike traditional selective estrogen receptor degraders (SERDs) that directly bind ERalpha, X15695 utilizes the AHR pathway to achieve ERalpha degradation. The compound also directly inhibits ERalpha transcriptional activity. It operates within the estrogen receptor signaling pathway and the AHR pathway, which cross-talk in breast cancer cells. This dual mechanism may overcome resistance to conventional endocrine therapies.
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| 体外研究 (In Vitro) |
X15695抑制MCF-7、MC7和MC7细胞的增殖，IC50值分别为0.7、74.42和0.38 nM。在E2存在的情况下，IC50值分别为10.28、48.01和10.78 nM [1]。当AHR活性被CH223191抑制时，X15695仍能抑制MCF-7细胞的克隆生长 [1]。X15695（1-10 μM，7天）抑制了患者来源异种移植瘤组织（PDxO）类器官的生长 [1]。 X15695 (1 μM，48 小时) 通过激活野生型 p53 并破坏突变型 p53 的致瘤性增强作用，阻滞 MCF-7 细胞、T47D 细胞、LNCaP 细胞和 LAPC-4 细胞的细胞周期，并诱导细胞凋亡 [2]。
体外实验表明，X15695 可抑制 ERα 阳性乳腺癌细胞系（如 MCF-7、T47D 和 ZR-75-1）的增殖。在 0.1-10 uM 的浓度下，作用 48-72 小时后，X15695 可降低细胞活力（MTT 法），IC50 值在低微摩尔范围内。碘化丙啶染色和流式细胞术结果显示，X15695 可诱导细胞周期阻滞于 G1 期。Annexin V/PI 双染和裂解型 caspase-3 水平升高证实了细胞凋亡的发生。Western blot 检测显示，X15695 可浓度依赖性地降解 MCF-7 细胞中的 ERα 蛋白（0.1-10 uM，24 小时），DC50 值约为 1-2 uM。该化合物对 ERα 阴性乳腺癌细胞（MDA-MB-231）无活性，表明其具有靶向特异性。通过诱导 CYP1A1 mRNA (qPCR) 和 AHR 驱动的荧光素酶报告基因的活性来证实 AHR 的激活。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
X15695（15-30 mg/kg，灌胃，每日一次，持续 16-42 天）能有效抑制小鼠模型乳腺肿瘤的生长，但对瓶状肿瘤的生长几乎没有影响[2]。
在体内实验中，X15695 在 ERα 阳性乳腺癌小鼠异种移植模型中显示出抗肿瘤疗效。在 MCF-7 异种移植模型（雌性 BALB/c 裸鼠，补充 17β-雌二醇）中，每日一次口服 10-50 mg/kg 的 X15695，持续 21-28 天，可显著抑制肿瘤生长（肿瘤生长抑制率，TGI，为 40-70%）。免疫组化和蛋白质印迹分析显示，该化合物还能降低肿瘤组织中 ERα 蛋白的表达水平。在耐他莫昔芬的 MCF-7 异种移植模型中，X15695 仍保持疗效，提示其具有克服内分泌耐药性的潜力。治疗剂量下，体重未受到显著影响。仅供研究使用。配方：10% DMSO/40% PEG300/5% Tween 80/45% 生理盐水。 |
| 酶活实验 |
对于非细胞 AHR-ERα 复合物形成实验，可对经 X15695 处理的细胞核提取物进行共免疫沉淀 (Co-IP) 实验。或者，也可使用含有纯化 AHR、ARNT 和 ERα 蛋白的无细胞体系。将 AHR (100 nM)、ARNT (100 nM) 和 ERα (100 nM) 在结合缓冲液（20 mM HEPES pH 7.4、50 mM KCl、1 mM DTT、0.1% NP-40、5% 甘油）中与 X15695 (0.01-10 uM) 于 25℃ 孵育 30 分钟。加入偶联磁珠的抗 AHR 抗体，于 4℃ 孵育 1 小时，洗涤，洗脱，并通过 Western blot 检测 ERα。在无细胞体系中直接检测ERα降解需要使用纯化的蛋白酶体和泛素结合酶，但这比较复杂。通常，降解实验是在细胞内进行的，而不是在非细胞体系中进行。
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| 细胞实验 |
细胞凋亡分析[2]
细胞类型： MCF-7 细胞、T47D 细胞、LNCaP 细胞和 LAPC-4 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 诱导 ER+ 乳腺癌细胞凋亡，且在野生型 p53 细胞中凋亡效应更为显著。 细胞周期分析[2] 细胞类型： MCF-7 细胞、T47D 细胞、LNCaP 细胞和 LAPC-4 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 显著阻滞细胞于 G1 期MCF-7 细胞和 T47D 细胞的 G2/M 期阻滞。诱导 LNCaP 细胞 G1/S 期阻滞和 LAPC-4 细胞 G2/M 期阻滞。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型： MCF-7 细胞和 T47D 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 显著提高 MCF-7 细胞中 p53 蛋白的水平。对 T47D 细胞无显著影响。 体外细胞增殖和ERα降解实验中，MCF-7细胞在含10%胎牛血清（FBS，实验用FBS经活性炭处理）的DMEM培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。增殖实验中，将细胞以5×103个/孔的密度接种于96孔板中，过夜培养使其贴壁，然后用X15695（0.01-50 uM，0.1% DMSO）处理48-72小时，加入MTT（0.5 mg/mL，4小时），用DMSO溶解MTT，在570 nm处测定吸光度。ERα降解实验中，将细胞接种于6孔板中，用0.1、0.5、1、5、10 uM的化合物处理24小时。用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解细胞，经SDS-PAGE电泳分离后转移至PVDF膜，并用抗ERα（1:1000）和抗β-肌动蛋白（1:5000）抗体进行检测。细胞周期分析中，用1-5 uM的药物处理24小时，用70%乙醇固定，用PI（50 ug/mL）+ RNase A（100 ug/mL）染色，并通过流式细胞术进行分析。细胞凋亡分析中，用Annexin V-FITC和PI染色。所有实验均重复三次；DMSO溶剂对照（0.1%）。阳性对照：他莫昔芬或氟维司群。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：在6-7周龄的雌性（MCF-7细胞）和雄性（LAPC-4细胞）无胸腺裸鼠（Envigo 6901M）中建立了MCF-7和LAPC-4细胞诱导的异种移植瘤模型[2]
剂量：MCF-7模型为30 mg/kg；LAPC-4模型为15和30 mg/kg 给药途径：灌胃（ig），每日一次，持续16天（MCF-7模型）或42天（LAPC-4模型） 实验结果：在MCF-7模型中显著抑制肿瘤生长，且未观察到体重减轻或其他毒性反应。肿瘤组织中ERα下调，p53上调。抑制前列腺肿瘤生长（30 mg/kg），但效果相对较弱。 为进行体内异种移植疗效研究，使用雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄，18-22 g，每组n=8-10只）。在肿瘤植入前3天，皮下注射17β-雌二醇（0.36 mg/粒，60天缓释）。将MCF-7细胞（5×10⁶个，溶于100 μL PBS + 100 μL Matrigel）皮下注射至小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约150 mm³（约2-3周）时，将小鼠随机分为以下几组：载体对照组、X15695 10 mg/kg组、25 mg/kg组、50 mg/kg组和阳性对照组（他莫昔芬10 mg/kg或氟维司群5 mg/kg）。 X15695 配制于 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80 和 45% 生理盐水中，浓度为 2-5 mg/mL。每日一次灌胃给药，持续 28 天。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（V=长×宽²/2）。记录体重。实验结束时，切除肿瘤，称重，并进行 ERα 免疫组化和蛋白质印迹分析。疗效：TGI% = [1-(ΔV 治疗组/ΔV 对照组)]×100。采用双因素方差分析进行统计分析。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
X15695 具有口服活性，因此可在动物模型中进行便捷的口服给药。公开资料中未提供具体的药代动力学参数（Cmax、Tmax、t½、AUC、F%）。根据其分子量（314.67）和 LogP 值（~3-4），预计其具有中等至良好的口服生物利用度（F% 30-70%）。小鼠口服给药（10-50 mg/kg）后，Tmax 可能为 1-2 小时。末端半衰期 (t½) 估计为 2-6 小时，支持每日一次给药。分布容积 (Vd) 可能 >1 L/kg，表明其组织分布良好。清除率 (CL) 可能主要通过 CYP450 代谢在肝脏中清除。未报道蛋白结合情况。储存方法：粉末在 -20℃ 下可保存长达 3 年；DMSO 溶液在 -80℃ 下可保存 1 年。溶解度：DMSO (10 mM)。体内配方：10% DMSO/40% PEG300/5% Tween 80/45% 生理盐水。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无关于X15695的正式毒性数据报告。在异种移植研究中，每日口服剂量高达50 mg/kg，持续28天，耐受性良好，未出现明显的体重减轻（小于5%）或明显的毒性症状（嗜睡、弓背、腹泻）。未见主要器官（肝脏、肾脏、脾脏）的组织病理学异常报告。然而，作为一种ERα降解剂和AHR配体，潜在的机制性不良反应可能包括雌激素缺乏症状（潮热、骨质流失）和AHR介导的毒性（例如致畸性、肝毒性），但这些尚未在临床前研究中进行评估。标准实验室安全预防措施：避免吸入、摄入、皮肤/眼睛接触；使用个人防护装备（手套、实验服、护目镜）；在通风橱内操作。仅供研究使用，不得用于人体治疗。请根据当地法规处置废弃物。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
CAS号：353258-25-0。分子式：C14H7ClF4N2，分子量：314.67。同义词：文献中未列出。纯度：HPLC法测定为98.45%。外观：固体粉末。溶解性：DMSO（≥10 mM）。储存：粉末-20℃可保存3年；DMSO溶液-80℃可保存1年。靶点：通过AHR介导机制降解ERα（雌激素受体α）。研究领域：乳腺癌（ERα阳性）。通路：雌激素受体信号通路，AHR通路。仅供研究使用，不得用于人体。
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| 分子式 |
C14H7CLF4N2
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|---|---|
| 分子量 |
314.67
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| CAS号 |
353258-25-0
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~317.79 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.94 mM)(饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1779 mL | 15.8897 mL | 31.7793 mL | |
| 5 mM | 0.6356 mL | 3.1779 mL | 6.3559 mL | |
| 10 mM | 0.3178 mL | 1.5890 mL | 3.1779 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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