| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Fibrin – Directly hydrolyzes fibrin and plasmin substrate [1]
- Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) – Degrades PAI-1 [1] - Prourokinase – Converts endogenous prourokinase to urokinase (uPA) [1] - Tissue plasminogen activator (t-PA) – Increases t-PA levels [1] Nattokinase targets fibrin, the insoluble protein matrix of blood clots. It is a potent fibrinolytic enzyme that breaks down blood clots by directly hydrolyzing fibrin and plasmin substrates. Nattokinase also degrades plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1), the primary inhibitor of tissue plasminogen activator (tPA), thereby promoting fibrinolysis. It inhibits platelet aggregation and has anticoagulant properties. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
纳豆激酶具有很强的纤溶活性；它可以溶解人工纤维蛋白并降解纤溶酶底物[1]
- 来自铜绿假单胞菌CMSS UV60突变株的纳豆激酶在体外血凝块溶解试验中，10分钟内即可溶解94%的血凝块[2] - 来自UV60突变株的部分纯化纳豆激酶（70%硫酸铵沉淀）在纤维蛋白平板试验中，于37°C孵育2小时后，纤维蛋白凝块的液化率达到最大值[2] - 酪蛋白消化试验：使用0.1 mL 2%酪蛋白、0.7 mL 0.1 M磷酸钠缓冲液和0.1 mL酶，在室温下孵育5分钟，用0.1 mL 1.5 M三氯乙酸终止反应，测定纳豆激酶活性；在 560 nm 处测定吸光度；一个单位的酪蛋白水解活性定义为每分钟释放 1 μM 酪氨酸当量所需的酶量 [2] - 纤维蛋白降解试验（改良的纤维蛋白平板法）：在含有 9 mL 0.2% 纤维蛋白原溶液的培养皿中加入 0.2 mL 纤溶酶原 (10 U) 和 0.2 mL 凝血酶 (20 U)，于 37°C 孵育 15 分钟以形成凝块；将酶溶液滴在纤维蛋白凝块表面；于 37°C 孵育 2 小时；目测检查液化情况[2] - SDS-PAGE 证实铜绿假单胞菌 CMSS UV60 的纳豆激酶分子量为 21 kDa [2] 加入纳豆激酶后，94% 的血凝块在 10 分钟内溶解，纤维蛋白凝块在 2 小时后分解 [2]。 体外实验表明，纳豆激酶是一种强效的纤溶酶，可通过直接水解纤维蛋白和纤溶酶底物来分解血凝块。它在 10 分钟内溶解 94% 的血凝块，并在孵育 2 小时后降解纤维蛋白凝块。纳豆激酶具有强大的纤溶活性，常用于心血管疾病的研究。其降解纤维蛋白和 PAI-1 的能力使其成为研究血栓形成和纤溶的宝贵工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在化学诱导血栓形成（趾部注射角叉菜胶）的大鼠模型中，口服纳豆激酶（150 mg/kg 或 250 mg/kg，每日两次，持续 2 天）可导致血栓溶解；高剂量纳豆激酶（250 mg/kg）使血栓面积减少至血管横截面积的 38.76%（阴性对照组为 62.68%）；低剂量纳豆激酶（150 mg/kg）使血栓面积减少至 47.15% [3]
- 与生理盐水对照组（15.10 ± 4.38 pg/mL，p < 0.05）相比，高剂量纳豆激酶（250 mg/kg）显著提高了血浆 FDP 水平（低剂量组为 48.60 ± 7.10 pg/mL，高剂量组更高）； D-二聚体水平也升高（低剂量组为 32.51 ± 2.11 ng/mL，对照组为 29.14 ± 0.23 ng/mL，低剂量组 p > 0.05；高剂量组 p > 0.05）[3] - 高剂量纳豆激酶的溶栓效果与蚯蚓激酶（阳性对照，200 mg/kg）相当，FDP 或 D-二聚体水平无显著差异（p > 0.05）[3] - 在犬中，口服四粒纳豆激酶胶囊（每粒 2000 FU）可在五小时内完全溶解化学诱导的大腿静脉血栓，并恢复正常血流[1] - 在大鼠颈总动脉血栓模型中，纳豆激酶治疗的大鼠恢复了 62% 的动脉血流；这比纤溶酶（回收率 15%）或弹性蛋白酶（回收率 0%）强得多[1] - 纳豆激酶抑制氯化铁 (FeCl₃) 诱导的氧化性血栓形成和血小板聚集；其作用类似于阿司匹林，但不会引起出血或胃溃疡等不良反应[1] - 在大鼠尾部 κ-角叉菜胶诱导的炎症性血栓模型中，灌胃给予纳豆激酶 12 小时后，检测到 FDP 片段和 D-二聚体水平升高；活检分析显示血管内血栓形成减少超过 50%[1] - 在一项人体试验中，健康志愿者、有心血管危险因素的患者和接受透析的患者每天口服两粒纳豆激酶胶囊（2000 FU/粒），持续两个月，结果显示因子 VII、因子 VIII 和纤维蛋白原显著降低；未检测到不良反应；心率、体重和尿酸水平保持稳定[1] - 在 12 名健康年轻男性中，单次口服纳豆激酶胶囊（2000 FU）导致 2 小时抗凝血酶浓度显著升高；4 小时观察到 FDP 片段；6 小时观察到 D-二聚体；因子VIII活性在4小时后下降[1] - 纳豆激酶可以以完整形式从大鼠肠道吸收，并在血浆中降解纤维蛋白原[1] - 在健康人中，单次口服胶囊剂（2000 FU/100 mg）后，可在血清中检测到完整的纳豆激酶[1] 体内，纳豆激酶（150–250 mg/kg；每日两次口服，连续两天）表现出纤溶活性并能溶解血栓[3]。 体内，纳豆激酶具有口服生物利用度和纤溶/抗凝特性。它能降解纤维蛋白和PAI-1以溶解血栓，同时抑制血小板聚集。纳豆激酶可用于研究心血管疾病，包括血栓形成、动脉粥样硬化和中风。它也因其在阿尔茨海默病研究中的潜力而受到研究。纳豆激酶被归类为研究性化合物，目前正在进行临床评估，包括临床试验 NCT00749801，以评估其疗效和安全性。 |
| 酶活实验 |
酪蛋白消化测定：纳豆激酶活性测定采用 0.1 mL 2% 酪蛋白、0.7 mL 0.1 M 磷酸钠缓冲液和 0.1 mL 部分纯化的酶或粗提物，室温孵育 5 分钟。加入 0.1 mL 1.5 M 三氯乙酸终止反应，8000 rpm 离心 10 分钟。取上清液，在 560 nm 波长处测定吸光度。一个酪蛋白水解活性单位 (U) 定义为每分钟释放 1 μM 酪氨酸当量所需的酶量 [2]
- 纤维蛋白降解测定（改良纤维蛋白平板法）：将含有 9 mL 0.2% 纤维蛋白原溶液的培养皿置于水平玻璃板上。加入 0.2 mL 纤溶酶原 (10 U) 并充分混匀。加入 0.2 mL 凝血酶溶液（20 U）诱导凝血。将培养板置于 37°C 孵育 15 分钟以加速凝血。将已知量的酶溶液以小液滴形式滴加在纤维蛋白凝块表面。然后将培养板置于 37°C 孵育 2 小时，并目测观察凝块液化情况 [2] - 血凝块溶解试验：将 500 μL 静脉血转移至预先称重的无菌微量离心管中，并在 37°C 孵育 45 分钟以形成血凝块。吸出血清，并重新称量含有凝块的离心管以确定凝块重量。向凝块中加入 100 μL 粗酶液或硫酸铵沉淀的酶液。将离心管置于 37°C 孵育 90 分钟，并观察凝块溶解情况。孵育后，移除液体并重新称重试管。血凝块溶解前后重量差以血凝块溶解百分比表示[2]。纳豆激酶的体外酶活性测定通常包括使用纤维蛋白平板法或显色底物法测定其纤溶活性。在纤维蛋白平板法中，将酶加至含有纤维蛋白的琼脂平板上，并测量溶解区的直径。在显色底物法中，将纳豆激酶与合成肽底物（例如，纤溶酶底物S-2251）孵育，并通过分光光度法测定对硝基苯胺的释放量。该酶降解PAI-1的能力可通过Western blot或活性测定进行评估。 |
| 细胞实验 |
纳豆激酶的体外细胞检测方法包括培养细胞（例如内皮细胞、平滑肌细胞），并用该酶处理细胞，以评估其对纤维蛋白溶解、细胞迁移或炎症反应的影响。该酶降解纤维蛋白凝块的能力可在血栓形成的细胞培养模型中进行评估。细胞毒性可通过 MTT 或 LDH 释放试验进行评估。纳豆激酶对血小板聚集的影响可通过富血小板血浆和血小板聚集试验进行评估。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： SD（Sprague-Dawley）大鼠（180-220 g）注射κ-角叉菜胶[3]
剂量： 150、250 mg/kg 给药途径： 每日两次灌胃（po），连续2天 实验结果： 血浆中纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物（FDP）和D-二聚体的浓度呈剂量依赖性增加。血栓占据血管横截面的比例降低。 - 大鼠血栓模型（角叉菜胶诱导）：健康雌性Sprague-Dawley大鼠（180-220 g，尾长>13 cm）禁食8小时。将κ-卡拉胶溶于生理盐水（4 mg/L），并以2.0 mg/kg的浓度皮下注射到大鼠趾部。约12小时后观察尾部形态。将大鼠随机分为4组（每组n=6）：低剂量纳豆激酶组（150 mg/kg，灌胃，每日两次，连续2天）、高剂量纳豆激酶组（250 mg/kg，灌胃，每日两次，连续2天）、阳性对照组（小肠激酶，200 mg/kg，灌胃，每日两次，连续2天）和阴性对照组（生理盐水，灌胃，每日两次，连续2天）。末次给药后 12 小时，用 20% 氨基甲酸乙酯（5 mL/kg，腹腔注射）麻醉大鼠，从腔静脉后抽取血液至含有 0.109 mol/L 柠檬酸钠的抗凝管中，以 3,000 rpm 离心 20 分钟，收集血浆用于 FDP 和 D-二聚体 ELISA 检测。大鼠通过脊髓脱臼处死，并收集耳组织进行组织病理学检查 [3] - 大鼠颈总动脉血栓模型：大鼠口服纳豆激酶；评估化学诱导血栓的血流恢复情况 [1] - 犬腿静脉血栓模型：犬口服 4 粒纳豆激酶胶囊（2000 FU/粒）；在主要腿部静脉中化学诱导的血栓中，评估其在五小时内的溶解情况[1] - 大鼠尾部炎症血栓模型（κ-卡拉胶）：通过灌胃给予大鼠纳豆激酶；12 小时后，分析血液样本中的 FDP 片段和 D-二聚体；对尾部血管进行活检以评估血栓形成情况[1] - 人体试验（健康志愿者、心血管危险因素患者、透析患者）：受试者每日口服两粒纳豆激酶胶囊（2000 FU/粒），持续两个月；测量因子 VII、因子 VIII、纤维蛋白原、心率、体重和尿酸水平[1] - 人体单剂量研究：12 名健康年轻男性随机服用一粒纳豆激酶胶囊（2000 FU）；在不同时间点采集血样，用于检测抗凝血酶浓度、FDP片段、D-二聚体和VIII因子活性[1]。纳豆激酶的体内动物研究已在多种血栓形成和心血管疾病模型中进行。标准方案包括对啮齿动物进行口服或静脉注射纳豆激酶，随后评估血栓在诸如FeCl3诱导的动脉血栓形成、大脑中动脉闭塞（卒中）或静脉血栓形成等模型中的形成和溶解情况。采集血样用于测量纤溶参数，包括纤维蛋白降解产物和PAI-1水平。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
纳豆激酶可以以完整形式从大鼠肠道吸收[1]
- 在健康人中，单次口服胶囊剂（2000 FU/100 mg）后，可在血清中检测到完整的纳豆激酶[1] - 纳豆激酶可耐受高温（50°C）和pH值高达10的环境，这有助于其在胃肠道中保持完整[1] - 与其他溶栓剂（半衰期为3-20分钟）相比，纳豆激酶的半衰期较长[3] - 纳豆激酶对胰酶具有抵抗力[3] - 这些文献中未报道具体的药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、精确半衰期）[1][2][3] 纳豆激酶的药代动力学特性包括口服生物利用度，这对于一种蛋白质酶而言并不常见。口服后，纳豆激酶经胃肠道吸收进入体循环。其半衰期相对较短，主要经肝脏和肾脏清除。血浆中该酶的活性可通过其纤溶活性来测定。临床和临床前研究可提供详细的药代动力学参数，例如Cmax、Tmax和半衰期。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项人体试验（两个月，每日两粒胶囊，每粒含 2000 FU）中，未检测到不良反应；心率、体重和尿酸水平保持稳定[1]
- 与常引起出血或胃溃疡的阿司匹林不同，纳豆激酶可改善血液流动，且无任何不良反应[1] - 与 t-PA 和 uPA 相比，纳豆激酶几乎没有副作用，而 t-PA 和 uPA 可能产生出血等各种副作用[1] - 大鼠急性毒性研究：灌胃单剂量纳豆激酶（2000 mg/kg）；在 14 天的研究期间未观察到明显的不良反应或死亡[1] - 大鼠重复给药毒性研究：每日单剂量纳豆激酶（1000 mg/kg），持续 90 天；与对照组相比，未检测到异常临床观察结果[1] - 人体未观察到不良反应剂量 (NOAEL)：健康志愿者每日口服纳豆激酶 (10 mg/kg)，持续 28 天；尿液、血压或脉搏均无显著变化[1] - 大鼠接种枯草芽孢杆菌（纳豆）（1.51×10⁹ CFU/mL）未出现毒性迹象；治疗 14 天后，组织病理学检查未在肺、肝、脑或肾脏中观察到活菌[1] - 在符合 GLP 规范的体外研究中，纳豆激酶治疗后未观察到致染色体断裂或致突变活性[1] 纳豆激酶通常被认为安全且耐受性良好。其安全性和有效性已在临床试验中得到评估。作为一种纤溶酶，其主要安全隐患是出血风险，尤其是在高剂量或与其他抗凝剂或抗血小板药物合用时。临床研究尚未报告明显的毒性反应。标准的毒理学评估包括在啮齿动物和犬类中进行的急性和亚慢性毒性研究。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶，由枯草芽孢杆菌在发酵大豆生产纳豆（一种日本传统食品）的过程中产生[1]。纳豆激酶与任何已知的激酶均无关联[1]。纳豆激酶于1980年由芝加哥大学医学院的须美博之发现[1]。纳豆激酶可通过直接水解纤维蛋白和纤溶酶底物、将内源性前尿激酶转化为尿激酶（uPA）、降解PAI-1以及增加t-PA来分解血栓[1]。纳豆激酶被认为是一种安全、有效、低成本且纯天然的补充剂，可用于治疗心脏和心血管疾病[1]。纳豆激酶的商业产品在日本、中国、韩国、欧盟国家、加拿大和美国被广泛用作膳食补充剂，用于稀释血液、预防血栓和改善血液功能。循环系统[1]
- 研究表明，纳豆激酶可以改善高血压、中风、阿尔茨海默病和动脉粥样硬化[1] - 纳豆激酶目前正在美国进行一项用于预防动脉粥样硬化血栓形成的II期临床试验（ClinicalTrials.gov 注册号：NCT02080520）[1] - 纳豆激酶的推荐用法为每日两粒胶囊（每粒100毫克）[1] - 纳豆激酶的分子量为27.7 kDa（成熟肽），由aprN基因编码[1] - 纳豆激酶的氨基酸序列与枯草杆菌蛋白酶E的同源性为99.3%[1] 纳豆激酶是一种源自纳豆发酵的丝氨酸蛋白酶。它是一种强效的纤溶酶，具有良好的口服生物利用度。纳豆激酶可降解纤维蛋白、PAI-1 和纤溶酶底物，从而溶解血栓并抑制血小板聚集。它被用于心血管疾病的研究，包括血栓形成、动脉粥样硬化和中风，也曾被用于阿尔茨海默病的研究。纳豆激酶目前被列为研究性化合物，在大多数国家尚未获准作为治疗药物使用。 |
| CAS号 |
133876-92-3
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|---|---|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.580
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| SMILES |
ClC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(B1OC(C([H])([H])C(C(=O)O[H])(C([H])([H])C(=O)O[H])O1)=O)C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)Cl
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| 别名 |
Kinase, Natto fermentation
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: ~100 mg/mL
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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