Recombinant DNase I (RNase-free)

别名: 脱氧核糖核酸酶;去氧核糖核酸酶;脱氧核糖核酸;胰道酶;胰克氧核糖核酸酶;除氧细胞核酸酶(牛胰);去氧细胞核酸酶;DNA酶;脱氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰);Deoxyribonuclease from Bovine Spleen 脱氧核糖核酸酶,从牛脾所得;DNAse I 脱氧核糖核酸酶I;DNA酶(脱氧核糖核酸酶);DNA酶,脱氧核糖核酸酶Ⅰ;DNA酶I 来源于牛胰腺(过滤);脱氧核糖核酸酶 I;脱氧核糖核酸酶,从牛脾所得;脱氧核糖核酸酶1(牛胰腺由来);脱氧核糖核酸酶Ⅰ;脱氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)DNAaseI;DNA酶,≥2,000 Kunitz units;DNA酶,DNAase,≥2,000 Kunitz units;DNA酶,DNAase,≥300 Kunitz units;N,N-二乙基氯乙酰胺;脱氧核糖核酸酶,牛胰;脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶;脱氧核糖核酸酶I;瑞士乳杆菌
目录号: V60921 纯度: Recombinant DNase I
Recombinant DNase I(不含 RNase)是一种重组脱氧核糖核酸酶,可以降解 DNA。
Recombinant DNase I (RNase-free) CAS号: 9003-98-9
产品类别: Nuclease
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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100mg
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产品描述
重组DNase I(无RNase)是一种能够降解DNA的重组脱氧核糖核酸酶。重组DNase I对于限制炎症反应和维持体内平衡至关重要。
重组DNase I(无RNase)是一种能够催化DNA降解的重组脱氧核糖核酸酶。它是一种内切酶,优先水解嘧啶核苷酸邻近位点的双链或单链DNA。本产品基本不含RNase和蛋白酶活性。它为灰白色至浅黄色固体粉末,对于限制炎症反应和维持体内平衡至关重要。
生物活性&实验参考方法
靶点
Recombinant DNase I targets DNA molecules, specifically catalyzing the endonucleolytic cleavage of phosphodiester bonds in DNA. It preferentially cleaves DNA at sites adjacent to pyrimidine nucleotides, producing oligonucleotides with 5'-phosphate termini. In biological systems, DNase I plays a critical role in limiting inflammatory responses by degrading extracellular DNA that can trigger immune activation, thereby helping to maintain homeostasis.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,重组DNase I(无RNase)具有强大的DNA降解活性。由于其不含RNase活性,因此被广泛应用于分子生物学领域,用于去除RNA制备物中的DNA污染。该酶的活性可通过其降解DNA底物的能力来衡量,通常在二价金属离子(如Mg²⁺或Mn²⁺)存在下活性最佳。
体内研究 (In Vivo)
在体内,重组DNase I通过降解可激活炎症通路的细胞外DNA,在限制炎症反应中发挥着至关重要的作用,从而有助于维持体内平衡。DNase I的治疗应用包括治疗与DNA过度积累相关的疾病,例如囊性纤维化,在囊性纤维化中,DNase I可通过降解气道分泌物中的DNA来降低黏液黏度。
酶活实验
重组DNase I的酶活性测定包括将酶与DNA底物孵育,并测量酸溶性寡核苷酸的生成或DNA黏度的降低。活性可通过分光光度法定量,即监测DNA水解过程中260 nm处吸光度的增加。一个DNase I活性单位通常定义为每分钟引起吸光度增加0.001所需的酶量。
细胞实验
重组DNase I通常不用于细胞检测,因为它的主要应用领域是分子生物学和生物化学研究。然而,该酶可在细胞模型中进行研究,以评估其对细胞外DNA降解和炎症的影响。此外,还可以用DNase I处理细胞,以评估其对DNA介导的免疫反应的影响。
动物实验
已建立了重组DNase I的体内动物实验方案,用于治疗应用。该酶通常通过吸入或注射给药,其疗效通过测量靶组织中DNA含量的降低来评估。在囊性纤维化模型中,使用DNase I来评估其对黏液清除和肺功能的影响。
药代性质 (ADME/PK)
重组DNase I的药代动力学特性取决于给药途径。该酶的分子量约为31 kDa。吸入给药时,它主要在气道局部发挥作用,全身吸收有限。该酶通常以冻干粉末的形式储存在-20°C,在适当的储存条件下稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
重组DNase I的毒理学数据来源于其治疗应用。该酶通常耐受性良好,最常见的副作用是吸入给药时出现轻微的咽喉刺激和声音改变。作为研究试剂,其操作需遵循标准的实验室防护措施。无RNase配方确保其不会降解RNA。
参考文献

[1]. Deoxyribonucleases and Their Applications in Biomedicine. Biomolecules. 2020 Jul 11;10(7):1036.

[2]. Deoxyribonuclease treatment prevents blood-borne liver metastasis of cutaneously transplanted tumour cells in mice. Br J Cancer. 1993 Jan;67(1):66-70.

其他信息
重组DNase I(无RNase)是一种仅供研究使用的生化试剂。由于其不含RNase和蛋白酶活性,因此广泛用于分子生物学中从RNA制备物中去除DNA。它也用于诊断应用和治疗制剂。该酶对于限制炎症反应和维持体内平衡至关重要。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C12H22N4O6
分子量
318.32628
CAS号
9003-98-9
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
密度
100 g/mL at 20 °C
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~43.48 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 5 mg/mL (Infinity mM) in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液; 超声助溶 (<60°C).
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1414 mL 15.7070 mL 31.4139 mL
5 mM 0.6283 mL 3.1414 mL 6.2828 mL
10 mM 0.3141 mL 1.5707 mL 3.1414 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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