| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SPAK[1]
STE20/SPS1-related proline-alanine-rich kinase (SPAK). ZT-1a is a non-ATP-competitive inhibitor of SPAK, meaning it binds to a site other than the ATP-binding pocket, which contributes to its selectivity. By inhibiting SPAK, it prevents the phosphorylation and activation of its downstream targets, the cation-chloride cotransporters (CCCs), including the Na-K-2Cl cotransporter (NKCC1) and the K-Cl cotransporter (KCC3). This modulation of CCC activity affects cellular ion balance, cell volume regulation, and neuronal excitability. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
ZT-1a 通过 SPS1 相关富脯氨酸/丙氨酸激酶 (SPAK) 降低 Na-K-2Cl 共转运蛋白 (NKCC1) 的磷酸化水平，并增加 K-Cl 共转运蛋白 (KCC) 的磷酸化水平 [1]。在 1 μM ZT-1a 浓度下，NKCC1 p-Thr203/207/212 位点的磷酸化抑制率为 72±5.2%；在 3 μM ZT-1a 浓度下，HEK-293 细胞中 KCC 位点 1/2 的磷酸化抑制率为 65-77% [1]。在 3-10 μM ZT-1a 浓度下，SPAK Ser373 位点的磷酸化抑制率为 70±3.8% [1]。10 μg ZT-1a 可抑制 NKCC1 活性，但增加 KCC3 活性 [1]。ZT-1a 在体外可抑制 SPAK 活性。在HEK-293细胞中，1 µM ZT-1a可抑制NKCC1在其SPAK依赖位点（Thr203/207/212）的磷酸化72±5.2%。3 µM ZT-1a可抑制NKCC1在KCC1/KCC1位点1/2的磷酸化65-77%。3-10 µM ZT-1a可抑制SPAK在Ser373位点的磷酸化70±3.8%。这些细胞活性证实了该化合物的作用机制。
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| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，ZT-1a（10–100 mg/kg）可抑制SPAK依赖的阳离子-氯离子共转运蛋白（CCC）磷酸化[1]。研究表明，ZT-1a可通过抑制SPAK依赖的NKCC1和KCC3磷酸化来保护缺血性脑组织的灰质和白质。体内实验表明，ZT-1a（10–100 mg/kg）可抑制SPAK依赖的阳离子-氯离子共转运蛋白（CCC）磷酸化。这提示ZT-1a可在活体生物体内有效与其靶点结合，并调节下游CCC活性，从而发挥神经保护作用。
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| 酶活实验 |
采用纯化的SPAK酶进行激酶活性测定，评估ZT-1a的体外活性。将SPAK酶与肽底物和ATP在不同浓度的ZT-1a存在下孵育。测定底物磷酸化水平，并根据剂量反应曲线确定IC50值。为验证其非竞争性抑制作用，在不同的ATP浓度下进行该测定。
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| 细胞实验 |
为了研究其细胞效应，我们用 ZT-1a 处理 HEK-293 细胞或其他相关细胞系。通过蛋白质印迹法，利用磷酸化特异性抗体分析 SPAK 及其下游靶点 NKCC1 和 KCC3 的磷酸化状态。此外，还可以使用荧光染料或电生理方法测量 ZT-1a 对细胞体积和离子流的影响。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 未接受任何治疗的小鼠[1]
剂量： 10、30、50 和 100 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 (ip) 实验结果： 体内抑制 SPAK 依赖性阳离子-氯离子共转运蛋白 (CCC) 的磷酸化。 ZT-1a 的体内疗效通常在缺血性卒中或其他神经系统疾病的啮齿动物模型中进行评估。该化合物以 10-100 mg/kg 的剂量进行腹腔注射或口服给药。通过测量梗死体积和使用行为学测试评估神经功能缺损来评估脑损伤程度。还分析脑组织中 SPAK 和 CCC 的磷酸化以确认靶点结合情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ZT-1a 的分子量为 445.73 g/mol，分子式为 C22H15Cl3N2O2。它在 DMSO 中的溶解度为 89 mg/mL (199.67 mM)，但几乎不溶于水。用于体内研究时，可将其配制成 5% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80 和 50% ddH2O 的澄清溶液 (4.45 mg/mL)，或配制成 CMC-Na 的悬浮液 (≥5 mg/mL)。应将其以固体形式储存于 -20°C，避光防潮。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于ZT-1a是一种研究性化合物，目前尚无其具体的毒理学数据。该化合物不适用于人类或兽医用途。处理该化合物时，应遵循标准的实验室安全预防措施，包括使用个人防护装备（PPE）。如果该化合物需要进一步开发，其安全性将通过专门的临床前毒理学研究来确定。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ZT-1a 是一种研究化合物，用于研究 SPAK 在各种生理和病理过程中的作用，尤其是在中枢神经系统中的作用。它能够抑制 SPAK 依赖的 CCC 磷酸化，使其成为研究中风、脑水肿和其他与离子失衡相关的疾病的病理生理学的重要工具。在预防和治疗神经退行性疾病和神经认知障碍的临床前模型中，ZT-1a 已显示出治疗潜力。ZT-1a 并非获批药物，仅供研究用途。
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| 分子式 |
C22H15CL3N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
445.725702524185
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| 精确质量 |
444.019
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| CAS号 |
212135-62-1
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| PubChem CID |
10789506
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.6
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| tPSA |
73.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
616
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C=C(C(C)=CC=1C(C#N)C1C=CC(=CC=1)Cl)NC(C1C=C(C=CC=1O)Cl)=O
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| InChi Key |
RPTKRVXJNWPJLU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H15Cl3N2O2/c1-12-8-16(18(11-26)13-2-4-14(23)5-3-13)19(25)10-20(12)27-22(29)17-9-15(24)6-7-21(17)28/h2-10,18,28H,1H3,(H,27,29)
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| 化学名 |
5-chloro-N-[5-chloro-4-[(4-chlorophenyl)-cyanomethyl]-2-methylphenyl]-2-hydroxybenzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (224.35 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2435 mL | 11.2176 mL | 22.4351 mL | |
| 5 mM | 0.4487 mL | 2.2435 mL | 4.4870 mL | |
| 10 mM | 0.2244 mL | 1.1218 mL | 2.2435 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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