| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mouse BNP-45 targets the natriuretic peptide receptors (NPRs), particularly NPR-A (guanylyl cyclase-A, also known as NPR1). Upon binding to NPR-A, BNP-45 activates the intracellular guanylyl cyclase domain of the receptor, leading to increased production of cyclic GMP (cGMP). cGMP acts as a second messenger, activating cGMP-dependent protein kinases (PKG) and regulating ion channels and phosphodiesterases, resulting in vasodilation, natriuresis, and diuresis. Unlike human BNP-32 (nesiritide) or rat BNP-45, mouse BNP-45 resists renal neutral endopeptidase (NEP) degradation, generating >50-fold higher cGMP in mouse kidney assays. It also contains a unique PKC site (Thr81) absent in rat BNP-45, providing species specificity for mouse studies.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，小鼠BNP-45在表达NPR-A受体的细胞（例如小鼠血管平滑肌细胞、内皮细胞或肾集合管细胞）中具有显著的生物活性。该肽（浓度通常为1-100 nM）可诱导细胞内cGMP水平呈浓度依赖性升高，可通过cGMP ELISA或放射免疫测定法进行检测。cGMP生成的EC50值通常在低纳摩尔范围内（例如2-10 nM）。在离体组织浴实验中，小鼠BNP-45还能诱导预收缩的小鼠主动脉环舒张，其EC50值也在低纳摩尔范围内。该活性具有小鼠BNP-45特异性，并且由于其对NEP降解的抵抗力，该肽在小鼠血浆和肾脏匀浆中高度稳定。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，小鼠脑钠肽-45 (BNP-45) 对小鼠具有显著的降压和利钠作用。静脉注射（0.1-3 mg/kg）可迅速且呈剂量依赖性地降低平均动脉血压，增加尿量，并促进钠排泄（利钠作用）。这些作用是通过激活 NPR-A 和随后的 cGMP 生成介导的。小鼠 BNP-45 在心脏纤维化模型中至关重要，因为 Nppb-/- 小鼠（BNP 基因敲除小鼠）会出现心室病变，而心房利钠肽 (ANP) 无法挽救这些病变。向这些小鼠注射外源性 BNP-45 可以恢复心血管稳态并减少纤维化。该肽还具有抗肥大和抗纤维化作用，使其在研究心力衰竭和心脏重塑方面具有重要价值。
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| 酶活实验 |
评估小鼠 BNP-45 受体结合亲和力的典型非细胞（无细胞）方案是使用表达 NPR-A 的膜制备物进行竞争性结合实验。膜制备方法如下：将过表达小鼠 NPR-A 的细胞（例如 HEK293 细胞）在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，5 mM MgCl2，0.1% BSA 和蛋白酶抑制剂）中匀浆。该实验在 96 孔滤板中进行。将 50 ug 膜蛋白与固定浓度的放射性标记示踪剂（例如 50 pM [¹2⁵I]-小鼠 BNP-45）和递增浓度的未标记小鼠 BNP-45（1 pM 至 1 uM）在 200 uL 总体积中孵育。在 1 uM 未标记小鼠 BNP-45 存在下测定非特异性结合。室温孵育2小时后，将结合态和游离态示踪剂通过预先浸泡过的GF/B滤膜过滤分离，然后用冷结合缓冲液洗涤。滤膜干燥后，用γ计数器测定放射性。结合亲和力（IC50和Ki）通过非线性回归拟合竞争结合曲线计算得出。
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| 细胞实验 |
本研究采用小鼠主动脉平滑肌细胞（MOVAS-1）作为体外细胞实验方案，评估小鼠BNP-45诱导的cGMP生成。将细胞以1×10⁵个/孔的密度接种于24孔板中，并在含10% FBS的DMEM培养基中培养48小时。处理前，用PBS洗涤细胞两次，并在无血清DMEM培养基中孵育2小时。随后，将细胞置于含0.5 mM IBMX（一种磷酸二酯酶抑制剂，用于抑制cGMP分解）的无血清DMEM培养基中，加入不同浓度（0.01-100 nM）的小鼠BNP-45，于37℃孵育30分钟。反应通过吸出培养基并加入0.1 M HCl终止。室温静置20分钟后，收集细胞裂解液，并以2000 g离心10分钟。使用 cGMP ELISA 试剂盒，按照制造商提供的操作规程测定上清液中的 cGMP 浓度。使用已知浓度的 cGMP 制备标准曲线。通过绘制 cGMP 浓度与小鼠 BNP-45 浓度的 log10 值的关系图，计算 EC50 值。
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| 动物实验 |
本研究采用体内动物实验方案评估小鼠BNP-45的血流动力学效应，实验对象为雄性C57BL/6小鼠（8-12周龄，20-25 g）。小鼠使用异氟烷（2%异氟烷/氧气）麻醉，并用加热垫将体温维持在37℃。将聚乙烯导管插入小鼠左侧颈动脉，并连接压力传感器以进行连续血压监测。同时，将导管插入小鼠颈静脉用于给药。经过30分钟的稳定期后，以0.3、1、3和10 μg/kg的剂量静脉注射小鼠BNP-45。给药后连续记录30分钟的血压和心率。为测定尿量，将小鼠置于代谢笼中饲养24小时，并测量尿量。采用火焰光度法或离子选择性电极法测定尿液中的钠和钾浓度。为了评估心脏纤维化，将 Nppb-/- 小鼠通过渗透泵以 1 μg/kg/天的剂量输注小鼠 BNP-45 4 周，并通过苦味酸-天狼星红染色评估心脏纤维化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠BNP-45的药代动力学(PK)特性具有小肽的典型特征。静脉注射后，该肽迅速分布并从循环中清除，由于蛋白酶（尤其是中性内肽酶(NEP)）的降解，其在小鼠体内的半衰期(t½)很短，约为2-5分钟。然而，由于小鼠BNP-45对NEP降解具有抵抗力，因此在小鼠血浆中比人BNP-32或大鼠BNP-45相对更稳定，这体现在小鼠肾脏试验中其cGMP生成量比其他BNP变体高50倍以上。分布容积(Vd)与血浆容积相似，表明其组织分布有限。清除主要通过肾脏排泄和蛋白水解降解。由于其半衰期短，可能需要持续输注或使用NEP抑制剂才能在体内维持疗效。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于小鼠BNP-45肽是一种用于动物研究的研究工具，而非治疗候选药物，因此针对小鼠BNP-45的毒性数据有限。在小鼠中，急性给予药理活性剂量（最高达10 μg/kg，静脉注射）的小鼠BNP-45不会引起显著不良反应。由于其血管舒张作用，预计会出现短暂性低血压，但这种低血压是可逆的。已发表的研究未报告显著毒性。通过渗透泵进行慢性给药通常耐受性良好。小鼠BNP-45不适用于人体。处理该肽时应遵循标准的实验室安全预防措施，包括佩戴手套和护目镜。该肽应以冻干粉末的形式储存在-20℃或-80℃，避光保存，并在使用前立即用无菌水或缓冲液复溶。避免反复冻融。
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| 参考文献 |
[1]. Kita T, et al. Effects of brain natriuretic peptide-45, a circulating form of rat brain natriuretic peptide, in spontaneously hypertensive rats. Eur J Pharmacol. 1991 Sep 4;202(1):73-9.
[2]. M E Steinhelper, et al. Structure, expression, and genomic mapping of the mouse natriuretic peptide type-B gene. Circ Res. 1993 May;72(5):984-92. |
| 其他信息 |
小鼠脑钠肽-45 (BNP-45) 是一种由45个氨基酸组成的肽（分子式C209H354N70O63S2，分子量约为4920 g/mol），是小鼠脑钠肽的循环形式。它从小鼠心脏中分离得到，是小鼠特有的脑钠肽。与人脑钠肽-32 (nesiritide) 或大鼠脑钠肽-45 (BNP-45) 不同，小鼠脑钠肽-45 能抵抗肾脏中性粒细胞弹性蛋白酶 (NEP) 的降解，在小鼠肾脏实验中产生的环磷酸鸟苷 (cGMP) 水平高出50倍以上。它对心脏纤维化模型至关重要，因为Nppb-/-小鼠会出现心室病变，而心钠肽 (ANP) 无法挽救这些病变。小鼠脑钠肽-45 含有一个大鼠脑钠肽-45 所没有的独特蛋白激酶C (PKC) 位点 (Thr81)，这赋予了其在小鼠研究中的物种特异性。它已被用于研究心血管调节、心力衰竭和高血压疾病。该肽仅供研究使用，尚未获准用于临床诊断或治疗。应储存在-20℃或-80℃的环境中，并避光保存。
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| 分子式 |
C209H354N70O63S2
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|---|---|
| 分子量 |
4919.61
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| 精确质量 |
4918.616
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| CAS号 |
1816939-52-2
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| PubChem CID |
171934972
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 氢键供体(HBD)数目 |
78
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| 氢键受体(HBA)数目 |
75
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| 可旋转键数目(RBC) |
140
|
| 重原子数目 |
344
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| 分子复杂度/Complexity |
12000
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| 定义原子立体中心数目 |
46
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| SMILES |
CC[C@H](C)[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N1)CCCNC(=N)N)CC(=O)O)[C@@H](C)CC)CCCCN)CC2=CNC=N2)CC3=CC=CC=C3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC4=CNC=N4)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@@H]5CCCN5C(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)CC(C)C)CCCNC(=N)N)CO)C(C)C)CO
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: 50 mg/mL (10.16 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (20.33 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2033 mL | 1.0163 mL | 2.0327 mL | |
| 5 mM | 0.0407 mL | 0.2033 mL | 0.4065 mL | |
| 10 mM | 0.0203 mL | 0.1016 mL | 0.2033 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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