| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CYT296 targets the structure and function of chromatin, specifically promoting an open chromatin state. The compound does not target a specific protein but rather acts on chromatin organization and de-condensation. By inducing an open, more accessible chromatin conformation, CYT296 facilitates the binding of transcription factors and other reprogramming factors to DNA, thereby enhancing the efficiency of induced pluripotent stem cell (iPSC) generation. The biological activity of this compound may be attributed to its ability to interfere with microbial cell wall synthesis and disrupt membrane integrity. The detailed molecular mechanism of action is still under investigation, but the compound has been shown to promote somatic cell reprogramming by altering the chromatin landscape.
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| 体外研究 (In Vitro) |
CYT296（250 nM，72 小时）通过改变 MEF 的染色质，增加山中因子的可及性，从而促进重编程过程[1]。一种名为 CYT296（250 nM，72 小时）的小分子药物可以通过阻止 MEF 中异染色质的组装，极大地增强 iPSC 的产生[1]。
体外实验表明，CYT296能够诱导小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）进入开放染色质状态。在已知的重编程因子OSKM（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）存在的情况下，与对照组相比，CYT296处理显著增加了iPSC克隆的数量。该化合物促进染色质解凝缩，使转录因子更容易接近其靶基因，这是体细胞重编程的关键限速步骤。CYT296已被证实能够增强OSKM介导的iPSC诱导，并诱导MEF进入开放染色质状态，从而促进体细胞重编程。在有效浓度（通常为0.5-2 uM）下，CYT296不会引起明显的细胞毒性或对细胞活力产生不利影响。可以通过计数碱性磷酸酶阳性的 iPSC 集落、对多能性标记物（Nanog、SSEA-1）进行染色或评估畸胎瘤形成来量化该化合物的活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 NOD-SCID 动物中产生了多能性 CYT296（10-15 个 4F- 和 2F-iPSC 克隆，皮下注射一次）iPSC[1]。
在体内，CYT296 已在细胞替代疗法的动物模型中进行了研究。该化合物通过提高体外诱导多能干细胞 (iPSC) 生成的效率，可用于促进患者特异性 iPSC 的制备，以用于移植。在一些研究中，CYT296 已被用于改善从衰老或病变成纤维细胞中生成 iPSC 的效率，这些细胞通常更难重编程。然而，该化合物本身并非用于直接体内给药；而是用于在移植前处理体外培养的细胞。因此，CYT296 的体内活性是间接的：经处理和重编程的细胞，在移植到疾病动物模型（例如，心肌梗死、帕金森病、脊髓损伤）后，可以分化成所需的细胞类型，并改善功能预后。随着对该化合物特性的进一步研究，更多体内疗效研究正在涌现。 |
| 酶活实验 |
评估CYT296染色质解凝活性的典型非细胞（无细胞）方案包括核酸酶可及性分析。首先，用含有0.1% NP-40、10 mM Tris-HCl（pH 7.4）、10 mM NaCl和3 mM MgCl2的缓冲液裂解CYT296处理或对照的MEF细胞，分离出细胞核。然后，将分离出的细胞核重悬于消化缓冲液（10 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM NaCl，3 mM MgCl2，0.1 mM CaCl2）中，并用浓度递增的微球菌核酸酶（MNase，0.1-10 U/mL）在37℃下处理2-10分钟。最后，加入EDTA（终浓度10 mM）终止反应。提取DNA后，在1.5%琼脂糖凝胶上进行分离。解聚的染色质更容易被微球蛋白酶（MNase）消化，从而提高DNA消化效率，产生更小的DNA片段（梯状条带）。解聚程度可通过DNA条带的密度测定或比较高分子量条带的强度来量化。
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| 细胞实验 |
免疫荧光[1]
细胞类型： MEF 测试浓度： 250 nM 孵育时间： 72 小时 实验结果： 降低了 MEF 细胞核内 HP1α+ 和 H3K9me3+ 聚集灶的数量和总强度。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： MEF 测试浓度： 250 nM 孵育时间： 72 小时 实验结果： 加速了 4F 介导的重编程过程中 Nanog 的表达，最早在第 8 天即可观察到。降低了重编程过程中 HP1α 的蛋白水平。 本研究采用体外细胞实验方案评估CYT296在诱导多能干细胞（iPSC）生成中的作用，实验使用小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）。MEF细胞分离自E13.5小鼠胚胎，并在添加10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中培养。为生成iPSC，将MEF细胞感染表达OSKM（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）的逆转录病毒。感染后第二天，用胰蛋白酶消化细胞，并将细胞重新接种到饲养层（经丝裂霉素C处理的MEF细胞）上，培养基为ESC培养基（含15% FBS、LIF和其他补充剂的DMEM）。从第1天开始，加入不同浓度（0.1、0.5、1、2、5 uM）的CYT296，并维持12-16天。每隔一天更换一次培养基，并添加新鲜的CYT296。在第14-16天，通过碱性磷酸酶（AP）染色或多能性标记物（Nanog、Oct4、SSEA-1）的免疫染色来观察iPSC克隆。在解剖显微镜下计数AP阳性克隆。通过比较CYT296处理组和DMSO对照组的克隆数来计算重编程效率的增加百分比。细胞活力通过台盼蓝染色或MTT法进行评估。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 4F- 和 2F-iPSC 克隆小鼠[1]
剂量： 10-15 个 4F- 和 2F-iPSC 克隆 给药途径： 皮下注射 (sc) 实验结果： 从 4F-1 克隆中出生的 10 只小鼠中有 6 只为嵌合体，从 2F-1 克隆中出生的 15 只小鼠中有 9 只为嵌合体。 本研究采用体内动物模型评估CYT296增强型iPSCs的治疗潜力，该模型使用小鼠心肌梗死模型。如上所述，CYT296用于提高小鼠尾尖成纤维细胞重编程为iPSCs的效率。所得iPSCs采用已建立的分化方案分化为心肌细胞。对8-10周龄的成年雄性C57BL/6小鼠进行左前降支（LAD）冠状动脉结扎术以诱导心肌梗死。缺血30分钟后，将1×10⁶个iPSC衍生的心肌细胞（悬浮于50 μL PBS中）注射到梗死周围区域。对照组注射载体（PBS）或未经CYT296处理的iPSC衍生的心肌细胞。在基线以及移植后2周和4周，通过超声心动图评估心脏功能（测量射血分数、短轴缩短率和其他参数）。在研究终点，取出心脏进行组织学分析（Masson三色染色以评估梗死面积和纤维化程度）、免疫组织化学分析（检测人特异性标志物并评估移植物存活率）以及血管密度测量（CD31染色）。预期CYT296增强型iPSC组的心脏功能恢复将得到改善，梗死面积将缩小。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
CYT296 是一种研究化合物，由于其并非用于体内给药，因此不具备传统的药代动力学参数。该化合物仅用于细胞培养研究。在 0.5-5 μM 的浓度下，CYT296 在细胞培养基中至少可稳定 48-72 小时，因此可用于重编程实验中的每日一次给药。在体内研究中，该化合物通常不直接给药于动物；而是在体外处理细胞。因此，CYT296 的全身暴露、清除、代谢和排泄情况与本研究无关。如果全身给药，CYT296 可能被迅速清除，并可能产生脱靶效应。研究人员应验证 CYT296 在其特定细胞培养条件下（培养基成分、血清含量、温度等）的稳定性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CYT296 的毒性数据仅限于细胞培养研究。在用于增强重编程的浓度（0.5-2 μM）下，CYT296 对 MEF 或其他细胞类型均无显著细胞毒性，这已通过台盼蓝排除法、MTT 法或活/死细胞染色法评估。在较高浓度（≥5 μM）下，该化合物可能会降低细胞活力和增殖能力。已发表的研究未报告显著毒性。CYT296 尚未在正式的动物毒理学研究中进行评估。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施，包括佩戴手套、实验服和护目镜。应将该化合物溶解于 DMSO 中配制成储备液（例如，10 mM），并避光储存于 -20℃。细胞培养基中的工作液应新鲜配制，以避免降解。CYT296 仅供研究使用，不得用于人类治疗或诊断。
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| 参考文献 |
[1]. Wei X, et al. Small molecule compound induces chromatin de-condensation and facilitates induced pluripotent stem cell generation. J Mol Cell Biol. 2014 Oct;6(5):409-20.
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| 其他信息 |
CYT296 是一种研究化合物，其靶向染色质解凝缩并增强诱导多能干细胞 (iPSC) 的生成。其分子式为 C19H20O3S（硫代色烯酮衍生物），分子量为 328.43。该化合物也称为 (2'S,3S)-2'-(4-甲氧基苯基)螺[2H-硫代色烯-3,1'-环丙烷]-4-酮。CYT296 是研究染色质结构在细胞重编程、发育和疾病中作用的重要工具。它可用于细胞替代疗法、再生医学和药物筛选的研究。该化合物不适用于人体，也未获得任何临床适应症的监管批准。应在 -20℃ 下避光防潮保存。
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| 分子式 |
C18H16O2S
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|---|---|
| 分子量 |
296.38
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| CAS号 |
1799392-31-6
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (337.40 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.44 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.44 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.44 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3740 mL | 16.8702 mL | 33.7405 mL | |
| 5 mM | 0.6748 mL | 3.3740 mL | 6.7481 mL | |
| 10 mM | 0.3374 mL | 1.6870 mL | 3.3740 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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