| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PrP (106-126) exerts its neurotoxic effects through interaction with the cellular prion protein (PrPC). Synthetic peptide homologous to region 106-126 of the prion protein is toxic to cells expressing PrPC, but not to PrP knockout neurons, arguing for a specific role of PrPC in mediating the peptide‘s activity. The peptide induces microglial activation, production of reactive oxygen species (ROS), and activation of apoptotic pathways in neurons. It also interacts with cell membranes, forming ion channels and disrupting membrane integrity. Additionally, PrP (106-126) can bind to laminin and other extracellular matrix components, contributing to its pathological effects. The neurotoxicity is dependent on the peptide's ability to form beta-sheet-rich fibrillar aggregates.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在N2a细胞中,PrP(106–126) (100 μM) 可逐渐诱导mTOR磷酸化。与PBS处理的对照细胞相比,PrP(106–126)处理的细胞中活性氧(ROS)的产生显著升高。PRAS40敲低可增强PrP(106–126)诱导的细胞凋亡。PRAS40通过激活mTOR和AKT,减少PrP(106–126)引起的神经元凋亡[1]。PrP(106–126)优先通过管腔侧与PBECs相互作用,导致细胞累积性死亡,这可由乳酸脱氢酶的释放、MTT的减少、Caspase 3的诱导以及直接细胞计数所证实。此外,虽然 PBEC 保持融合,但 PrP (106–126) 而不是其相应的乱序肽会导致跨内皮电阻降低 50%[2]。
体外实验表明,PrP(106-126)对原代神经元和神经元细胞系(例如GT1-7、SH-SY5Y、PC12)具有毒性。用10-100 uM PrP(106-126)处理神经元24-72小时可诱导细胞死亡,其特征为细胞凋亡(caspase-3激活、DNA片段化)和/或坏死。该肽可诱导小胶质细胞活化,进而导致促炎细胞因子(IL-1β、TNF-α)和神经毒性因子的产生。PrP(106-126)还能诱导氧化应激,表现为活性氧(ROS)生成增加、脂质过氧化和谷胱甘肽水平降低。体外实验表明,该肽可形成淀粉样蛋白样原纤维,这可通过硫黄素T荧光和透射电镜(TEM)进行评估。 PrP的纤维形成和神经毒性取决于特定的氨基酸残基,特别是C端疏水区(AVVGGLG)。对照肽PrP(106-126)的序列被打乱,通常无毒。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内,PrP(106-126)已被用于研究动物模型中的朊病毒样神经毒性。将该肽脑内注射到野生型小鼠(而非PrP基因敲除小鼠)脑内,可诱导神经元丢失、星形胶质细胞增生和小胶质细胞活化,模拟朊病毒疾病的部分病理特征。将PrP(106-126)注射到海马体中会导致行为学测试(例如,莫里斯水迷宫)中出现学习和记忆缺陷。该肽在某些模型中还能诱导细胞凋亡和海绵状变性,但其程度取决于剂量、给药途径和小鼠品系。酰胺化和结构松弛已被证明可以消除PrP(106-126)在体内和体外的神经毒性,这凸显了该肽的结构对其致病活性的重要性。
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| 酶活实验 |
一种典型的用于评估 PrP(106-126) 淀粉样蛋白原纤维形成的非细胞(无细胞)方案是使用硫黄素 T (ThT) 荧光测定法。将 PrP(106-126) 溶解于 1 mM 的六氟异丙醇 (HFIP) 中,并孵育过夜以使肽单体化。然后在氮气下蒸发 HFIP,并将肽重悬于无菌水中,浓度为 1 mM。进行原纤维化测定时,将肽用 PBS (pH 7.4) 或其他缓冲液稀释至 50-100 uM,并加入 ThT 至终浓度为 10-20 uM。将混合物置于 96 孔板(黑色,透明底)中,在 37°C 下持续振荡孵育。使用微孔板读数仪,在激发/发射波长为 440/480 nm 的条件下,每隔 10-30 分钟测量一次荧光强度,持续 2-72 小时。ThT 荧光强度随时间增加表明纤维形成。分析纤维化曲线的滞后期、伸长期和平台期。实验结束时,使用透射电子显微镜 (TEM) 确认纤维的存在。
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| 细胞实验 |
用于检测 PrP (106-126) 的标准体外神经毒性实验方案采用从胚胎第 16-18 天 (E16-18) 小鼠胚胎中分离的原代皮层神经元。解剖皮层后,用木瓜蛋白酶 (20 U/mL) 或胰蛋白酶 (0.25%) 进行解离,然后以 1-2×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于聚赖氨酸包被的 96 孔板中,或以 5×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于 24 孔板中。神经元在添加了 B27 和 GlutaMAX 的 Neurobasal 培养基中体外培养 7-10 天 (DIV) 后进行实验。培养的神经元用 PrP (106-126) (10、25、50、100 uM) 处理 24-72 小时。使用突变肽或乱序肽作为阴性对照。处理后,细胞活力可通过 MTT 还原法(每孔加入 10 uL 浓度为 5 mg/mL 的 MTT 溶液,37℃ 孵育 4 小时)、LDH 释放试验(在 490 nm 波长处测定)或 Hoechst 33342 染色定量凋亡细胞核(固缩核)来评估。小胶质细胞活化可通过混合神经元-胶质细胞培养物进行研究,或使用 PrP (106-126) 处理的 BV-2 小胶质细胞,并通过 ELISA 法测定细胞因子(IL-1β、TNF-α)的释放来研究。
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| 动物实验 |
本研究采用体内动物实验方案评估PrP(106-126)的神经毒性作用,对成年雄性C57BL/6小鼠(8-10周龄)进行脑室内(ICV)或海马内注射。小鼠用氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉后固定于立体定位仪上。将30号针头插入侧脑室(ICV)或海马(坐标:前后-2.0 mm,内外±1.5 mm,背腹-1.5 mm,以bregma为参考点)。PrP(106-126)溶解于无菌PBS缓冲液中,浓度为5-10 μg/μL,缓慢注射1-5 μL(总量5-50 μg)(注射速度为0.5 μL/min)。对照组小鼠注射等体积的溶剂(PBS)或随机序列的PrP肽。注射后,针头保留5分钟后再拔出。注射后对动物进行1-14天的观察。从第7天开始进行行为学测试(例如,莫里斯水迷宫、旷场实验、Y迷宫)。研究结束时,对小鼠进行灌注,取出脑组织,并进行切片处理以进行组织学分析(H&E染色检测神经元丢失,Iba-1染色检测小胶质细胞增生,GFAP染色检测星形胶质细胞增生,TUNEL染色检测细胞凋亡)。或者,也可以将脑组织匀浆,并通过ELISA法分析细胞因子水平(IL-1β、TNF-α)。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PrP(106-126)等肽类物质直接给药(脑室内或海马内)后,会迅速从中枢神经系统(CNS)清除。由于肽酶的蛋白水解作用,其在脑内的半衰期很短(数分钟至数小时)。由于该肽类物质并非候选药物,而是一种研究工具,因此尚未进行详细的药代动力学研究。由于其亲水性和高分子量(约2000 Da),该肽类物质不太可能穿过血脑屏障(BBB)。外周给药时,其在脑内的浓度很低。因此,在体内研究中,PrP(106-126)几乎总是直接注入脑组织或脑脊液(CSF)。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PrP (106-126) 是一种合成肽,广泛用作朊病毒诱导神经毒性的模型。在体外(10-100 μM)和体内(5-50 μg 脑室内注射)实验中使用的浓度下,该肽具有神经毒性,可诱导神经元细胞死亡。然而,该肽本身并不被视为治疗药物;它是一种用于构建疾病模型的研究工具。毒性数据主要与其在实验模型中的神经毒性作用相关。PrP (106-126) 没有临床应用价值,仅供研究使用。处理该肽时应遵循标准的实验室安全预防措施,包括佩戴手套和穿实验服。冻干肽应储存在 -20℃,工作溶液应新鲜配制以防止聚集。避免吸入和摄入。PrP (106-126) 仅供研究使用,不得用于人类或动物的治疗或诊断目的。
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| 参考文献 |
[1]. Yang W, et al. PRAS40 alleviates neurotoxic prion peptide-induced apoptosis via mTOR-AKT signaling. CNS Neurosci Ther. 2017 May;23(5):416-427.
[2]. Cooper I, et al. Interactions of the prion peptide (PrP 106-126) with brain capillary endothelial cells: coordinated cell killing and remodeling of intercellular junctions. J Neurochem. 2011 Feb;116(4):467-75 |
| 其他信息 |
PrP (106-126) 是一种合成肽,对应于人朊病毒蛋白的 106-126 位氨基酸残基,其氨基酸序列为 H-KTNMKHMAGAAAAAGAVVGGLG-OH。其分子式为 C85H142N28O27S,分子量约为 1960 g/mol。由于该肽能够形成淀粉样原纤维、诱导神经毒性并激活小胶质细胞,因此是研究朊病毒疾病(传染性海绵状脑病)发病机制的成熟模型。它在体内和体外均表现出 PrPC 依赖性神经毒性,并被用于筛选神经保护化合物。该肽仅供研究使用,不得用于治疗用途。应储存于 -20℃,避光防潮。
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| 分子式 |
C80H138N26O24S2
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|---|---|
| 分子量 |
1912.30
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| 精确质量 |
1910.98
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| CAS号 |
148439-49-0
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| PubChem CID |
71312203
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
0.334
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| tPSA |
839.96
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| 氢键供体(HBD)数目 |
27
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| 氢键受体(HBA)数目 |
30
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| 可旋转键数目(RBC) |
64
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| 重原子数目 |
132
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| 分子复杂度/Complexity |
3910
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| 定义原子立体中心数目 |
17
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| SMILES |
C(O)(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)N
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| InChi Key |
XPZWWTIIKSODDO-MBNDGZRNSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C80H138N26O24S2/c1-38(2)28-53(72(122)90-36-61(113)114)98-60(112)33-86-57(109)32-89-78(128)62(39(3)4)105-79(129)63(40(5)6)104-70(120)44(10)93-59(111)35-87-65(115)41(7)94-68(118)45(11)96-69(119)46(12)95-67(117)43(9)92-58(110)34-88-66(116)42(8)97-73(123)51(22-26-131-14)100-76(126)54(29-48-31-85-37-91-48)102-74(124)50(21-17-19-25-82)99-75(125)52(23-27-132-15)101-77(127)55(30-56(84)108)103-80(130)64(47(13)107)106-71(121)49(83)20-16-18-24-81/h31,37-47,49-55,62-64,107H,16-30,32-36,81-83H2,1-15H3,(H2,84,108)(H,85,91)(H,86,109)(H,87,115)(H,88,116)(H,89,128)(H,90,122)(H,92,110)(H,93,111)(H,94,118)(H,95,117)(H,96,119)(H,97,123)(H,98,112)(H,99,125)(H,100,126)(H,101,127)(H,102,124)(H,103,130)(H,104,120)(H,105,129)(H,106,121)(H,113,114)/t41-,42-,43-,44-,45-,46-,47+,49-,50-,51-,52-,53-,54-,55-,62-,63-,64-/m0/s1
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| 化学名 |
2-[[(2S)-2-[[2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]acetyl]amino]propanoyl]amino]propanoyl]amino]propanoyl]amino]propanoyl]amino]acetyl]amino]propanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: 1 mg/mL (0.52 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (52.29 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5229 mL | 2.6147 mL | 5.2293 mL | |
| 5 mM | 0.1046 mL | 0.5229 mL | 1.0459 mL | |
| 10 mM | 0.0523 mL | 0.2615 mL | 0.5229 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。