1,3-Diphenylisobenzofuran (DPBF)

别名: 1,3-DIPHENYLISOBENZOFURAN; 5471-63-6; Diphenylisobenzofuran; 1,3-Diphenyl-2-benzofuran; Isobenzofuran, 1,3-diphenyl-; DPBF; MFCD00005931; 1,3 Diphenylisobenzofuran; 1,3-联苯基异香豆酮;1,3-二苯基异苯并呋喃;2,5-二苯基-3,4-苯并呋喃;1,3-Diphenylisobenzofuran 1,3-二苯基异苯并呋喃
目录号: V67090 纯度: ≥98%
1,3-二苯基异苯并呋喃 (DPBF) 用作选择性探针,用于检测和定量含有不同活性氮和氧物种 (RNOS) 的样品中的过氧化氢。
1,3-Diphenylisobenzofuran (DPBF) CAS号: 5471-63-6
产品类别: Reactive Oxygen Species
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
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纯度: =99.00%

纯度: ≥98%

产品描述
1,3-二苯基异苯并呋喃 (DPBF) 是一种选择性探针,用于检测和定量含有不同活性氮氧物种 (RNOS) 的样品中的过氧化氢。DPBF 是一种荧光探针。过去 20 年来,人们认为它能与某些活性氧物种(例如单线态氧和羟基、烷基氧或烷基过氧自由基)发生特异性反应。
1,3-二苯基异苯并呋喃 (DPBF) (CAS#: 5471-63-6) 是一种对单线态氧 (¹O₂) 具有高度特异性反应性的荧光探针,可形成内过氧化物,该内过氧化物分解生成 1,2-二苯甲酰苯。其分子式为 C₂₀H₁₄O,分子量为 270.32-270.33 g/mol。该化合物是一种高活性二烯,属于异苯并呋喃类化合物,被广泛认为是荧光分子探针和化学清除剂。 DPBF可以检测活性氧(ROS)的生成。它通过两种机制发生光氧化反应:自由基氧化和单线态氧氧化,最终生成相同的产物。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent Dye; ROS/Reactive Oxygen Species
Singlet oxygen (¹O₂)
1,3-Diphenylisobenzofuran targets singlet oxygen (¹O₂) and other reactive oxygen species (ROS). The compound does not target a specific protein or enzyme but rather serves as a chemical probe that reacts with singlet oxygen to form an endoperoxide. This reaction is highly specific for singlet oxygen, making DPBF a valuable tool for detecting and quantifying singlet oxygen generation in chemical and biological systems. The compound's reactivity with ROS is based on its diene structure.
体外研究 (In Vitro)
使用说明
1,3-二苯基异苯并呋喃 (DPBF) 工作液的制备
1.1 储备液的制备
制备 10 mM DPBF DMSO 溶液,例如:将 10 mg DPBF 溶解于 3.7 mL DMSO 中。
注意:DPBF 储备液应分装后避光保存于 -20 °C 或 -80 °C。
1.2 工作液的制备
用预热的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,制备 10-20 μM DPBF 工作液。
注意:请根据您的具体需求调整 DPBF 工作液的浓度,并使用新鲜配制的工作液。

细胞染色
2.1 悬浮细胞:离心收集细胞,并用PBS洗涤两次,每次5分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心并弃去上清液后,用PBS洗涤两次,每次5分钟。
注意:如果不进行流式细胞术检测,贴壁细胞可能无法进行消化处理。
2.2 加入1 mL DPBF工作液,室温孵育30分钟。
2.3 400 g离心,4℃下离心3-4分钟,弃去上清液。
2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。
将细胞重悬于1 mL无血清培养基或PBS中,在荧光显微镜或流式细胞仪下进行检测。

注意:
1. 建议分装DPBF储备液,避光保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
2. 请根据实际情况调整DPBF的浓度。根据您的具体需求,DPBF 工作溶液。
3. 本产品仅供专业人员进行科学研究,不可用于临床诊断或治疗,也不可用于食品或药品。
4. 为了您的安全和健康,操作时请穿戴实验服和一次性手套。
- 单线态氧检测:1,3-二苯基异苯并呋喃 (DPBF) 与单线态氧反应生成内过氧化物,导致其在 410 nm 处的吸光度显著降低。在文献 [1] 中,DPBF 被用于监测不同溶剂比例下 5CzBN 系列分子的单线态氧生成速率(分解速率通过 I₀/I 吸光度比值计算)。在文献 [2] 中,DPBF 验证了级联酶催化和光敏化过程中 ¹O₂ 的生成效率(与游离酶相比,吸光度 Δ 增加了 2.15 倍)。 [3] 详细阐述了DPBF与单线态氧的反应机理,其分解产物为1,2-二苯甲酰苯,可通过紫外-可见光谱进行定量分析。
- 自由基清除验证:在[1]的光动力疗法实验中,DPBF与光敏剂5CzBN-PPhCz共孵育后,溶液在光照下由紫色变为无色,直接证实了单线态氧的生成。类似地,[2] 使用DPBF评估了纳米反应器系统的产氧能力,结果表明其分解速率与¹O₂产率呈正相关。

DPBF的体外活性在于其作为单线态氧和活性氧物种检测的荧光探针的功能。该化合物与单线态氧反应生成内过氧化物,内过氧化物分解生成1,2-二苯甲酰苯。该反应可通过监测DPBF吸光度或荧光强度的降低来追踪。该化合物能够检测活性氧(ROS)的生成,并被用于研究氧化应激和光化学反应。DPBF通过自由基氧化和单线态氧氧化发生光氧化反应。
体内研究 (In Vivo)
DPBF 不用作治疗剂。其体内用途仅限于检测单线态氧和活性氧的研究应用。该化合物不适用于全身治疗。
酶活实验
DPBF标记微粒体和Triton X-100胶束[3]
将0.3 mL DPBF储备液(1 mM乙醇溶液)注入含有3 mL微粒体悬浮液或2.5 mL 0.5 mM Triton X-100胶束(溶于50 mM pH 7.4磷酸盐缓冲液)的比色皿中。摇匀比色皿后,将其置于荧光分光光度计中进行荧光测量。DPBF完全掺入微粒体通常需要几分钟,因为DPBF注入比色皿后,荧光强度(455 nm)会立即增加。DPBF掺入Triton X-100胶束的速度比掺入微粒体的速度更快。DPBF完全掺入微粒体后,荧光强度稳定几秒钟,然后开始下降;而Triton X-100胶束中的荧光强度则稳定数小时。单线态氧检测方法:将DPBF溶解于DMSO中,配制成10 mM的储备液,分装后于-20°C避光保存。使用时,用无血清培养基稀释至10–20 μM的工作液,并与测试样品(例如光敏剂、酶复合物)于37°C孵育30分钟。用分光光度计测量410 nm处的吸光度变化,以计算单线态氧生成速率。该方法已在文献[1][2][3]中用于验证自由基的产生。体外ROS检测方法中,DPBF探针与含有单线态氧或其他ROS的样品在合适的缓冲条件下孵育。DPBF与单线态氧的反应会导致约410 nm处的吸光度降低或荧光强度降低。吸光度或荧光强度的降低速率与单线态氧的浓度成正比。该检测方法可用于测量光化学反应或生物系统中的活性氧生成。
细胞实验
细胞内单线态氧成像:在文献[1]的细胞实验中,将H9c2细胞与DPBF工作液(10 μM)孵育,并通过激光共聚焦显微镜观察DCFH-DA探针的绿色荧光强度,以间接反映细胞内ROS水平。结果显示,DPBF处理组的荧光强度显著增强,证实了单线态氧的生成。文献[2]采用类似的方法,通过DPBF的分解速率评估纳米反应器在肿瘤细胞中的¹O₂释放效率。

对于体外细胞实验,DPBF可用于检测细胞内ROS的生成。将细胞与DPBF孵育,并监测其荧光或吸光度。DPBF与ROS反应后,其荧光强度降低,从而可以衡量ROS的产生。该化合物可用于研究细胞内的氧化应激。
动物实验
DPBF 通常不进行体内动物实验,因为该化合物主要用作 ROS 检测的体外探针。
药代性质 (ADME/PK)
由于DPBF是一种研究用荧光探针而非候选药物,因此尚未对其药代动力学性质进行表征。该化合物的分子量为270.32-270.33 g/mol,应在适当的条件下避光保存。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
DPBF仅供研究用途,不可用于人体治疗或诊断。处理此化学试剂时,应遵守标准的实验室安全操作规程。
参考文献

[1]. HKOH-1: A Highly Sensitive and Selective Fluorescent Probe for Detecting Endogenous Hydroxyl Radicals in Living Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2017 Oct 9;56(42):12873-12877.

[2]. Calcium carbonate-methylene blue nanohybrids for photodynamic therapy and ultrasound imaging. Sci China Life Sci. 2018 Apr;61(4):483-491.

[3]. On the use of 1,3-diphenylisobenzofuran (DPBF). Reactions with carbon and oxygen centered radicals in model and natural systems. Research on Chemical Intermediates volume 19, pages395-405(1993).

其他信息
作用机制:DPBF通过共轭双键与单态氧发生[4+2]环加成反应,形成不稳定的内部过氧化物中间体,随后分解为1,2-二苯甲苯。这种高度特异性的反应是检测¹O₂的金标准方法之一。
- 实验应用:DPBF广泛用于光动力疗法(PDT)、酶催化氧化以及纳米材料中活性氧物种的释放。例如,[1] 它被用于评估AIE分子的单态氧生成能力,[2] 验证纳米反应器的级联氧生成效率,以及[3] 系统研究其与不同自由基的反应动力学。
- 限制:DPBF对单态氧的检测依赖于化学反应,因此无法实时动态追踪自由基的空间分布。此外,其疏水性限制了其在水相环境中的应用,需要通过纳米载体或溶剂进行优化以提高检测灵敏度。羟基自由基(·OH)是最活跃和有害的活性氧物种(ROS)之一,被认为在许多生理和病理过程中发挥重要作用。然而,由于其极高的反应性和极短的寿命,目前缺乏可靠和稳健的内源性·OH检测方法。本文报道了一种荧光探针HKOH-1,具有优异的体外选择性和对·OH的灵敏度。使用该探针,我们校准并量化了几种已报道的·OH清除剂的清除能力。此外,我们设计的HKOH-1r具有更好的细胞摄取和保留能力,并在共聚焦成像和流式细胞术中表现良好,能够检测内源性·OH的生成。此外,该探针还用于监测HeLa细胞在紫外照射下的·OH生成。因此,HKOH-1可用于阐明与·OH相关的生物功能。[1] 光动力疗法在癌症治疗中发挥重要作用。在本研究中,我们合成了嵌入碳酸钙纳米棒(CaCO3-MB NRs)的美蓝(MB),用于pH响应的光动力疗法和超声成像。通过调整Na2CO3水溶液的浓度,可以控制CaCO3-MB NRs的形态。使用1,3-二苯异苯并呋喃(DPBF)探针确认了有效活性氧物种(ROS)的生成。研究了CaCO3-MB NRs的光动力疗法和超声成像特性,以验证使用CaCO3-MB纳米杂化物进行超声图像引导的光动力疗法的可行性。[2] 1,3-二苯异苯并呋喃(DPBF)是一种对单态氧(¹O₂)具有高度特异性反应的荧光分子,能够生成内部过氧化物,后者分解生成1,2-二苯甲苯。通过测量DPBF荧光强度的降低,可以追踪DPBF与¹O₂的反应特性。为了验证DPBF对自由基的特异性,我们在Triton-X胶束和自然系统(大鼠肝微粒体)中进行了系列实验,其中DPBF与羟基自由基(HO•)、烷氧基自由基(RO•)、烷基过氧基自由基(ROO•)和碳中心自由基(2-氰异丙基自由基)反应。在所有情况下,DPBF在氧中心自由基的作用下迅速转化为1,2-二苯甲苯,并在2-氰异丙基自由基的作用下转化为相应的加合物。该模型系统从化学角度进行了测试,反应产物被分离和鉴定。基于结果,应强调在复杂生物系统中使用DPBF检测¹O₂时必须谨慎,因为它也会与不同的自由基反应。[3]
1,3-二苯异苯并呋喃(DPBF)是一种对单态氧具有高度特异性反应的荧光探针。它可以检测活性氧物种(ROS)的生成,并广泛用作荧光分子探针和化学清除剂。该化合物没有临床或治疗应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H14O
分子量
270.33
精确质量
270.104
元素分析
C, 88.86; H, 5.22; O, 5.92
CAS号
5471-63-6
PubChem CID
21649
外观&性状
Light yellow to green yellow solid powder
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
437.5±14.0 °C at 760 mmHg
熔点
128-130 °C(lit.)
闪点
226.7±6.9 °C
蒸汽压
0.0±1.0 mmHg at 25°C
折射率
1.642
LogP
6.47
tPSA
13.14
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
1
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
295
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC=C(C=C1)C2=C3C=CC=CC3=C(O2)C4=CC=CC=C4
InChi Key
ZKSVYBRJSMBDMV-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C20H14O/c1-3-9-15(10-4-1)19-17-13-7-8-14-18(17)20(21-19)16-11-5-2-6-12-16/h1-14H
化学名
1,3-diphenyl-2-benzofuran
别名
1,3-DIPHENYLISOBENZOFURAN; 5471-63-6; Diphenylisobenzofuran; 1,3-Diphenyl-2-benzofuran; Isobenzofuran, 1,3-diphenyl-; DPBF; MFCD00005931; 1,3 Diphenylisobenzofuran;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 5.56 mg/mL (20.57 mM)
H2O: < 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 0.56 mg/mL (2.07 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,将 100 μL 5.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 0.56 mg/mL (2.07 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 5.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.6992 mL 18.4959 mL 36.9918 mL
5 mM 0.7398 mL 3.6992 mL 7.3984 mL
10 mM 0.3699 mL 1.8496 mL 3.6992 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们