| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The NHS ester functional group on Cy3 NHS ester targets primary amines (-NH₂) on proteins, antibodies, peptides, and nucleic acids. The compound does not target a specific protein or enzyme but rather serves as a covalent labeling reagent that attaches the Cy3 fluorophore to amine-containing biomolecules. Cy3 is a cyanine dye consisting of two nitrogen atoms connected by an odd number of methyl units. Cyanine compounds have long wavelength, adjustable absorption and emission, high extinction coefficient, good water solubility, and relatively simple synthesis.
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| 体外研究 (In Vitro) |
第一步骤。蛋白质制备：请将蛋白质（抗体）浓度配制至 2 mg/mL，以获得最佳标记效果。2) 蛋白质溶液的 pH 值为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，则需加入 1 mg 碳酸氢钠 (1M) 调节 pH 值。3) 如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL，标记效率将显著降低。建议最终蛋白质浓度范围为 2–10 mg/mL，以获得最佳标记效率。4) 为确保最佳标记效果，蛋白质需要溶于不含铵离子和伯胺的缓冲液中，例如 Tris 或甘氨酸缓冲液。2. 制备染料（以 CY3-NHS 酯为例）。用无水 DMSO 填充含有 CY3-NHS 酯的小瓶，配制成 10 mM 的储备液。使用移液器或涡旋振荡器充分混匀。3. 计算染料剂量。 CY3-NHS酯与蛋白质的理想摩尔比约为10，反应所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记蛋白质的量。例如：假设所需的标记蛋白为500 μL浓度为2 mg/mL的IgG（分子量=150,000），则将1 mg CY3-NHS酯溶解于100 μL DMSO中。这样即可得到所需的5.05 μL CY3-NHS酯。具体的计算步骤如下：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) × mL (IgG)/MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) mmol (CY3-NHS酯) = mmol (IgG) × 10 = 6.7×10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7 × 10⁻⁵ mmol 3) μL (CY3-NHS酯) = mmol (CY3-NHS酯) × MW (CY3-NHS酯)/mg/μL (CY3-NHS酯) = 6.7 × 10⁻⁵ mmol × 753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL = 5.05 μL (CY3-NHS酯) 4. 1) 进行偶联反应：取0.5 mL蛋白质溶液，加入适量的……将新鲜配制的 10 mg/mL CY3-NHS 酯轻轻摇匀，然后短暂离心，使样品沉淀在反应管底部。为防止蛋白质样品变性或失活，请勿等量混合。2) 将反应管置于避光处，室温下轻轻孵育 60 分钟。10 至 15 分钟后，小心地反向重复步骤五。纯化偶联物：使用 SepHadex G-25 柱，以下步骤演示了如何纯化染料-蛋白质偶联物。1) 根据制造商的说明组装 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物（来自“运行偶联反应”）加满 SepHadex G-25 柱。3) 当样品流过树脂表面时，立即加入 PBS（pH 7.2–7.4）。为了完成所选样品的纯化，加入额外的PBS缓冲液（pH 7.2–7.4）。将含有相应染料-蛋白偶联物的组分合并。
Cy3 NHS酯的体外活性在于其作为荧光标记试剂的功能。NHS酯与伯胺反应形成稳定的酰胺键。Cy3荧光团发出明亮的橙红色荧光，使得标记的偶联物可通过荧光显微镜、流式细胞术和FRET研究进行检测。Cy3常被用作FRET应用中的供体。该标记高效，可通过简单的混合反应完成。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Cy3 NHS酯不用作治疗剂。其体内用途仅限于生物分子荧光标记成像和检测等研究应用。该化合物不适用于全身治疗。
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| 酶活实验 |
Cy3 NHS酯的体外标记实验是将NHS酯与含胺生物分子在合适的缓冲条件下（通常pH 7-9）孵育。该反应通过伯胺对NHS酯羰基的亲核攻击进行，形成稳定的酰胺键，并释放出N-羟基琥珀酰亚胺作为副产物。标记效率可通过荧光光谱法测量偶联产物的荧光强度或测定染料与蛋白质的比例来评估。
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| 细胞实验 |
在体外细胞实验中，首先通过NHS酯-胺反应将Cy3 NHS酯与抗体、蛋白质或其他靶向配体偶联。然后纯化标记的偶联物，并将其添加到细胞培养基中与靶细胞孵育。洗涤后，使用荧光显微镜或流式细胞仪分析细胞。橙红色荧光可提供明亮且光稳定的标记，适用于细胞成像。
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| 动物实验 |
在动物体内实验中，通常不使用Cy3 NHS酯本身进行实验。然而，用该染料制备的缀合物可用于动物模型的成像应用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于Cy3 NHS酯是一种研究用荧光标记试剂而非候选药物，因此其药代动力学性质尚未得到表征。该化合物的分子量为590.15 g/mol，应在-20°C避光保存。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cy3 NHS酯仅供研究用途，不得用于人体治疗或诊断。处理此化学试剂时，应遵守标准的实验室安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Cy3 NHS酯（CAS#: 1393363-07-9）是一种氨基反应性橙红色荧光染料，用于标记蛋白质、抗体和核酸。它用于荧光显微镜、流式细胞术和FRET研究。该化合物没有临床或治疗应用。
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| 分子式 |
C34H40CLN3O4
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|---|---|
| 分子量 |
590.1521
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| 精确质量 |
589.27
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| CAS号 |
1393363-07-9
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| PubChem CID |
155487015
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| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
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| tPSA |
69.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
1120
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[Cl-].O(C(CCCCCN1C2=CC=CC=C2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C1C(C)(C)C2=CC=CC=C2[N+]=1C)=O)N1C(CCC1=O)=O
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| InChi Key |
KWDMHANYPGHTLW-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C34H40N3O4.ClH/c1-33(2)24-14-8-10-16-26(24)35(5)28(33)18-13-19-29-34(3,4)25-15-9-11-17-27(25)36(29)23-12-6-7-20-32(40)41-37-30(38)21-22-31(37)39;/h8-11,13-19H,6-7,12,20-23H2,1-5H3;1H/q+1;/p-1
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| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[(2Z)-3,3-dimethyl-2-[(E)-3-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)prop-2-enylidene]indol-1-yl]hexanoate;chloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 125 mg/mL (211.81 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6945 mL | 8.4724 mL | 16.9448 mL | |
| 5 mM | 0.3389 mL | 1.6945 mL | 3.3890 mL | |
| 10 mM | 0.1694 mL | 0.8472 mL | 1.6945 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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