Cy3 NHS ester (Cyanine3 NHS ester) 中文名称: Cy3-琥珀酰亚胺酯

目录号: V67096 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

Cy3 NHS 酯是一种 CY 染料。

Cy3 NHS ester (Cyanine3 NHS ester) CAS号: 1393363-07-9
产品类别: Fluorescent Dye

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
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产品描述

Cy3 NHS 酯是一种 CY 染料。 CY是Cyanine的缩写，是由两个氮原子通过奇数个甲基单元连接而成的化合物。花青类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高、水溶性好、合成相对简单等特点。 CY 染料通常用于标记蛋白质、抗体和小分子化合物。对于标记蛋白抗体来说，通过简单的混合反应即可完成结合。下面我们介绍一下蛋白质抗体标记的标记方法，具有一定的参考意义。。

生物活性&实验参考方法

体外研究 (In Vitro)	第一个协议。蛋白制备：请将蛋白（抗体）浓度制备至2 mg/mL，以达到最大的标记效果。 2)蛋白质溶液的pH为8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，则应添加 1 毫克碳酸氢钠 (1M)。 3) 蛋白质含量低于2 mg/mL时，标记效率会显着降低。为了获得最佳标记效率，建议的最终蛋白质浓度范围为 2–10 mg/mL。 4) 为了确保最佳的标记效果，蛋白质需要处于不含铵离子和伯胺（如 Tris 或甘氨酸）的缓冲液中。 2. 准备染料（以CY3-NHS酯为例）。用无水 DMSO 填充含有 CY3-NHS 酯的小瓶，以形成 10 mM 储备溶液。使用移液器或涡旋器充分混合。 3.染料剂量计算。 CY3-NHS酯与蛋白质的理想摩尔比约为10，反应所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记的蛋白质的量。示例：将 1 mg CY3-NHS 酯溶解在 100 μL DMSO 中，假设所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL IgG (MW=150,000)。这产生了所需的 5.05 μL CY3-NHS 酯。具体计算过程如下： 1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG)/MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10-6 mmol 2) mmol (CY3-NHS 酯) = mmol (IgG) × 10=6.7×10-6 mmol×10=6.7 × 10-5 mmol 3) uL (CY3-NHS 酯) = mmol (CY3-NHS 酯) ×MW (CY3-NHS 酯)/mg/μL (CY3-NHS 酯) = 6.7 ×10-5 mmol ×753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL=5.05 μL (CY3-NHS 酯) 4. 1) 执行偶联反应：取溶液中的0.5 mL蛋白样品，加入适量新配的10 mg/mL CY3-NHS酯，轻轻摇匀，短暂离心，在桶中收集样品。底部。为防止蛋白质样品变性和失活，请勿将它们均匀混合。 2) 将反应管置于避光处后，室温轻轻孵育60分钟。十到十五分钟后，小心地反转第五步。纯化缀合物：使用 SepHadex G-25 柱，以下过程演示了如何纯化染料-蛋白质缀合物。 1) 按照制造商的指南组装 SepHadex G-25 柱。 2) 将反应混合物填充 SepHadex G-25 柱至边缘（来自“运行缀合反应”）。 3) 当样品流到顶部树脂表面以下时，立即添加 PBS (pH 7.2–7.4)。要完成所选样品的纯化，请添加额外的 PBS (pH 7.2–7.4)。将适当的含有染料-蛋白质缀合物的级分合并。
参考文献	[1]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108. [2]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029.

体外研究 (In Vitro)

第一个协议。蛋白制备：请将蛋白（抗体）浓度制备至2 mg/mL，以达到最大的标记效果。 2)蛋白质溶液的pH为8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，则应添加 1 毫克碳酸氢钠 (1M)。 3) 蛋白质含量低于2 mg/mL时，标记效率会显着降低。为了获得最佳标记效率，建议的最终蛋白质浓度范围为 2–10 mg/mL。 4) 为了确保最佳的标记效果，蛋白质需要处于不含铵离子和伯胺（如 Tris 或甘氨酸）的缓冲液中。 2. 准备染料（以CY3-NHS酯为例）。用无水 DMSO 填充含有 CY3-NHS 酯的小瓶，以形成 10 mM 储备溶液。使用移液器或涡旋器充分混合。 3.染料剂量计算。 CY3-NHS酯与蛋白质的理想摩尔比约为10，反应所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记的蛋白质的量。示例：将 1 mg CY3-NHS 酯溶解在 100 μL DMSO 中，假设所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL IgG (MW=150,000)。这产生了所需的 5.05 μL CY3-NHS 酯。具体计算过程如下： 1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG)/MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10-6 mmol 2) mmol (CY3-NHS 酯) = mmol (IgG) × 10=6.7×10-6 mmol×10=6.7 × 10-5 mmol 3) uL (CY3-NHS 酯) = mmol (CY3-NHS 酯) ×MW (CY3-NHS 酯)/mg/μL (CY3-NHS 酯) = 6.7 ×10-5 mmol ×753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL=5.05 μL (CY3-NHS 酯) 4. 1) 执行偶联反应：取溶液中的0.5 mL蛋白样品，加入适量新配的10 mg/mL CY3-NHS酯，轻轻摇匀，短暂离心，在桶中收集样品。底部。为防止蛋白质样品变性和失活，请勿将它们均匀混合。 2) 将反应管置于避光处后，室温轻轻孵育60分钟。十到十五分钟后，小心地反转第五步。纯化缀合物：使用 SepHadex G-25 柱，以下过程演示了如何纯化染料-蛋白质缀合物。 1) 按照制造商的指南组装 SepHadex G-25 柱。 2) 将反应混合物填充 SepHadex G-25 柱至边缘（来自“运行缀合反应”）。 3) 当样品流到顶部树脂表面以下时，立即添加 PBS (pH 7.2–7.4)。要完成所选样品的纯化，请添加额外的 PBS (pH 7.2–7.4)。将适当的含有染料-蛋白质缀合物的级分合并。

参考文献

[1]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108.

[2]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C34H40CLN3O4
分子量	590.1521
精确质量	589.27
CAS号	1393363-07-9
PubChem CID	155487015
外观&性状	Light yellow to green yellow solid powder
tPSA	69.9
氢键供体(HBD)数目	0
氢键受体(HBA)数目	6
可旋转键数目(RBC)	10
重原子数目	42
分子复杂度/Complexity	1120
定义原子立体中心数目	0
SMILES	[Cl-].O(C(CCCCCN1C2=CC=CC=C2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C1C(C)(C)C2=CC=CC=C2[N+]=1C)=O)N1C(CCC1=O)=O
InChi Key	KWDMHANYPGHTLW-UHFFFAOYSA-M
InChi Code	InChI=1S/C34H40N3O4.ClH/c1-33(2)24-14-8-10-16-26(24)35(5)28(33)18-13-19-29-34(3,4)25-15-9-11-17-27(25)36(29)23-12-6-7-20-32(40)41-37-30(38)21-22-31(37)39;/h8-11,13-19H,6-7,12,20-23H2,1-5H3;1H/q+1;/p-1
化学名	(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[(2Z)-3,3-dimethyl-2-[(E)-3-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)prop-2-enylidene]indol-1-yl]hexanoate;chloride
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO: 125 mg/mL (211.81 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO: 125 mg/mL (211.81 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	1.6945 mL	8.4724 mL	16.9448 mL
	5 mM	0.3389 mL	1.6945 mL	3.3890 mL
	10 mM	0.1694 mL	0.8472 mL	1.6945 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。