HKGreen-4I

目录号: V67134 纯度: ≥98%
HKGreen-4I是一种高灵敏度的绿色荧光探针,专门检测活细胞中的ONOO-。
HKGreen-4I CAS号: 1448821-82-6
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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产品描述
HKGreen-4I是一种高灵敏度的绿色荧光探针,专门检测活细胞中的ONOO-。其最大激发波长和发射波长分别为520 nm和543 nm。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
1. HKGreen-4I 工作液的制备 1.1 储备液的制备:将 1 mg HKGreen-4I 用 150 μL 无水 DMSO 稀释,配制成 10 mM 储备液。建议分装 HKGreen-4I 储存液并在 -20°C 或 -80°C 避光保存。 1.2 配制功能液 使用预热的无血清细胞培养基或 PBS 稀释原液配制 1-10 μM HKGreen-4I 工作液。注:HKGreen-4I工作液请根据实际情况调整其浓度来配制使用。 2. 细胞染色(悬浮细胞) 2.1 离心细胞,加入PBS,洗涤2次,每次5分钟。细胞密度为1×106/mL。 2.2 加入 1 mL HKGreen-4I 工作液,然后在室温下静置 5 至 30 分钟。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟,然后去除上清液。 2.4 加入PBS后,洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于1毫升PBS或无血清培养基中,用流式细胞仪或荧光显微镜观察。 3. 细胞内贴壁细胞染色 3.1 使用无菌盖玻片培养贴壁细胞。 3.2 从培养基中取出盖玻片后吸出多余的培养基。 3.3 用100 μL染料工作液完全覆盖细胞,轻轻摇匀,孵育5至30分钟。 3.4 吸干染料工作液并用培养基洗涤两次,每次共5分钟后,用流式细胞仪或荧光显微镜观察。
参考文献

[1]. Trends Cell Biol. 2007 Sep;17(9):422-7. doi: 10.1016/j.tcb.2007.07.009. Epub 2007 Sep 4.

[2]. Diarylamine-based fluorogenic probes for detection of peroxynitrite. US9651528B2.

[3]. Tandem Payne/Dakin Reaction: A New Strategy for Hydrogen Peroxide Detection and Molecular Imaging. Angew Chem Int Ed Engl. 2018 Aug 6;57(32):10173-10177.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C36H30N2O11
分子量
666.630210399628
精确质量
666.184
CAS号
1448821-82-6
PubChem CID
89717569
外观&性状
White to pink solid powder
LogP
4.5
tPSA
158
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
12
可旋转键数目(RBC)
11
重原子数目
49
分子复杂度/Complexity
1250
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O1C(C2C=C(C(N(CC(=O)OC)CC(=O)OC)=O)C=CC=2C21C1C=CC(=CC=1OC1C=C(C=CC2=1)N(C)C1C=CC(=CC=1)O)OC(C)=O)=O
InChi Key
ZOZXUNDNNSKANR-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H30N2O11/c1-20(39)47-25-11-14-29-31(17-25)48-30-16-23(37(2)22-6-9-24(40)10-7-22)8-13-28(30)36(29)27-12-5-21(15-26(27)35(44)49-36)34(43)38(18-32(41)45-3)19-33(42)46-4/h5-17,40H,18-19H2,1-4H3
化学名
methyl 2-[[3'-acetyloxy-6'-(4-hydroxy-N-methylanilino)-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carbonyl]-(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]acetate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 40 mg/mL (60.00 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 6 mg/mL (9.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 60.0 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 3 mg/mL (4.50 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 30.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 1.75 mg/mL (2.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 17.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5001 mL 7.5004 mL 15.0008 mL
5 mM 0.3000 mL 1.5001 mL 3.0002 mL
10 mM 0.1500 mL 0.7500 mL 1.5001 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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