| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
VHL
ARD-61 is a PROTAC molecule that specifically targets the Androgen Receptor (AR) for degradation. It also effectively induces the degradation of the progesterone receptor (PR) in AR+ cancer cell lines. By recruiting an E3 ubiquitin ligase to AR and PR, it triggers their ubiquitination and subsequent destruction by the proteasome. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
为了将雄激素受体（AR）蛋白募集至cullin 2进行泛素化修饰，进而通过蛋白酶体途径降解AR，ARD-61通过其AR拮抗剂部分与AR蛋白结合，并通过其VHL配体部分与von Hippel-Lindau (VHL)/cullin 2 E3连接酶结合[1]。在AR表达水平最高的MDA-MB-453和HCC1428细胞系中，ARD-61（0.001-100 μM；处理7天）的IC50值分别为235 nM和121 nM。在AR蛋白表达水平中等的MCF-7、BT-549和MDA-MB-415细胞系中，ARD-61的IC50值分别为39 nM、147 nM和380 nM，表现出对细胞生长的部分抑制作用[1]。在所有三种AR阳性乳腺癌细胞系中，ARD-61（25–1000 nM；6–72 h）均以剂量和时间依赖的方式诱导G2/M期细胞周期阻滞[1]。MDA-MB-453和HCC1428细胞系在暴露于ARD-61（25–1000000 nM；72 h）后发生凋亡[1]。ARD-61（0.01–1000 nM；6 h）降低AR蛋白水平的效力和有效性非常高。在T47D细胞中，ARD-61（0.01–1000 nM；6 h）可降低PR蛋白水平，其DC50值为0.15 nM。ER和GR蛋白不受ARD-61的明显影响[1]。 ARD-61 (1 µM) 可在 24 小时内有效阻断 MYC 和 Wnt/β-catenin 信号通路。除了降低磷酸化和非磷酸化 HER2 和 HER3 蛋白的水平外，ARD-61 (1-1000 nM) 在 24 小时内对二者均有效[1]。当 VHL 被有效敲低时，MDA-MB-453 和 MCF-7 细胞系均对 ARD-61 (100 nM; 24 h) 诱导的 AR 降解表现出完全抵抗性[1]。
体外实验表明，ARD-61（0.01-1000 nM；6 小时）能高效降低 AR+ 癌细胞系中的 AR 蛋白水平。它能强效诱导 AR 和孕激素受体 (PR) 降解，从而抑制下游信号传导并诱导细胞凋亡。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在雄性SCID小鼠中，ARD-61（25、50 mg/kg/天；腹腔注射；持续75天）可有效抑制MDA-MB-453异种移植瘤模型的肿瘤生长[1]。ARD-61（25 mg/kg；腹腔注射；持续75天；单次给药）可快速有效地降低MDA-MB-453异种移植瘤组织中的AR蛋白水平，且该作用至少持续24小时。ARD-61以时间依赖性方式显著降低WNT7B的mRNA水平[1]。
细胞实验证实，ARD-61能有效诱导细胞凋亡。体内实验表明，ARD-61在小鼠MDA-MB-453异种移植瘤模型中能有效抑制肿瘤生长。其通过降解雄激素受体（AR）和孕激素受体（PR），破坏癌细胞的生存信号，从而导致肿瘤消退。 |
| 酶活实验 |
采用纯化的组氨酸标签雄激素受体（AR）和生物素标记的VHL E3连接酶进行无细胞三元复合物测定。加入链霉亲和素供体磁珠和镍螯合物受体磁珠。当PROTAC介导AR与VHL结合后，磁珠相互靠近，产生发光信号。计算三元复合物形成的EC50值。
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| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： 测试的 MDA-MB-453 和 HCC1428 细胞系 测试浓度： 0.001、0.01、0.1、1、10、100 μM 孵育时间： 7 天 实验结果： 几乎完全抑制细胞生长。 细胞周期分析[1] 细胞类型： 测试的细胞系：MDA-MB-453、HCC1428 和 MCF-7 测试浓度： 25、250、500、1000、10000、100000 nM 孵育时间： 6-72 小时 实验结果： 在这三种 AR+ 乳腺癌细胞系中，均以剂量和时间依赖的方式诱导 G2/M 期细胞周期阻滞。 细胞凋亡分析[1] 细胞类型： 测试的 MDA-MB-453 和 HCC1428 细胞系 测试浓度： 25、250、500、1000、10000、100000 nM 孵育时间： 6-72 小时 实验结果： 以剂量依赖的方式诱导 MDA-MB-453 和 HCC1428 细胞系发生凋亡。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： 测试细胞系：MDA-MB-453、MCF-7、BT549、MDA-MB-415 和 HCC1428 测试浓度： 0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000 nM 孵育时间： 6 小时 实验结果： MDA-MB-453 (DC50=0.44 nM) 和 MCF-7 (DC50=1.8 nM) 细胞中 AR 蛋白水平降低 在AR阳性乳腺癌细胞（MDA-MB-453）或前列腺癌细胞（LNCaP、VCaP）中进行细胞降解实验。将细胞用不同浓度的ARD-61处理6小时。收集细胞，裂解，并通过Western blot检测AR和PR蛋白水平。确定半数最大降解浓度（DC50）。通过Western blot检测PARP和Caspase-3的裂解来确认细胞凋亡。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： MDA-MB-453 异种移植瘤模型（雄性 SCID 小鼠）[1]
剂量： 25、50 mg/kg 给药途径： 腹腔注射；每日一次；持续 75 天 实验结果： 有效抑制肿瘤生长。 动物疗效研究在携带MDA-MB-453异种移植瘤的小鼠中进行。ARD-61通过腹腔注射或静脉注射给药。使用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，收集肿瘤组织进行Western blot分析，以确认AR和PR蛋白在体内的降解情况，并评估细胞凋亡标志物。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
目前正在评估ARD-61的药代动力学(PK)特性，以支持其体内应用。作为一种大型PROTAC分子（分子量1095.78），优化其吸收和组织分布是研究重点。目前正在进行相关研究，以确定其在啮齿动物模型中的半衰期和生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于ARD-61是一种高效的研究工具，其毒理学数据有限。其安全性主要在细胞实验中进行评估，结果显示其具有活性。在体内，其主要毒性可能与正常组织中AR和PR的强效降解相关的靶向效应有关。目前，该试剂的长期安全性评估尚未纳入常规流程。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ARD-61 是一种 PROTAC，分子式为 C61H71ClN8O7S，分子量为 1095.78。它是一种高度特异性的化学探针，用于消耗 AR 和 PR 蛋白，为研究人员提供了一种强大的工具来剖析急性蛋白质丢失的后果，这与转录或翻译抑制的影响截然不同。
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| 分子式 |
C61H71CLN8O7S
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|---|---|
| 分子量 |
1095.78385281563
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| 精确质量 |
1094.485
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| CAS号 |
2316837-08-6
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| PubChem CID |
154704831
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
9.3
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| tPSA |
223
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
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| 可旋转键数目(RBC) |
15
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| 重原子数目 |
78
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| 分子复杂度/Complexity |
2200
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
ClC1=C(C#N)C=CC(=C1)OC1C(C)(C)C(C1(C)C)NC(C1C=CC(C#CC2CCN(CC2)C2CCN(C(C[C@@H](C3C=CC(C4=C(C)N=CS4)=CC=3)NC([C@@H]3C[C@H](CN3C([C@@H](C3=CC(C)=NO3)C(C)C)=O)O)=O)=O)CC2)=CC=1)=O
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| InChi Key |
RGPUSLXMPBTXNU-CUPIBCLHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C61H71ClN8O7S/c1-36(2)53(51-29-37(3)67-77-51)57(75)70-34-46(71)30-50(70)56(74)65-49(41-15-17-42(18-16-41)54-38(4)64-35-78-54)32-52(72)69-27-23-45(24-28-69)68-25-21-40(22-26-68)10-9-39-11-13-43(14-12-39)55(73)66-58-60(5,6)59(61(58,7)8)76-47-20-19-44(33-63)48(62)31-47/h11-20,29,31,35-36,40,45-46,49-50,53,58-59,71H,21-28,30,32,34H2,1-8H3,(H,65,74)(H,66,73)/t46-,49+,50+,53-,58?,59?/m1/s1
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| 化学名 |
(2S,4R)-N-[(1S)-3-[4-[4-[2-[4-[[3-(3-chloro-4-cyanophenoxy)-2,2,4,4-tetramethylcyclobutyl]carbamoyl]phenyl]ethynyl]piperidin-1-yl]piperidin-1-yl]-1-[4-(4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)phenyl]-3-oxopropyl]-4-hydroxy-1-[(2R)-3-methyl-2-(3-methyl-1,2-oxazol-5-yl)butanoyl]pyrrolidine-2-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (91.26 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9126 mL | 4.5630 mL | 9.1259 mL | |
| 5 mM | 0.1825 mL | 0.9126 mL | 1.8252 mL | |
| 10 mM | 0.0913 mL | 0.4563 mL | 0.9126 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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