Sephadex G 50 (Sephadex G 50)

别名: 葡聚糖凝胶G50;葡聚糖凝胶G-50;Sephadex G-50 medium 葡聚糖凝胶G-50;交联葡聚糖凝胶G-50;交联右旋糖酐凝胶G-5
目录号: V68651 纯度: ≥98%
Sephadex G 50 是一种凝胶过滤介质。
Sephadex G 50 (Sephadex G 50) CAS号: 9048-71-9
产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5g
10g
25g
Other Sizes

Other Forms of Sephadex G 50 (Sephadex G 50):

  • Sephadex G 200 (Sephadex G200)
  • Sephadex G 15 (Sephadex G15)
  • Sephadex G 150 (Sephadex G150)
  • Sephadex G 100 (Sephadex G100)
  • Sephadex G 10 (Sephadex G10)
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
Sephadex G 50 是一种凝胶过滤介质。 Sephadex G 50 可用于凝胶渗透色谱分离糖肽混合物。
生物活性&实验参考方法
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C11H9N3O2.NA+
分子量
238.19786
CAS号
9048-71-9
相关CAS号
Sephadex G 200;9041-36-5;Sephadex G 15;11081-40-6;Sephadex G 10;9050-68-4;Sephadex G 150;12774-36-6
外观&性状
White to off-white solid powder
SMILES
[Na+].O=C1C=C/C(=N/NC2=CC=CC=N2)/C(O)=C1
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)

葡聚糖凝胶 G 系列使用说明

 

1 化学和物理性质

 

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

 

2 产品说明

 

产品名称

球蛋白分离范围

最大耐压 MPa

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-10

<700

缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子

0.15

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-15

<1500

缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子

0.15

 

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-25

1000-5000

工业上脱盐及交换缓冲液

 

0.15

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-50

1000-30000

多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定

0.10

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-75

2000-70000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

0.016

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-100

2000-120000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

0.0096

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-150

5000-300000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

0.0096

 

 

 

 

葡聚糖凝胶 G-200

5000-600000

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定

0.0096

 

 

 

 

 

 

 

3 使用方法

 

 

 

 

 

Sephadex 系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅拌,因为它可能破

 

坏填料,不要使用磁力搅拌器。

 

3.1 填料的准备

 

1)将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀 24 小时,或用热水膨胀 1 小时(不要水浴!)。

 

洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有漂浮物,请去除。

 

2)将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度,对所有的缓冲液进行脱气处理。

 

3.2 装柱

 

1)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。

 

2)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。

 

3)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶

 

在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

 

 

 

4)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料最大耐压)。

 

3.3 平衡

 

上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 pH 值和电导值等于上柱的 Buffer pH 值和电导值)。

 

3.4 上样

 

样品一定要离心或过滤后(0.45um 滤膜)上样。

 

凝胶过滤的上样量一般为不大于 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在 1-2%的柱床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到 20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱子越高,分离效果相应越好,但是,柱高过高的凝胶柱会引起较大的反压,也应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为 51 即可。

 

3.5 洗脱方法

 

可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱。

 

3.8 在位清洗(CIP

 

凝胶使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是用 0.1 M 氢氧化钠洗 2 个柱体积,再以至少 10 个柱体积平衡缓冲液再生。

 

4 保存

 

未处理的填料,室温密闭保存。使用完的填料,用纯水将盐分彻底冲洗,最后保存在 20%乙醇中,4℃保存。

 

5 注意事项:

 

1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的

 

正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。

 

2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。

 

3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。

 

6 不同规格特性

 

细颗粒:流速慢,分离效果最优。

 

粗颗粒:流速快,分离效果偏差。

 

中颗粒:流速适中,分离效果适中,一般客户最常选用此型号。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.1982 mL 20.9908 mL 41.9815 mL
5 mM 0.8396 mL 4.1982 mL 8.3963 mL
10 mM 0.4198 mL 2.0991 mL 4.1982 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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