| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EGFR[1]
EGFR (epidermal growth factor receptor). As the principal metabolite of the EGFR inhibitor Alflutinib, AST5902 retains the ability to inhibit EGFR kinase activity, contributing to the overall antineoplastic effect of the parent drug. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
本研究探讨了参与阿氟替尼代谢的CYP同工酶，并评估了阿氟替尼及其代谢产物的酶抑制和诱导潜力。数据显示，阿氟替尼在人肝微粒体（HLMs）中主要由CYP3A4代谢，CYP3A4可催化生成AST5902。[1] 考虑到AST5902的高暴露量以及阿氟替尼和AST5902的结构，我们也评估了AST5902对CYP3A4的诱导潜力。低浓度AST5902可抑制CYP3A4的mRNA转录，但其潜在机制尚不明确。与阿氟替尼和利福平相比，AST5902的体外诱导作用较弱。然而，鉴于AST5902的血浆暴露量，AST5902也可能与CYP3A4敏感底物发生临床药物相互作用。[1]
AST5902三甲磺酸盐是阿氟替尼（AST2818）的主要代谢产物。它具有抗肿瘤活性，即抑制肿瘤生长。其主要作用机制是抑制EGFR，EGFR是多种癌症的关键驱动因子。该代谢产物具有活性，并有助于提高药物的整体疗效。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 I/II 期临床试验中，非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者单次服用阿氟替尼（剂量范围为 20–240 mg）后，其血药浓度峰值 (Cmax) 和药时曲线下面积 (AUC) 均呈剂量依赖性升高。多次给药后，阿氟替尼的暴露量增加幅度小于单次给药。AST5902 的 AUC 显著升高，甚至在 240 mg 剂量组中超过了阿氟替尼的 AUC。此外，多次给药后，阿氟替尼的清除率 (CL/F) 也呈时间依赖性和剂量依赖性增加。CYP 表型分析和 CYP 酶诱导实验表明，阿氟替尼是 CYP3A4 的底物和诱导剂。因此，阿氟替尼的自身诱导可能是临床试验中观察到的现象的原因。鉴于人体在 80 mg 剂量下阿氟替尼的暴露情况，推测阿氟替尼与 CYP3A4 敏感底物（包括咪达唑仑和三唑仑）合用时，会激活临床药代动力学药物相互作用。考虑到孕烷 X 受体 (PXR) 的激活可以诱导 CYP3A 和 CYP2C，因此应进一步评估阿氟替尼诱导 CYP2C 的潜力。[1]
AST5902 的体内活性来源于其母体药物阿氟替尼。作为主要的循环代谢物，它有助于阿氟替尼在异种移植模型中维持抗肿瘤活性。其甲磺酸三甲酯盐形式具有更高的溶解度和稳定性，适用于研究应用。 |
| 酶活实验 |
阿氟替尼在人肝微粒体（HLM）中的代谢[1]
实验开始前，将HLM在冰上轻轻解冻。然后，将3 µM阿氟替尼加入到HLM（0.5 mg蛋白/mL）中，溶于100 mM磷酸盐缓冲液（PBS；pH 7.4）中，总体积为100 μL。在37 °C孵育3分钟后，加入1.0 mM NADPH启动反应。孵育1小时后，加入等体积的冰乙腈终止反应。所有孵育实验均重复两次，然后使用UPLC-UV/Q-TOF MS进行分析。 HLM与特异性CYP抑制剂的孵育[1] 使用HLM研究CYP酶抑制剂对阿氟替尼代谢的影响。孵育混合物（100 µL）包含阿氟替尼（3 µM）、人肝微粒体（HLMs，0.5 mg 蛋白/mL）、NADPH（1 mM）、PBS（100 mM，pH 7.4）和一种选择性 CYP 抑制剂。化学抑制剂如下：α-萘黄酮（2 µM）用于 CYP1A/2C，槲皮素（20 µM）用于 CYP2C8，磺胺苯唑（6 µM）用于 CYP2C9，噻氯匹定（24 µM）用于 CYP2B6/2C19，奎尼丁（8 µM）用于 CYP2D6，氯甲噻唑（24 µM）用于 CYP2E1，酮康唑（2 µM）用于 CYP3A，以及 ABT（1 mM）用于所有 CYP 酶。在加入底物之前，先将这些抑制剂与人肝微粒体（HLM）在NADPH存在下预孵育10分钟。之后，在37℃下孵育60分钟以启动反应。最后，加入100 µL冰冷的乙腈终止反应。所有孵育实验均重复两次，并在有或无抑制剂的情况下评估代谢物的生成。 重组人CYP同工酶对阿氟替尼的代谢[1] 为了确定参与阿氟替尼代谢的特定同工酶，将3 µM阿氟替尼与重组人CYP1A2、2A6、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、2E1、3A4或3A5（25 pmol P450/mL）混合于100 μL总体积中。分别加入1 mM NADPH和100 µL冰乙腈启动和终止反应。孵育在37 °C下进行60分钟。所有反应均重复两次，随后进行UPLC-UV/Q-TOF MS分析。 无细胞EGFR激酶活性测定采用重组人EGFR酶。将化合物与酶和肽底物在ATP存在下孵育30-60分钟。使用基于发光法的ADP检测试剂盒测定激酶活性。该测定用于比较代谢物与母体药物的IC50值。 |
| 细胞实验 |
将 3 μM 阿氟替尼与人肝细胞在 37 °C 下孵育 3 小时后，鉴定出主要代谢产物为 AST5902，占剩余阿氟替尼浓度的 52%。其他代谢产物占阿氟替尼的百分比低于 1.2%（未发表数据）。此外，AST5902 具有 CYP3A4 诱导活性，这可能有助于阿氟替尼的诱导作用。[1]
阿氟替尼和 AST5902 对人 CYP3A4 酶的诱导作用[1] 为了评估酶诱导作用，将 7 × 10⁵ 个肝细胞/mL 接种于胶原蛋白包被的 24 孔板中，并在 37 °C、5% CO₂ 的加湿培养箱中培养 24 小时。将肝细胞分别用人CYP3A4酶诱导剂利福平（10 μM）、阿氟替尼或AST5902（0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3或5 μM）或0.1% DMSO（对照组）处理，每日一次，连续三天。处理后，使用TRIzol试剂按照制造商的说明书提取RNA。使用PrimeScript RT试剂盒合成cDNA。使用SYBR Green Premix Ex Taq试剂盒在StepOnePlus实时荧光定量PCR系统上进行实时荧光定量PCR。CYP3A4的正向引物和反向引物分别为5′-ATCACTAGCACATCATTTGGAG-3′和5′-GGAATGGAAAGGTTATTGAGAG-3′。 GAPDH的正向引物和反向引物分别为5′-AGAAGGCTGGGGCTCATTTG-3′和5′-GAGGGGCCATCCACAGTCTTC-3′。采用比较阈值循环法，以GAPDH为内参，对cDNA水平进行定量。EC50为诱导剂浓度达到最大诱导效应50%时的浓度，通过GraphPad Prism 5.0版软件进行非线性回归分析获得。 将EGFR突变型非小细胞肺癌细胞系（例如PC-9）接种于96孔板中，并用递增浓度的AST5902三甲磺酸盐处理72小时。使用CellTiter-Glo试剂检测细胞活力。计算IC50值，并将其体外活性与阿氟替尼进行比较。通过Western blot检测其对EGFR磷酸化的影响。 |
| 动物实验 |
在体内研究中，将阿氟替尼（Alflutinib）注射到携带 EGFR 突变异种移植瘤的小鼠体内。采集血液和肿瘤样本，以定量分析母体药物和 AST5902 代谢物。也可将 AST5902 三甲磺酸盐作为对照，以确定其药代动力学特征，并将其疗效与母体药物进行比较。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
AST5902 是阿氟替尼的主要代谢产物。作为一种代谢产物，其药代动力学特性通常来源于阿氟替尼的给药情况。甲磺酸三甲酯盐（C30H41F3N8O11S3，分子量 842.884）被用作稳定的研究标准品。其半衰期和全身暴露量与母体药物在体内的药理学特性相关。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无关于AST5902三甲磺酸盐作为独立化合物的具体毒性数据报告。其毒性特征基于母体药物阿氟替尼，后者通常耐受性良好。预计会出现EGFR抑制剂常见的毒性反应，例如皮疹和腹泻。该化合物为参考标准，而非治疗药物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
阿氟替尼（AST2818）是一种第三代表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂，可抑制EGFR敏感突变和T790M突变。既往研究表明，阿氟替尼在多次给药后表现出非线性药代动力学特征，其表观清除率随时间和剂量增加而增加，这可能是由于其自身诱导细胞色素P450（CYP）酶所致。本研究探讨了参与阿氟替尼代谢的CYP同工酶，并评估了阿氟替尼及其代谢产物的酶抑制和诱导潜力。结果表明，阿氟替尼主要在人肝微粒体（HLM）中由CYP3A4代谢，CYP3A4催化生成AST5902。阿氟替尼不抑制HLM中的CYP同工酶，但可诱导人肝细胞中的CYP3A4。利福平是一种已知的强效CYP3A4诱导剂，并被FDA推荐作为CYP3A4诱导试验的阳性对照。我们发现阿氟替尼的诱导能力与利福平相当。在三批人肝细胞中，阿氟替尼分别诱导CYP3A4表达，其Emax分别为9.24倍、11.2倍和10.4倍，而利福平（10 μM）的诱导倍数分别为7.22倍、19.4倍和9.46倍。阿氟替尼诱导CYP3A4 mRNA表达的EC50为0.25 μM，与利福平相似。此外，与阿氟替尼相比，AST5902的CYP3A4诱导作用显著减弱。鉴于阿氟替尼和AST5902的血浆暴露水平，二者均可能影响CYP3A4底物的药代动力学。考虑到阿氟替尼既是CYP3A4底物又是强效CYP3A4诱导剂，预计在阿氟替尼治疗期间会发生药物相互作用。[1]
背景阿氟替尼是一种新型的、不可逆的、高选择性的第三代EGFR抑制剂，目前正在开发用于治疗携带EGFR激活突变和EGFR T790M耐药突变的非小细胞肺癌患者。阿氟替尼主要通过CYP3A4代谢生成其活性代谢物AST5902。阿氟替尼和AST5902均对体内药理活性有贡献。本研究旨在探讨利福平（一种强效CYP3A4诱导剂）对健康志愿者体内阿氟替尼和AST5902药代动力学的影响，从而为药物相互作用评估和临床应用提供重要信息。方法：这是一项单中心、开放标签、单序列试验，分为两个阶段。志愿者在第1天和第22天接受单次80 mg阿氟替尼给药，并在第15天至第30天持续接受0.6 g利福平治疗。分别于第1-10天和第22-31天采集血样。分析阿氟替尼、AST5902以及阿氟替尼和AST5902总活性成分在有无利福平存在下的药代动力学。结果：与利福平合用导致阿氟替尼的AUC0-∞降低86%，Cmax降低60%；而AST5902的AUC0-∞降低17%，Cmax升高1.09倍。总活性成分（阿氟替尼和AST5902）的AUC0-∞和Cmax分别降低62%和39%。结论：利福平作为一种强效CYP3A4诱导剂，显著影响阿氟替尼及其总活性成分（阿氟替尼和AST5902）的药代动力学。这些结果提示，在阿氟替尼治疗期间应避免合用强效CYP3A4诱导剂。本试验已在http://www.chinadrugtrials.org.cn注册。注册号为 CTR20191562，注册日期为 2019-09-12。来源：Invest New Drugs. 2021 年 8 月；39(4):1011-1018。doi: 10.1007/s10637-021-01071-z。 其他信息：AST5902 三甲磺酸盐（CAS 2929417-90-1）是一种研究级化学品，是 EGFR 抑制剂阿氟替尼（AST2818）的主要代谢产物。本产品适用于研究和分析应用，例如液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS），用于定量生物样品中的代谢产物。它并非用于人体的治疗药物。 |
| 分子式 |
C30H41F3N8O11S3
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|---|---|
| 分子量 |
842.883753538132
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| 精确质量 |
842.2
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| CAS号 |
2929417-90-1
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| 相关CAS号 |
AST5902;2412155-74-7
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| PubChem CID |
155971210
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| tPSA |
298Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
20
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
55
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| 分子复杂度/Complexity |
929
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CNCCN(C)C1=NC(=C(C=C1NC(=O)C=C)NC2=NC=CC(=N2)C3=CN(C4=CC=CC=C43)C)OCC(F)(F)F.CS(=O)(=O)O.CS(=O)(=O)O.CS(=O)(=O)O
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| InChi Key |
KRCDPFVVSHJNOV-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H29F3N8O2.3CH4O3S/c1-5-23(39)33-20-14-21(25(40-16-27(28,29)30)36-24(20)37(3)13-12-31-2)35-26-32-11-10-19(34-26)18-15-38(4)22-9-7-6-8-17(18)22;3*1-5(2,3)4/h5-11,14-15,31H,1,12-13,16H2,2-4H3,(H,33,39)(H,32,34,35);3*1H3,(H,2,3,4)
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| 化学名 |
methanesulfonic acid;N-[5-[[4-(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2-yl]amino]-2-[methyl-[2-(methylamino)ethyl]amino]-6-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridin-3-yl]prop-2-enamide
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| 别名 |
AST5902 trimesylate; AST5902 (trimesylate); AST5902 trimesylate; 2929417-90-1; AST5902 (trimesylate);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50 mg/mL (59.32 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1864 mL | 5.9320 mL | 11.8641 mL | |
| 5 mM | 0.2373 mL | 1.1864 mL | 2.3728 mL | |
| 10 mM | 0.1186 mL | 0.5932 mL | 1.1864 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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