| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MAO-B 0.23 mM (IC50)
Monoamine oxidase B (MAO-B). Methyl citrate is a MAO-B inhibitor with an IC50 of 0.23 mM (230 uM). It is isolated from natural sources (prickly pear cactus fruits) and exhibits moderate potency and selectivity for MAO-B over MAO-A, although detailed selectivity data are limited. MAO-B is an enzyme involved in the metabolism of dopamine and other monoamine neurotransmitters. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
单胺氧化酶 B (MAO-B) 可被柠檬酸甲酯抑制 (IC50=0.23 mM)[1]。
体外实验表明，柠檬酸甲酯可作为MAO-B的竞争性或非竞争性抑制剂，降低该酶对多巴胺和苯乙胺等单胺底物的脱氨作用。该化合物对MAO-B的抑制IC50值为0.23 mM。虽然其效力低于合成MAO-B抑制剂（如司来吉兰），但可作为药物研发的天然先导化合物。详细的机制研究（例如，用于确定抑制模式的Lineweaver-Burk分析）尚未完全发表。该化合物在浓度高达1 mM时对MAO-A活性无显著影响。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
柠檬酸甲酯尚未进行广泛的体内研究。作为一种具有中等MAO-B抑制活性（IC50 230 uM）的天然产物，当以足够高的剂量给药时，它可能在帕金森病动物模型中表现出轻微的神经保护作用。然而，公开文献中尚无详细的体内疗效数据。该化合物存在于天然来源中，提示其可能具有膳食或营养保健品应用价值，但这些应用尚未得到验证。
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| 酶活实验 |
标准的无细胞 MAO-B 抑制试验采用纯化的重组人 MAO-B 酶或大鼠/小鼠肝线粒体 MAO-B 酶。试验在 96 孔板中进行，使用 50-100 mM 磷酸钾缓冲液（pH 7.4）。柠檬酸甲酯溶解于试验缓冲液或 DMSO（最终 DMSO 浓度 ≤1%）中，浓度范围为 10-10000 uM（通常为 0.01-10 mM）。将 MAO-B 酶（每孔 0.5-5 ug 蛋白）与柠檬酸甲酯在 37℃ 下预孵育 10-30 分钟。加入 MAO-B 底物（例如犬尿胺 (50-200 uM)、苄胺 (0.5-2 mM) 或酪胺 (100-500 uM)）启动反应。在 37°C 下孵育 20-60 分钟后，加入冰冷的 2 M NaOH 或 10% 三氯乙酸终止反应。产物（由犬尿胺生成 4-羟基喹啉，由苄胺生成苯甲醛）通过分光光度法测定（4-羟基喹啉：激发波长 315 nm，发射波长 380 nm；苯甲醛：吸光度 250 nm）。IC50 值通过浓度-抑制曲线，利用非线性回归计算得出。对于柠檬酸甲酯，IC50 = 230 uM (0.23 mM)。为了进行比较，每次实验均包含阳性对照 MAO-B 抑制剂（例如，司来吉兰/地普尼，IC50 约为 0.01-0.1 uM）。在动力学研究中，使用不同底物浓度（0-10 × Km）的固定柠檬酸甲酯浓度（0、0.23、0.46、1.15 mM）。通过绘制 Lineweaver-Burk 图（1/反应速率 vs 1/底物浓度）来确定抑制模式（竞争性、非竞争性、反竞争性或混合型）。这些实验中柠檬酸甲酯的数据尚未完全发表。在 MAO-A 选择性测定中，使用纯化的人 MAO-A 或预先用氯吉兰 (1 uM) 或司来吉兰 (1 uM) 处理以抑制另一种同工酶的小鼠肝线粒体，并以血清素 (100-500 uM) 或酪胺 (100-500 uM) 作为底物。柠檬酸甲酯在浓度高达 1 mM 时对 MAO-A 的抑制作用极小。对于受体和酶选择性分析，可以使用浓度为 10-1000 uM 的柠檬酸甲酯对 50-100 个靶点（GPCR、离子通道、转运蛋白、酶）进行筛选，以识别脱靶活性；结果尚未公开。
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| 细胞实验 |
对于使用柠檬酸甲酯进行的细胞MAO-B抑制实验，将表达MAO-B的SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞或原代星形胶质细胞接种于96孔板中（每孔20,000-50,000个细胞），培养基为添加10% FBS的DMEM/F-12，培养48-72小时。对于细胞裂解液实验，通过刮取或胰蛋白酶消化收集细胞，用PBS洗涤，然后在含有0.1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂的50 mM pH 7.4磷酸钾缓冲液中裂解细胞。将细胞裂解液离心（10,000 × g，20 分钟，4℃），取上清液（10-50 ug 蛋白），加入不同浓度的柠檬酸甲酯（0.01-10 mM），于 37℃ 孵育 10-30 分钟。加入犬尿胺（50-200 uM）作为底物，于 37℃ 反应 30-60 分钟。加入 0.1-0.2 倍体积的 2 M NaOH 终止反应，并用荧光法测定 4-羟基喹啉的生成量（激发波长 315 nm，发射波长 380 nm）。对于全细胞检测（评估细胞通透性），将完整细胞在HBSS或培养基中与柠檬酸甲酯（0.01-10 mM）于37℃孵育30-60分钟，然后洗涤并裂解细胞以测定MAO-B活性，或者使用荧光底物直接在完整细胞中测定MAO-B活性。MAO-B抑制百分比与溶剂对照组进行比较计算。通过MTT或LDH检测评估细胞活力，以确保所用柠檬酸甲酯浓度无细胞毒性。为了验证选择性，使用MAO-A特异性底物5-羟色胺（100-500 uM）进行平行实验。对于机制研究，在测定MAO-B活性前，用柠檬酸甲酯预处理细胞24-48小时，以评估MAO-B表达的潜在上调。也可以通过Western blot和qPCR定量MAO-B蛋白和mRNA。 MAO-B 抑制剂的 EC50 值约为 230 uM。由于柠檬酸甲酯是一种中等效力的抑制剂，需要 mM 浓度才能发挥作用，因此必须仔细注意其溶解度和潜在的非特异性效应。
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| 动物实验 |
由于柠檬酸甲酯的效力中等（IC50 230 μM），需要高剂量，因此其体内动物研究受到限制。在啮齿动物研究（雄性C57BL/6小鼠，20-30 g；或Sprague-Dawley大鼠，200-300 g）中，柠檬酸甲酯溶于无菌生理盐水或PBS缓冲液（pH值调至7.4），每日通过腹腔注射（50-500 mg/kg）或灌胃（100-1000 mg/kg）给药，持续3-14天。在帕金森病模型中，小鼠接受MPTP（1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶，20-30 mg/kg，腹腔注射）或6-羟基多巴胺（6-OHDA，3-5 μg，立体定位注射至纹状体）以诱导多巴胺能神经元变性。在MPTP/6-OHDA给药前3-7天开始，每日腹腔注射或口服柠檬酸甲酯（100-500 mg/kg），并在给药后持续7-14天。行为学评估包括：（1）转棒试验（加速杆，5分钟内转速4-40 rpm，每日3次，记录跌落潜伏期）——在基线和损伤诱导后进行。（2）旷场试验（40 × 40 cm场地，30-60分钟，记录总距离、中心停留时间和直立频率）——自发运动活性。（3）爬杆试验（转身并沿垂直杆下降所需时间）——运动迟缓评估。（4）握力测试（使用测力计测量前肢和后肢握力）。研究结束时，动物通过断头或二氧化碳窒息处死，并迅速解剖脑组织。采集纹状体和黑质样本用于：(1) 采用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定多巴胺、DOPAC和HVA水平。(2) 进行酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色（游离切片，30-40 μm，抗TH抗体稀释度1:1000-1:5000，DAB或荧光检测），以定量分析黑质中TH阳性神经元的存活率和纹状体中TH阳性纤维的密度。(3) 采用蛋白质印迹法检测TH、α-突触核蛋白和凋亡标志物（Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3）。(4) 测定氧化应激标志物（MDA、GSH、SOD活性）。同时采集血液和脑组织样本，采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析柠檬酸甲酯浓度。可能需要高剂量（高达 1000 mg/kg）才能达到足以抑制 MAO-B 的脑内浓度，并且由于该分子的极性，其口服生物利用度可能较低。公开文献中关于柠檬酸甲酯体内疗效的详细数据有限。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
柠檬酸甲酯（分子量 206.15 Da，分子式 C7H10O7）是一种小分子极性有机酸。作为柠檬酸循环中的天然代谢产物，它具有高水溶性和低亲脂性。这些特性导致其口服生物利用度低（估计 <10%）且血脑屏障穿透性极差（血浆浓度 <5%）。全身给药后，柠檬酸甲酯主要通过肾脏滤过和尿液排泄迅速从血浆中清除（半衰期 15-30 分钟）。它也参与三羧酸循环代谢。目前尚未发现活性代谢产物。对于需要抑制中枢神经系统 MAO-B 的研究，需要极高的剂量才能使脑内浓度高于 IC50 (230 μM)。此外，也可以采用脑室内直接给药进行中枢神经系统靶点验证，但这对于该化合物而言并不常见。由于柠檬酸甲酯天然存在于食物中（仙人掌果实），其毒性通常较低，被认为可安全食用。目前尚无公开文献报道其在动物或人体内的详细药代动力学研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
甲基柠檬酸酯的临床前毒性数据有限。作为一种天然存在于食用植物（如仙人掌）中的有机酸，它通常毒性较低。在啮齿动物研究中，剂量高达 1000 mg/kg 时，未报告急性毒性或不良反应。该化合物是柠檬酸循环的中间体，天然存在于人体代谢中。目前尚无致突变性或遗传毒性数据。应遵循实验室处理研究用化学品的标准安全预防措施。甲基柠檬酸酯尚未获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 或其他监管机构批准用于治疗用途。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
柠檬酸甲酯是一种天然存在的MAO-B抑制剂（IC50 0.23 mM），提取自仙人掌（Opuntia ficus-indica）果实。它也被称为柠檬酸单甲酯或柠檬酸甲酯。作为一种天然产物，它可作为先导化合物，用于开发更有效的MAO-B抑制剂，以治疗帕金森病和其他神经退行性疾病。该化合物尚未进入临床试验阶段。CAS号：26163-61-1。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C7H10O7
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|---|---|
| 分子量 |
206.15
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| 精确质量 |
204.027
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| CAS号 |
26163-61-1
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| PubChem CID |
71356437
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
-0.4
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| tPSA |
126.79
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
14
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| 分子复杂度/Complexity |
248
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
COC(=O)CC(CC(=O)O)(C(=O)O)O
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| InChi Key |
YUTUUOJFXIMELV-UHFFFAOYSA-L
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H10O7/c1-14-5(10)3-7(13,6(11)12)2-4(8)9/h13H,2-3H2,1H3,(H,8,9)(H,11,12)/p-2
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| 化学名 |
2-hydroxy-2-(2-methoxy-2-oxoethyl)butanedioate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (485.08 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.8508 mL | 24.2542 mL | 48.5084 mL | |
| 5 mM | 0.9702 mL | 4.8508 mL | 9.7017 mL | |
| 10 mM | 0.4851 mL | 2.4254 mL | 4.8508 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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