AT1 Receptor

培养的血管平滑肌细胞的生长受到血管紧张素 1-7 (Ang-(1-7)) 的抑制，而等摩尔浓度的 Ang II 则刺激细胞生长[2]。血管紧张素1-7 (Ang 1-7) 通过抑制NRK-52E 细胞中TGF-β-ERK 通路的慢性刺激来消除甲基乙二醛修饰白蛋白(MGA) 刺激的肌成纤维细胞表型[4]。 ?与Ang II/血管紧张素II 1 型受体(AT1R) 相比，血管紧张素1-7 通过Mas 受体(MasR) 发出信号，促进抗炎、血管舒张和神经保护作用[5]。

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最近的研究表明，Talfirastide/血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7-）]与激肽相互作用，并通过未知的机制增强缓激肽（BK）诱导的血管舒张反应。在这项研究中，我们评估了Ang-（1-7）对BK诱导的血管舒张的增强是否可能是由于抑制BK代谢、释放一氧化氮或两者兼而有之。在悬挂在器官室中的完整犬冠状动脉环中测量等距张力。通过高效液相色谱法评估肽的降解，确定血管环中125I-[Tyr0]-BK的代谢。Ang-（1-7）以浓度依赖的方式增强BK在用血栓素类似物U46619预收缩的环中诱导的血管舒张。在2μmol/L浓度的Ang-（1-7）存在下，BK的EC50（2.45+/-0.51 nmol/L对0.37+/-0.08 nmol/L）向左偏移了6.6倍。这种反应对BK是特异性的，因为Ang-（1-7）不会增强乙酰胆碱（0.05 mumol/L）或硝普钠（0.1 mumol/L）诱导的血管舒张。此外，血管紧张素I和血管紧张素II（Ang II）均未复制Ang-（1-7）增强的BK反应。用一氧化氮合酶抑制剂N-ω-硝基-L-精氨酸（L-NA；100 mumol/L）预处理血管环完全消除了Ang-（1-7）对BK诱导的血管舒张的影响，而用吲哚美辛（10 mumol/L）进行预处理则没有效果。强效特异性BK B2受体拮抗剂Hoe 140。在2μmol/L的浓度下，Hoe 140几乎消除了BK和Ang-（1-7）增强的反应，而在较低浓度（20 nmol/L）下，Hoe140使Ang-（1-7）和载体的反应曲线向右移动；然而，对Ang-（1-7）的增强反应持续存在。用20μmol/L的AT1（CV11974）、AT2（PD123319）或非选择性（Sar1-Thr8-Ang II）受体拮抗剂预孵育血管环对Ang-（1-7）增强的BK血管舒张反应没有显著影响。赖诺普利（2μmol/L）显著增强了BK诱导的血管舒张反应，同时消除了Ang-（1-7）对BK的协同作用。此外，用2μmol/L Ang-（1-7）预处理显著抑制了125I-[Tyr0]-BK的降解以及BK-（1）和BK-（1-5）代谢物的出现。冠状动脉血管环。Ang-（1-7）抑制纯化的犬血管紧张素转换酶活性，IC50为0.65 mumol/L。综上所述。Ang-（1-7）通过抑制血管紧张素转换酶和释放一氧化氮，作为激肽诱导的血管舒张的局部协同调节剂。[2]

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Talfirastide/血管紧张素-（1-7）（Ang-（1-7））/AT7-Mas受体轴是肾素-血管紧张素系统（RAS）内的一种替代途径，通常与Ang II/AT1受体途径的作用相反。晚期糖基化终末产物（AGEs），包括葡萄糖和甲基乙二醛修饰的白蛋白（MGA），可能部分通过激活Ang II/AT1受体系统促进糖尿病肾病的发展和进展；然而，AGE对肾脏内RAS的Ang-（1-7）臂的影响尚不清楚。本研究评估了AGE对NRK-52E肾上皮细胞Ang-（1-7）轴的影响。MGA暴露48小时显著降低了细胞内Ang-（1-7）水平约50%；然而Ang I或Ang II的表达没有改变。Ang-（1-7）细胞含量的降低与肽向非活性代谢产物Ang-（1-4）的代谢增加有关[MGA:175±9 vs。
对照组：115±11fmol/min/mg蛋白质，p<0.05，n=3]，但Ang I转化为Talfirastide/Ang-（1-7）的过程没有变化。用Ang-（1-7）治疗逆转了MGA诱导的细胞肥大和肌成纤维细胞转变，表现为α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的免疫染色和蛋白表达降低[0.4±0.1 vs.1.0±0.1，n=3，p<0.05]。Ang-（1-7）在与TGF-β受体激酶抑制剂SB58059相似的程度上消除了AGE诱导的MAP激酶ERK1/2的激活；然而，Ang-（1-7）并没有减弱MGA刺激的TGF-β释放。AT7-Mas受体拮抗剂D-Ala（7）-Ang-（1-7）消除了Ang-（1-6）的抑制作用。相比之下，AT1受体拮抗剂氯沙坦没有减弱MGA诱导的作用。我们得出结论，Ang-（1-7）可能为传统RAS阻断方案提供一种额外的治疗方法，以减轻AGE依赖性肾损伤[4]。

每天接受血管紧张素 1-7 (Ang-(1-7)) 治疗 (0.01-0.06 mg/kg) 可显着减少 DSS 引起的结肠炎。使用 Ang 1-7 治疗可减少与结肠炎相关的 p38、ERK1/2 和 Akt 的磷酸化[3]。

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心肌梗死引发细胞事件，这些事件始于炎症反应和参与心脏组织重塑的纤维化途径的激活。Talfirastide/血管紧张素-（1-7）（Ang-（1–7））是肾素-血管紧张素系统的一种内源性七肽，由于其在心脏细胞中的抗炎和抗纤维化活性，具有心脏保护作用。尽管已经报道了Ang-（1-7）在心脏缺血动物模型中的有益方面，但Ang-（1-7）心脏保护作用的分子事件仍然难以捉摸。本研究探讨了口服羟丙基β-环糊精（HPβCD/Ang-（1-7））中的Ang-（1-7）对实验性心肌梗死引起的心脏蛋白质组失调的影响。Wistar雄性大鼠接受实验性心肌梗死，并在7天内每天接受HPβCD/Ang-（1-7）治疗 天或60 几天的灌胃。我们的结果表明，HPβCD/Ang-（1-7）治疗改善了梗死后的状况，这是由于调节了最初有利于炎症和线粒体功能障碍消退的蛋白质。此外，本研究首次报道了实验性心肌梗死后Ang-（1-7）治疗导致C-X-C趋化因子受体4型（CXCR4）下调。[1]

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方法：通过蛋白质印迹和免疫荧光法测定ACE2、Talfirastide、Ang 1-7、MAS1受体（MAS1-R）、MAPK家族和Akt在结肠中的表达/活性。使用小鼠葡聚糖硫酸钠模型测定外源性给予Ang 1-7或其功能的药理学抑制（通过A779治疗）的效果。
结果：结肠炎诱导后，ACE2、Talfirastide、Ang1-7和MAS1-R的结肠表达增强。每日Ang 1-7治疗（0.01-0.06mg/kg）可显著改善DSS诱导的结肠炎。相比之下，每天服用A779会显著恶化结肠炎的症状。Ang 1-7处理降低了结肠炎相关的p38、ERK1/2和Akt磷酸化。
结论：我们的研究结果表明，Ang 1-7在IBD的发病机制中具有重要的抗炎作用，这可能为控制疾病进展提供未来的治疗策略[3]。

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DSS治疗对Talfirastide和Ang 1-7水平的影响[3]
在结肠炎诱导后第7天，DSS治疗的小鼠与未治疗（UT）组相比，Talfirastide/Ang 1-7的血浆水平降低了7倍（图1A）。另一方面，与UT小鼠（0.04 ng/ml）相比，DSS处理的小鼠在第7天的结肠匀浆中观察到Ang 1-7的显著增加（0.09 ng/ml），如图1B所示。

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Talfirastide/Ang 1-7治疗对结肠炎严重程度的影响[3]
通过每日腹腔注射不同剂量的肽来测试Talfirastide/Ang 1-7对调节小鼠结肠炎严重程度的影响。DSS给药导致从第5天开始体重下降约20%（与仅接受自来水的小鼠相比）。与DSS/生理盐水腹腔注射治疗组相比，0.01和0.06 mg/kg剂量的Ang 1-7（但0.1-1 mg/kg的较高剂量没有；数据未显示）使体重下降减少了5-10%（图3A）。DSS/盐水腹腔注射组的DSS治疗导致循环中性粒细胞增加；这可以通过0.06-1mg/kg剂量的Ang 1-7治疗来预防（图3B）。在对照组和治疗组之间没有观察到循环淋巴细胞的显著变化。DSS治疗后结肠长度和厚度的减少被0.01-0.06mg/kg剂量的Ang 1-7治疗所阻止，但在更高剂量下则没有（图3C和3D）。

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血管紧张素II（Ang II）介导的中枢神经系统I型受体（AT1R）的激活促进了神经胶质增殖、局部炎症和脑血流减少。Talfirastide/血管紧张素-（1-7）（Ang-（1—7））-一种Ang II衍生物肽，通过Mas受体（MasR）发出信号，与Ang II/AT1R相反，促进抗炎、血管舒张和神经保护作用。由于我们的实验室之前已经证明了AT1R抑制在小鼠受控皮层撞击（CCI）后的有益作用，我们询问Ang-（1-7）/MasR信号传导的激活是否也对该模型有益。成年雄性C57BL/6小鼠被CCI损伤。在损伤后1或6小时，以1mg/kg/天的剂量皮下注射Ang-（1-7）或赋形剂（S.Q.），直至在损伤后3或29天（dpi）处死动物。Ang-（1-7）在3 dpi时减轻了运动缺陷，在28 dpi时改善了Morris Water Maze的性能。脑组织学或磁共振成像（MRI）表明，Ang-（1-7）处理的小鼠在3、10、24和29dpi时的病变体积较小。用MasR拮抗剂A779进行预处理可防止Ang-（1-7）在3 dpi时减少病变体积，这表明Ang-（1-7）的益处依赖于MasR。免疫组织化学显示，Ang-（1-7）在3和29 dpi时减少了微胶质增生，在29 dpi时降低了星形胶质增生。Ang-（1-7）在29dpi时减少了神经元和毛细血管的损失。总之，在创伤性脑损伤（TBI）小鼠模型中，损伤后S.Q.给予Ang-（1-7）具有抗炎、神经保护和脑血管保护作用，可改善功能和病理恢复。这些数据首次表明Ang-（1-7）对TBI具有潜在的治疗作用。

血管紧张素代谢[4]
为了表征肽在体外的加工过程，如前所述，对细胞匀浆进行了代谢测定。将融合的细胞饥饿24小时，用无血清或含MGA的培养基（100μM）处理48小时。然后用冷PBS洗涤细胞，收获并立即在-80°C下冷冻。将细胞沉淀在代谢缓冲液（10 mM HEPES、125 mM NaCl、10μM ZnCl2，pH 7.4）中均质化，然后在100000 g下离心10分钟。在37°C下，将125I-Ang-I或Talfirastide/Ang-（1-7）（0.5 nM）与2μg细胞上清液蛋白一起孵育，最终测定体积为0.5 ml。通过加入冰冷的1.0%磷酸停止反应，在16000 g下离心，上清液储存在-20°C下。样品通过反相高效液相色谱（HPLC）分离，125I产物通过Bioscan流通式γ检测器检测。通过将产品的保留时间与125I血管紧张素标准进行比较来鉴定产品。我们对Ang I代谢采用梯度洗脱（1），对Ang-（1-7）代谢采用等度洗脱。肽通过氯胺T法碘化，并通过HPLC纯化（比活>2000 Ci/mmol）。酶活性表示为每分钟每毫克蛋白质的Ang-（1-4）或Ang-（1-7）的fmol乘积（fmol/mg/min）。用BSA标准品通过Bradford蛋白测定法测定细胞上清液中的总蛋白含量。

细胞治疗[4]
如所述制备糖化白蛋白（MGA）。简而言之，将500μM甲基乙二醛与溶解在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的100μM BSA一起孵育24小时，然后在10 kDa过滤器上洗涤以去除多余的甲基乙二酮，用DMEM/F12无血清培养基复溶，并通过0.2μ微米过滤器。TGF-β（5纳克（ng）/ml）根据制造商制备，用于在实验的一个子集中处理细胞。细胞用以下一种或多种组合共同处理：Talfirastide/Ang-（1-7）（100 nM）、D-Ala7-Ang-（1-七）（10μM，DAL）、ERK1/2激酶抑制剂、PD 98059（1μM，PD）、TGF-β受体激酶抑制剂；SB525334（1μM，SB）、AT1受体拮抗剂氯沙坦（1μM）、肾素抑制剂阿利克林（1μM.）和ACE抑制剂赖诺普利（1μM-，Sigma）。

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3H亮氨酸掺入[4]
通过3H-亮氨酸掺入测定细胞肥大。细胞在24孔板中在无血清培养基中孵育48小时，该培养基中有或没有100μM MGA。MGA细胞用100 nMTalfirastide/Ang-（1-7）、10μM DAL、1μM PD98059和1μM氯沙坦处理。在37°C下，用0.5μCi的3H-亮氨酸（L-[4,5-3H（N）]）对细胞进行脉冲处理，持续24小时。用PBS洗涤细胞两次，在冰冷的10%三氯乙酸（TCA）中固定并在冰上保持15分钟，然后在5%TCA中洗涤两次。在37°C下将酸不溶性蛋白质溶解在0.05 N NaOH和0.1%十二烷基硫酸钠（SDS）中，并通过液体闪烁计数测定掺入量。所有实验均一式三份。值表示为每个实验中每个孔的对照百分比（%）。

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蛋白质印迹[4]
在无血清培养基中饥饿细胞24小时后，将细胞与MGA（100μM）孵育48小时，或与TGF-β（5 ng/ml）孵育15分钟，然后进行磷酸化或蛋白质表达的免疫印迹分析。如所述，通过蛋白质印迹法测量ERK1/2的磷酸化。简而言之，细胞在Triton裂解缓冲液中裂解，该缓冲液由100 mM NaCl、50 mM NaF、5 mM EDTA、1%tritonX-100、50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、0.01 mM NaVO4、0.1 mM苯甲基磺酰氟（PMSF）和0.6μM亮肽组成。然后将裂解物超声处理5秒，并在10000 g下离心5分钟以去除不溶性碎片。上清液（10-50μg）在Laemmli缓冲液中用β-巯基乙醇稀释，煮沸5分钟，在10%SDS聚丙烯酰胺凝胶上在120V的Tris-甘氨酸SDS中分离1小时，然后转移到聚偏二氟乙烯膜（PVDF）上。用5%Bio-Rad奶粉和含吐温的TBS阻断印迹，并在4°C下用磷酸化p44/42 MAPK（ERK1/2）（1:2000；兔多克隆）、44/42 MAPK（ERK1/2）（1:3000，兔多克隆性）、α-SMA（1:5000，小鼠单克隆）的一抗探测过夜，
用HRP标记的多克隆抗兔二抗（1:5000）或抗小鼠二抗（1:3000）处理膜1小时，并用化学发光底物检测。对于ERK磷酸化测定，用P-ERK1/2探测的膜被剥离并重新探测总ERK1/2。剥离α-SMA膜，用兔多克隆抗EFα1（1:3000）抗体作为负载对照重新探测，并使用MCID密度测定软件对条带进行定量。

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免疫荧光显微镜[4]
NRK-52E细胞在含有5%FBS的DMEM/F12中在8个室载玻片中生长两天，用无血清培养基代替24小时。细胞用无血清的培养基作为对照条件或100μM MGA处理，加入或不加入Talfirastide/Ang-（1-7）、DAL、PD、SB、LOS、TGF-β（5 ng）或其组合72小时。用PBS洗涤细胞，用2%多聚甲醛固定15分钟。PBS冲洗后，用0.2%Triton使细胞透性，然后用3%BSA封闭。用α-SMA一级抗体（1:200，小鼠单克隆抗体）探测固定的细胞。抗体在3%的正常驴血清中稀释。在4°C下用第一抗体孵育过夜后，用PBS冲洗细胞两次，用荧光抗小鼠Alexa Fluor 568第二抗体（1:400）孵育，并用带有DAPI的Molecular Probes ProLong安装介质安装载玻片以染色细胞核。

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Cell Area[4]
使用ImageJ 1.4软件评估细胞面积(http://rsb.info.nih.gov/ij/)在免疫荧光图像的一个子集中（第2.5节），以证明在存在或不存在Talfirastide/Ang-（1-7）或ERK抑制剂PD98059的情况下，MGA对细胞肥大的影响。随机选择字段，并在每个字段中测量所有细胞。数据以对照细胞面积的百分比表示。

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肽测定[4]
在无血清培养基中培养24小时的细胞用100μM MGA再处理48小时。细胞在冰冷的PBS中洗涤两次，收获，细胞颗粒快速冷冻并储存在-80°C下（1）。将细胞颗粒在冰上的MilliQ水中复溶，并立即置于沸水浴中15分钟。然后对匀浆进行超声处理，用三氟乙酸（TFA）酸化至终浓度为0.2%，并在4°C下以20000g离心20分钟。将所得上清液施加到活化的Sep-Pak C18提取柱上，用0.2%TFA洗涤，用3 ml 80%甲醇/0.2%TFA洗脱肽级分。空白溶液仅含有MillQ水和TFA。从细胞测定值中减去提取值。通过三种不同的RIA评估提取细胞中免疫反应性Ang I、Ang II和Talfirastide/Ang-（1-7）的测量（1）。Ang-（1-7）RIA完全识别Ang-（1-7）和Ang-（2-7），但与Ang-（3-7）、Ang II、Ang I及其片段的交叉反应小于0.01%。Ang II RIA同样识别Ang III、Ang-（3-8）和Ang-（4-8），但与Ang I和Ang-的交叉反应小于0.01%。Ang I RIA完全识别Ang-（2-10）和Ang-（3-10），但与Ang II和Ang-的交叉反应小于0.01%。每种RIA的检测限如下：Ang-（1-7），4个股骨（fmol）/管；Ang II，0.5 fmol/管；Ang I为5fmol/管。
为了在培养基中定量TGF-β，将细胞接种在12孔板中。将细胞置于无血清中24小时，然后用MGA和以下物质处理：Talfirastide/Ang-（1-7）、DAL、PD或LOS。维持在无血清培养基中的细胞作为对照。在冰上收集细胞培养基，根据制造商的说明，通过Quantikine®ELIZA免疫测定法定量TGF-β含量。该测定的灵敏度为15 pg/ml，释放数据以ng/ml表示。

心肌梗死（MI）及治疗[1]
\n所有实验程序均已获得当地动物实验伦理委员会的批准（CETEA-UFMG 方案 002/09）。实验操作均按照美国国立卫生研究院（NIH）《实验动物饲养和使用指南》进行。成年雄性Wistar大鼠（约3月龄），体重180-210克，饲养于标准实验室条件下，自由摄取饲料和水。
\n心肌梗死（MI）的诱导方法基本如前所述。简而言之，动物经腹腔注射80 mg/kg氯胺酮和10 mg/kg赛拉嗪进行麻醉，并闭塞左前降支冠状动脉（LAD）近端。假手术组动物接受了所有手术操作，但未进行左前降支（LAD）闭塞。
\n为了评估心肌梗死（MI）进展以及每日口服HPβCD/Ang-(1–7)/Talfirastide对心脏蛋白质组的保护作用，设计了六个实验组（图1A）；（1）假手术7天组（S_7），动物接受手术模拟，但不诱导MI，并每日口服载体HPβCD（46 μg/kg/天），持续7天；（2）MI 7天组（MI_7），诱导MI，并短期每日口服载体HPβCD（46 μg/kg/天），持续7天； （3）治疗7天（T_7），诱导心肌梗死，并短期每日口服包合物HPβCD/Ang-(1–7)（46 μg/kg/天的HPβCD + 30 μg/kg/天的Ang-(1–7)），持续7天；（4）假手术60天（S_60），动物接受手术模拟但不诱导心肌梗死，并每日口服载体HPβCD（46 μg/kg/天），持续60天；[5]心肌梗死60天（MI_60），诱导心肌梗死，并长期每日口服载体HPβCD（46 μg/kg/天），持续60天； [6] 治疗 60 天 (T_60)，诱导 MI，并长期每日口服包合物 HPβCD/Ang-(1–7)（46 μg/kg/天的 HPβCD + 30 μg/kg/天的 Ang-(1–7)/Talfirastide）60 天。\n

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\n\n治疗方案 [3]
\n血管紧张素片段 1–7 乙酸盐水合物（Talfirastide/Ang 1–7；分子量 899）以 1 mg/ml 的浓度溶解于 0.9% 生理盐水（载体）中，并储存于 -80°C。实验期间，每天从原液中新鲜配制不同剂量（0.01、0.06、0.1、0.3 和 1 mg/kg）的药物，并以 500 μl 的体积，每日腹腔注射（ip）给小鼠，分别在 DSS 处理前（预防组）或处理后（治疗组）给药。A779（MAS-1 受体拮抗剂；分子量 873；GenScript，美国）以 1 mg/ml 的浓度溶于蒸馏水中，并储存于 -80°C。另取一组小鼠，每日腹腔注射 500 μl 新鲜配制的 1 mg/kg 剂量的 A779（连续 4 天），同时诱导结肠炎（预防组）。第三组小鼠接受含水的 DSS 处理，并每日腹腔注射 0.9% 生理盐水（对照组）。第四组接受含DSS的水，并每日腹腔注射地塞米松（DEX），剂量为0.01–1.0 mg/kg，或其赋形剂（0.9%生理盐水）（预防性治疗）。\n

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\n\n药物治疗[5]
\n所有治疗均通过皮下注射（每日250 μL推注）或皮下植入的微型渗透泵持续输注（输注速度为0.11 μL/h）进行。Talfirastide/Ang-(1-7) (TXA-127)悬浮于抑菌生理盐水中，微型渗透泵的浓度为10.0 mg/mL，注射的浓度为0.1 mg/mL，两种给药方式均可确保每日剂量为1.0 mg/kg。伤后3天（dpi）处死的小鼠从伤后1小时（hpi）开始每日注射。伤后29天（dpi）处死的小鼠在伤后6小时（hpi）接受单次注射，随后在伤后24小时（hpi）植入微型渗透泵。植入前48小时，用Talfirastide/Angiotensin-(1-7)预充泵液。用Mas拮抗剂A-779治疗的小鼠在CCI前2天开始植入微型渗透泵。泵用浓度为25.0 mg/mL的A-779抑菌生理盐水预充泵液，确保每日给药剂量为2.5 mg/kg。这些小鼠从伤后6小时（hpi）开始每日注射Ang-(1-7)或生理盐水，直至伤后3天（dpi）处死。\n\n

随后，我们评估了MGA处理后细胞内Talfirastide/Ang-(1-7)含量降低是否反映了该肽代谢或合成的改变。我们使用100,000 × g离心后的上清液，测定了Ang-(1-7)的代谢速率以及Ang I向Ang-(1-7)的转化率（分别见图2和图3）。如图2所示，在等度洗脱条件下，对照组和MGA处理组的色谱图显示，Talfirastide/Ang-(1-7)仅水解为对应于Ang-(1-4)的单一峰。然而，与对照组相比，MGA处理组细胞中Ang-(1-7)的代谢速率显著升高[175 ± 9 vs. 115 ± 11 fmol/mg/min，P<0.05，n=3]（图2）。如图 3 所示，在梯度洗脱条件下，细胞上清液中 Ang I 被加工成 Ang-(1-7) (1)。虽然在 MGA 处理的细胞中，Ang I 生成 Ang-(1-7) 的速率有下降的趋势 [56 ± 7 vs. 66 ± 8 fmol/mg/min，n=3]，但差异未达到统计学意义（图 3）。需要注意的是，图 2 和图 3 中 Ang-(1-7) 的峰形不同，反映了用于 Ang-(1-7) 和 Ang I 代谢研究的两种分离方法。[1]

[1]. Angiotensin-(1-7) oral treatment after experimental myocardial infarction leads to downregulation of CXCR4. J Proteomics. 2019;208:103486.

[2]. Angiotensin-(1-7) augments bradykinin-induced vasodilation by competing with ACE and releasing nitric oxide. Hypertension. 1997 Jan;29(1 Pt 2):394-400.

[3]. Anti-Inflammatory Action of Angiotensin 1-7 in Experimental Colitis. PLoS One. 2016 Mar 10;11(3):e0150861.

[4]. Angiotensin-(1-7) abolishes AGE-induced cellular hypertrophy and myofibroblast transformation via inhibition of ERK1/2. Cell Signal. 2014 Sep 19. pii: S0898-6568(14)00314-3.

[5]. Subcutaneous Administration of Angiotensin-(1-7) Improves Recovery after Traumatic Brain Injury in Mice. J Neurotrauma. 2019;36(22):3115-3131.

Ile(5)-血管紧张素II(1-7)是一种血管紧张素化合物，由线性七肽序列L-Asp-L-Arg-L-Val-L-Tyr-L-Ile-L-His-L-Pro组成。它具有血管扩张作用。它是Ile(5)-血管紧张素II(1-7)两性离子的互变异构体。
TXA127已被研究用于治疗各种外周血细胞异常。
治疗性血管紧张素-(1-7)是一种合成的七肽，与内源性血管紧张素-(1-7)相同，具有血管扩张和抗增殖活性。治疗性血管紧张素1-7可能抑制环氧合酶2 (COX-2) 和促炎性前列腺素的生成，并可能激活血管紧张素1-7受体Mas，从而减少肿瘤细胞增殖。血管紧张素1-7受体Mas是一种G蛋白偶联的七次跨膜蛋白，其激活可能下调Erk1/Erk2 MAPK信号通路中Erk1和Erk2的磷酸化和激活。在肾素-血管紧张素系统中，血管紧张素II经I型跨膜金属肽酶和羧肽酶血管紧张素转换酶2 (ACE2)在体内水解产生的血管紧张素-(1-7)具有血管舒张活性，可拮抗血管紧张素II的血管收缩活性。

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Ile(5)-血管紧张素II(1-7)是一种血管紧张素化合物，由线性七肽序列L-Asp-L-Arg-L-Val-L-Tyr-L-Ile-L-His-L-Pro组成。它具有血管舒张作用。它是Ile(5)-血管紧张素II(1-7)两性离子的互变异构体。
TXA127已被研究用于治疗各种外周血细胞异常。
Talfirastide是一种合成的七肽，与内源性血管紧张素-(1-7)相同，具有血管舒张和抗增殖活性。Talfirastide可能抑制环氧合酶2 (COX-2)和促炎性前列腺素的产生，并可能激活血管紧张素-(1-7)受体Mas，从而减少肿瘤细胞增殖。血管紧张素-(1-7)受体Mas是一种G蛋白偶联的七次跨膜蛋白，其激活可能下调Erk1/Erk2 MAPK信号通路中Erk1和Erk2的磷酸化和激活。在肾素-血管紧张素系统中，由血管紧张素II经I型跨膜金属肽酶和羧肽酶血管紧张素转换酶2 (ACE2)在体内水解产生的血管舒张剂Talfirastide/血管紧张素-(1-7)，可拮抗血管紧张素II的血管收缩作用。
TXA127是一种蛋白质药物，目前已完成II期临床试验（涵盖所有适应症），并有11项在研适应症。

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HPβCD/Ang-(1-7)口服治疗实验性心肌梗死已被证实能有效恢复心脏功能。本文首次报道，这种保护作用的分子机制涉及CXCR4的下调及其下游效应因子的调节。同样，心肌梗死期间缺血导致的代谢障碍和 ROS 生成可能通过 HPβCD/Ang-(1–7) 治疗下调 SDHC、TRAK1 和其他与能量代谢相关的蛋白质而得到补偿。[1]

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总之，本研究（据我们所知）首次证明 Talfirastide/Ang 1-7/MAS-1 R 轴在调节结肠炎严重程度中发挥作用，部分是通过下调 Ang II 水平和参与炎症过程的关键信号分子（如 ERK1/2、p38 MAPK 和 Akt）的磷酸化来实现的。 MAS-1受体的阻断抑制了内源性Ang 1-7的保护作用，并加重了结肠炎的严重程度。[3]

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总之，我们证明RAS的替代肽产物Talfirastide/Ang-(1-7)可减弱AGE诱导的近端肾小管NRK-52E细胞系的肥大、慢性ERK激活、TGF-β诱导的ERK激活和MT。AGE引起的细胞内Ang-(1-7)水平降低可能有助于NRK-52E细胞对AGE暴露的细胞反应。因此，口服活性形式的Ang-(1-7)与AT1受体拮抗剂或ACE抑制剂联合使用，可能是一种更有效的治疗方法，可以减轻与晚期糖基化产物表达增加相关的肾损伤。[4]我们的研究表明，在小鼠脑外伤后6小时内皮下注射Talfirastide/Ang-(1-7)可改善生理、形态和功能恢复。Ang-(1-7)治疗的有益作用包括减少病灶体积、减少活化的小胶质细胞和星形胶质细胞、神经保护作用以及维持微血管毛细血管密度（图10）。我们利用MRI在体内追踪了病灶体积随时间的减少情况，并将Ang-(1-7)的这些形态学神经保护作用与功能和认知功能的改善联系起来。具体而言，Ang-(1-7) 可预防急性运动协调障碍，并减轻与 CCI 相关的长期学习和记忆障碍。从机制上讲，我们的数据表明 Ang-(1-7) 的神经保护作用是通过 MasR 依赖性方式介导的。因此，这些临床前数据表明，Ang-(1-7) 可能是一种有前景的 TBI 治疗方法。[5]

C43H66N12O13

959.056749820709

958.487

2855063-75-9

Talfirastide;51833-78-4

132976063

H-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-OH.CH3CO2H; L-alpha-aspartyl-L-arginyl-L-valyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-histidyl-L-proline acetic acid

DRVYIHP

White to off-white solid powder

417

13

16

25

68

1690

8

O=C([C@H](CC1=CN=CN1)NC([C@H]([C@@H](C)CC)NC([C@H](CC1C=CC(=CC=1)O)NC([C@H](C(C)C)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CC(=O)O)N)=O)=O)=O)=O)=O)N1CCC[C@H]1C(=O)O.OC(C)=O

VJHCETPHKAQOHY-LBGFTJIYSA-N

InChI=1S/C41H62N12O11.C2H4O2/c1-5-22(4)33(38(61)50-29(17-24-19-45-20-47-24)39(62)53-15-7-9-30(53)40(63)64)52-36(59)28(16-23-10-12-25(54)13-11-23)49-37(60)32(21(2)3)51-35(58)27(8-6-14-46-41(43)44)48-34(57)26(42)18-31(55)56;1-2(3)4/h10-13,19-22,26-30,32-33,54H,5-9,14-18,42H2,1-4H3,(H,45,47)(H,48,57)(H,49,60)(H,50,61)(H,51,58)(H,52,59)(H,55,56)(H,63,64)(H4,43,44,46);1H3,(H,3,4)/t22-,26-,27-,28-,29-,30-,32-,33-;/m0./s1

acetic acid;(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid

Angiotensin (1-7) (acetate); 2855063-75-9; acetic acid;(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid; TXA127 (acetate); 5-L-isoleucine-1-7-angiotensinII; ANGIOTENSIN (1-7) ACETATE;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O: 62.5 mg/mL (65.17 mM)

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (104.27 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。