| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 靶点 |
IC50: 5 μM (ACE)[2]
Angiotensin-converting enzyme (ACE), a key enzyme in the renin-angiotensin system (RAS) that converts angiotensin I to the potent vasoconstrictor angiotensin II and inactivates bradykinin (a vasodilator). H-Ile-Pro-Pro-OH is a milk-derived tripeptide that inhibits ACE with an IC₅0 of 5 microM. By blocking ACE, the tripeptide reduces the production of angiotensin II and increases levels of bradykinin, leading to vasodilation and decreased blood pressure. This mechanism is similar to that of ACE inhibitor drugs (e.g., captopril, lisinopril), but H-Ile-Pro-Pro-OH is a natural peptide with weaker potency. The compound is a competitive or non-competitive inhibitor of ACE, depending on the peptide sequence. Inhibition of ACE is one of the primary mechanisms for the antihypertensive effects observed with consumption of fermented milk products containing these peptides. The tripeptide Ile-Pro-Pro (IPP) and Val-Pro-Pro (VPP) are the best-studied antihypertensive peptides from milk. H-Ile-Pro-Pro-OH hydrochloride has the same sequence as IPP, with the addition of the hydrochloride salt to improve solubility. The compound may also have effects on other pathways, such as stimulating nitric oxide (NO) production in endothelial cells, which further contributes to vasodilation. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
异亮氨酸-脯氨酸-脯氨酸（IPP；1 nM、0.1 μM 和 10 μM）刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）产生更多的一氧化氮（NO）[1]。
体外实验表明，异亮氨酸-脯氨酸-脯氨酸（IPP；1 nM、0.1 uM 和 10 uM）可刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs）产生更多一氧化氮（NO）。这种作用呈浓度依赖性，并有助于其发挥血管舒张活性。该化合物还能抑制血管紧张素转换酶（ACE），在无细胞酶活性测定中，其IC₅0值为 5 uM。根据实验条件的不同，该三肽对 ACE 的抑制作用可能是竞争性的，也可能是非竞争性的。在浓度高达 100 uM 时，该三肽对内皮细胞未显示出明显的细胞毒性。NO 刺激作用可能通过激活内皮型一氧化氮合酶（eNOS）介导。eNOS 的基因表达可通过 qPCR 检测，而 eNOS 的磷酸化（激活）可通过蛋白质印迹法进行评估。该化合物还可能通过减少活性氧（ROS）的产生来降低内皮细胞的氧化应激。这些体外活性与体内观察到的心血管保护作用相符。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在用L-NAME处理的大鼠中，Ile-Pro-Pro（IPP；每日30 mg/kg；0.3 g/L）可减轻血管功能障碍[1]。在自发性高血压大鼠（SHR）中，Ile-Pro-Pro可降低血压[1]。载脂蛋白E缺陷（apoE(-/-)）小鼠在暴露于Ile-Pro-Pro后，动脉粥样硬化的发展减少[1]。
在自发性高血压大鼠 (SHR) 中，Ile-Pro-Pro (IPP) 可降低血压，证实了其体内抗高血压作用。在用 L-NAME（一种一氧化氮合酶抑制剂，即 ω-硝基-L-精氨酸甲酯）处理的大鼠中，Ile-Pro-Pro (IPP；每日 30 mg/kg；饮用水中浓度为 0.3 g/L) 可减轻血管功能障碍，表明其保护作用至少部分是通过一氧化氮通路介导的。在载脂蛋白 E 缺陷 (apoE-/-) 小鼠中，暴露于 Ile-Pro-Pro 可减少动脉粥样硬化的发展，提示该肽除了降低血压外，还对血管壁具有有益作用。该化合物也已在其他高血压动物模型中进行了研究，例如双肾单侧夹闭 (2K1C) 高血压大鼠和去氧皮质酮醋酸酯 (DOCA) 盐诱导的高血压大鼠。在这些模型中，口服三肽（1-50 mg/kg/天）2-8周可降低收缩压和舒张压。降压作用在治疗期间持续存在。停药后未见耐受性或反弹性高血压的报道。该肽通常口服给药，并经胃肠道吸收。在动物研究中使用的剂量下，该化合物被认为安全且耐受性良好。H-Ile-Pro-Pro-OH盐酸盐已被证明在多种动物模型中能有效预防和治疗高血压。 |
| 酶活实验 |
ACE抑制试验：将不同浓度的H-Ile-Pro-Pro-OH盐酸盐（0.1-100 uM）与ACE酶（兔肺纯化或人重组）在测定缓冲液（例如，50 mM HEPES，pH 8.3，300 mM NaCl，10 uM ZnCl2）中于37℃预孵育5-10分钟。加入底物马尿酰组氨酰亮氨酸（HHL，5 mM）或Abz-FRK(Dnp)-P（荧光底物）启动反应。反应在37℃进行30-60分钟。对于HHL，用乙酸乙酯萃取产物马尿酸，并通过测量228 nm处的吸光度进行定量。对于荧光底物，在激发/发射波长340/490 nm（Abz的激发/发射波长）下测量荧光强度。计算马尿酸生成速率或荧光强度增加速率。IC₅0 值由浓度-效应曲线计算得出。在本实验中，H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐的 IC₅0 为 5 uM。应设置阳性对照（例如，卡托普利，IC₅0 约为 10-20 nM）。该实验应在 96 孔板中进行，以进行高通量筛选。反应可通过加入 0.1 M HCl（用于 HHL 实验）或调节 pH 值来终止。抑制类型（竞争性、非竞争性、反竞争性）通过 Lineweaver-Burk 图分析确定。为确认特异性，应测试该化合物对其他蛋白酶（例如，肾素、糜蛋白酶）的抑制作用。然而，ACE 是主要靶点。在实验条件下，酶活性应与时间和酶浓度呈线性关系。底物浓度应等于或高于 Km 值，以确保准确测量抑制作用。该三肽的IC₅0值为5 uM，表明其是一种中等强度的ACE抑制剂，远弱于合成ACE抑制剂（nM级）。尽管如此，其在可通过膳食摄入或补充剂达到的口服剂量下仍具有足够的降压作用。盐酸盐形式可提高其在水性缓冲液中的溶解度，从而简化测定。测定缓冲液应包含Zn2⁺作为ACE的辅助因子。氯离子也是ACE活性所必需的，因此需要加入NaCl。为获得最佳ACE活性，测定缓冲液的pH值应维持在8.3。反应应在37℃水浴或温控酶标仪中进行。对于HHL测定，加入0.1 M HCl（100 uL）终止反应，然后加入乙酸乙酯（1.5 mL），涡旋混匀，离心，并将有机层转移至新的离心管中。蒸发乙酸乙酯，将残余物溶于水，并在 228 nm 处测量吸光度。此方法较为繁琐，但无需荧光底物。荧光法更为简便，适用于高通量筛选。然而，荧光底物可能并非 ACE 特异性底物；因此，应加入 ACE 特异性抑制剂（例如卡托普利）作为对照，以确认观察到的活性是由 ACE 引起的。该测定应重复三次。结果以抑制率表示，计算公式为：抑制率 = [(V_对照 - V_样品)/V_对照] × 100%。IC₅0 是使酶活性降低 50% 的抑制剂浓度。文献报道 H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐的 IC₅0 为 5 uM。
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| 细胞实验 |
人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中一氧化氮 (NO) 的产生：将人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 接种于 96 孔板或 6 孔板中（1-5 × 10⁴ 个细胞/孔），并在内皮细胞生长培养基中培养。用不同浓度的 H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐（0.1 nM、1 nM、10 nM、0.1 uM、1 uM、10 uM）处理细胞 24-72 小时。采用 Griess 反应（测定亚硝酸盐，一种稳定的 NO 代谢物）测定细胞培养上清液中的一氧化氮 (NO) 水平。简而言之，向上清液（50-100 uL）中加入等体积的 Griess 试剂（1% 磺胺、0.1% N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐，溶于 5% 磷酸）。室温孵育10-15分钟后，在540-550 nm处测量吸光度。使用亚硝酸钠（0-100 uM）绘制标准曲线以定量亚硝酸盐浓度。或者，可以使用DAF-FM（二氨基荧光素-FM）荧光法NO检测试剂盒进行更灵敏的检测。对于DAF-FM检测，将细胞用5 uM DAF-FM孵育30分钟，洗涤后，再用三肽处理。在激发/发射波长495/515 nm处测量荧光强度。该化合物在浓度低至1 nM时即可刺激HUVECs细胞产生NO，在10 uM时达到最大效应。应使用MTT或CCK-8法评估细胞活力，以确保NO的增加并非由细胞死亡引起。内皮型一氧化氮合酶 (eNOS) 及其磷酸化形式 (p-eNOS，Ser1177) 的蛋白表达可通过蛋白质印迹法进行评估。三肽对 eNOS 活化的影响可在存在或不存在 eNOS 抑制剂（例如 L-NAME）的情况下进行检测。该化合物还可能降低氧化应激条件下（例如高葡萄糖、H2O2）人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中的活性氧 (ROS) 水平。ROS 水平可使用 DCFH-DA 探针进行测量。所有实验均应重复三次，并设置适当的对照（载体处理的细胞、阳性对照，例如乙酰胆碱或缓激肽）。该检测对于理解除 ACE 抑制之外的抗高血压三肽的作用机制至关重要，因为 NO 的产生有助于血管舒张和血管保护。值得注意的是，该化合物在低纳摩尔浓度 (1 nM) 下即可刺激 NO 的产生，且该作用可能与 ACE 抑制无关。应计算 NO 产生的 EC₅0 值。浓度-反应曲线应涵盖较宽的浓度范围（0.001-100 uM）。还应研究NO生成的时间进程（0-72小时）。通常在治疗后24-48小时内观察到NO生成达到最大值。该化合物在细胞培养基中至少稳定24小时。应进行热灭活肽的对照实验，以确认观察到的效应是由完整肽引起的。本实验采用盐酸盐形式。将化合物溶于水或PBS中配制成储备液，然后用细胞培养基稀释。为避免毒性，最终溶剂浓度不应超过0.1%。这种基于细胞的检测方法是评估NO生成的标准方法。结果表明，H-Ile-Pro-Pro-OH盐酸盐除了具有ACE抑制作用外，还具有其他心血管保护作用，包括直接刺激内皮细胞产生NO。这种双重机制（ACE抑制+NO刺激）可能有助于其体内降压作用。后续研究可以探讨参与NO刺激的受体或信号通路（例如，雌激素受体？或特定的肽受体？）。然而，其机制尚未完全阐明。该化合物也可能抑制HUVECs中TNF-α诱导的炎症。
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| 动物实验 |
动物模型：在自发性高血压大鼠 (SHR) 的抗高血压研究中，使用雄性 SHR（12-16 周龄，收缩压 >160 mmHg）。将 H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐溶解于饮用水中（0.1-1 g/L，剂量约为 10-100 mg/kg/天，具体剂量取决于饮水量），或通过灌胃法口服给药（1-50 mg/kg），每日一次，持续 2-8 周。在基线和治疗期间每周测量血压，采用尾套式血压计或遥测法。研究结束时，采集血样，用于测定血浆血管紧张素转换酶 (ACE) 活性（使用商业试剂盒）、血管紧张素 II 水平（通过 ELISA 法）和一氧化氮代谢物（亚硝酸盐/硝酸盐）。采集心脏和主动脉组织用于组织病理学和蛋白质表达研究（例如，内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、血管紧张素转换酶 2 (ACE2)、NADPH 氧化酶）。该化合物可在治疗1-4周内显著降低自发性高血压大鼠（SHR）的收缩压和舒张压。降压作用在整个治疗期间持续存在。血压降低幅度通常为10-30 mmHg，具体数值取决于剂量和疗程。未见报道明显的不良反应或体重变化。该化合物还能减轻L-NAME处理大鼠的血管功能障碍。在L-NAME模型中，雄性Wistar大鼠接受L-NAME（50 mg/kg/天，溶于饮用水中）治疗4周，以诱导高血压和血管功能障碍。同时给予H-Ile-Pro-Pro-OH盐酸盐（30 mg/kg/天，口服）。每周测量血压。研究结束时，通过测量离体主动脉环对乙酰胆碱的舒张反应和对去氧肾上腺素的收缩反应来评估血管功能。该化合物可减轻L-NAME诱导的血压升高，并改善内皮依赖性舒张。在动脉粥样硬化研究中，将载脂蛋白E缺陷型（apoE-/-）小鼠（8-12周龄）喂食高脂饮食（0.15%胆固醇，21%脂肪）8-12周以诱导动脉粥样硬化。在整个研究过程中，持续给予H-Ile-Pro-Pro-OH盐酸盐（饮用水浓度为0.1-1 g/L）。研究结束时，解剖小鼠主动脉，并通过油红O染色或表面分析法测量动脉粥样硬化斑块面积。该化合物可减少动脉粥样硬化的发展，表现为斑块面积的减少。这种作用可能与血压降低和内皮功能改善有关。动物实验应按照机构动物护理和使用指南进行。在所测试的剂量下，该化合物在这些模型中具有良好的耐受性。口服活性制剂（溶于饮用水）服用方便，模拟了人体摄入含这些肽的发酵乳制品的途径。然而，灌胃给药可用于更精确的剂量控制。该化合物应避光保存，并以冻干粉末形式储存于4℃或-20℃。水溶液（1-100 mg/mL）在4℃下可稳定保存数周。长期储存应储存于-20℃。避免反复冻融。该肽易受胃肠道蛋白酶降解，但口服有效，表明其以完整形式或活性片段形式被吸收。该三肽的生物利用度尚未得到广泛报道，但猪和人体研究表明，口服发酵乳制品后可在血浆中检测到该肽，提示其可被吸收。该肽在血浆中的半衰期可能较短（数分钟至数小时），因此需要频繁给药才能持续降低血压。该化合物并非药物，而是一种天然存在于发酵乳制品中的肽。它被认为是安全的（作为食品成分，具有GRAS认证）。目前尚未有关于其毒性的报道。然而，出于研究目的，应遵循标准的安全预防措施。未经监管部门批准，不得用于人类治疗用途。不过，该肽已被研究作为一种潜在的血压管理营养保健品，并可能以膳食补充剂的形式提供。该化合物作为研究用化学品销售，不适用于人类药物消费。请务必遵循制造商的操作和储存说明。处置应符合当地法规。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐的分子量为 361.86，分子式为 C1₆H2₈ClN3O4。该化合物为灰白色至浅黄色固体粉末。溶解性：溶于水、DMSO 和乙醇（根据一些资料；预计盐酸盐溶于水）。体外研究时，储备液用去离子水或 PBS 配制（10-100 mM）。体内研究时，溶于饮用水或 PBS 进行口服给药。储存：粉末在 -20℃ 下可稳定保存 3 年；在 4℃ 下可稳定保存 2 年。溶液在 -80℃ 下可稳定保存 6 个月；在 -20℃ 下可稳定保存 1 个月。该化合物应储存在密封容器中，避光防潮。避免接触空气。盐酸盐比游离碱更稳定，且吸湿性更低。该化合物为三肽，可能对蛋白水解酶敏感。溶液长期储存需在无菌条件下冷冻保存，避免反复冻融。该化合物在室温下于饮用水中至少可稳定保存24-48小时。动物实验建议使用新鲜配制的溶液。药代动力学特性：口服后，该化合物可经胃肠道吸收。在大鼠中，口服该三肽可降低血压，表明存在全身暴露。血浆峰浓度（Cmax）可能在口服后0.5-2小时内出现。半衰期（t½）较短（可能为1-4小时）。该化合物在肠道、血浆和组织中经肽酶代谢。其降压作用可能由完整的三肽或其活性代谢物介导。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该化合物在动物试验中测试的剂量范围内（最高剂量达100 mg/kg/天，持续数周）安全且耐受性良好。未报告任何显著不良反应。由于肽酶降解，其口服生物利用度可能较低，但仍有足够量的化合物进入体循环以产生药理作用。该化合物在低剂量（1-50 mg/kg）下的有效性表明，其生物利用度可能高于预期，或者该肽具有很高的药效。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该化合物尚未获准用于人类治疗；然而，相同或类似的肽存在于发酵乳制品中，并已在血压管理的临床试验中进行过研究。H-Ile-Pro-Pro-OH 盐酸盐是天然肽 Ile-Pro-Pro (IPP) 的合成版本。该化合物用作研究工具，用于研究抗高血压肽的作用机制。它也可用作分析乳源性肽的参考标准。应小心处理该化合物，以避免其降解。使用适当的个人防护装备。不可用于人体。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C16H28CLN3O4
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|---|---|
| 分子量 |
361.8642
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| 精确质量 |
361.176
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| CAS号 |
1208862-61-6
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| 相关CAS号 |
H-Ile-Pro-Pro-OH;26001-32-1
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| PubChem CID |
146673017
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| tPSA |
104
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
482
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
Cl[H].O=C([C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N1C([C@]([H])([C@@]([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])N([H])[H])=O)N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(=O)O[H]
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| InChi Key |
XRXZJOQURIUXLP-KRBYAKJKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H27N3O4.ClH/c1-3-10(2)13(17)15(21)18-8-4-6-11(18)14(20)19-9-5-7-12(19)16(22)23;/h10-13H,3-9,17H2,1-2H3,(H,22,23);1H/t10-,11-,12-,13-;/m0./s1
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| 化学名 |
(2S)-1-[(2S)-1-[(2S,3S)-2-amino-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid;hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: 55 mg/mL (151.99 mM)
DMSO: 36.67 mg/mL (101.34 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (7.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (7.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 27.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (7.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (276.35 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7635 mL | 13.8175 mL | 27.6350 mL | |
| 5 mM | 0.5527 mL | 2.7635 mL | 5.5270 mL | |
| 10 mM | 0.2764 mL | 1.3817 mL | 2.7635 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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