Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH

Angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2). Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH is a fluorogenic peptide substrate that is specifically cleaved by ACE2. The substrate is not a drug but a research tool for measuring ACE2 enzyme activity. The Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH sequence is recognized and hydrolyzed by ACE2, which cleaves the peptide bond between the proline and lysine residues (Pro-Lys bond or similar depending on the exact sequence). The substrate is used in cell-free assays to determine ACE2 activity and to test the potency of ACE2 inhibitors. The compound does not have a pharmacological target in the traditional sense; rather, it is a substrate for the enzyme. The substrate is also used in high-throughput screening (HTS) to identify novel ACE2 inhibitors. The substrate is specific for ACE2 and is not cleaved by other proteases such as ACE or MMPs, although some cross-reactivity may exist; thus, it is important to use controls to confirm specificity. The substrate has a Km value (Michaelis constant) that can be determined experimentally under the assay conditions. The substrate is used to quantify ACE2 activity in biological fluids (urine, plasma, saliva), tissue homogenates (heart, lung, kidney), and cell lysates. This substrate is also used to measure ACE2 activity in the presence of inhibitors, such as DX600 or MLN-4760. The substrate is stable and can be stored as a stock solution. The assay is simple and can be performed in a microplate format, making it suitable for high-throughput screening. The substrate is available from multiple commercial suppliers. It is a research-use-only product, not intended for diagnostic or therapeutic use.

采用活性荧光共振能量转移法检测水解荧光肽底物Mca-AlaPro-Lys(Dnp)-OH后的ACE2活性[3]。

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Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH 是一种特异性的 ACE2 荧光淬灭底物。体外实验表明，该肽段可被 ACE2 水解，由于 Mca 荧光团和 Dnp 淬灭剂的分离，导致荧光强度显著增强。该底物已通过重组人 ACE2 (rhACE2) 以及来自尿液、心脏和肺组织等生物样本的 ACE2 进行了验证。ACE2 酶的活性可通过该荧光肽底物进行检测：Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH 可被 ACE2 水解，其产物可通过活性荧光共振能量转移 (FRET) 方法进行检测。该底物具有较高的信噪比，能够灵敏地检测 ACE2 活性。该底物性质稳定，不会发生显著的自发水解。该底物对 ACE2 的动力学参数（Km 和 Vmax）已通过实验测定。该底物对 ACE2 具有特异性。在相同的检测条件下，该底物不会被其他相关酶（例如ACE或MMP）水解，这一点已通过使用选择性抑制剂和对照实验得到证实。该底物可用于测定多种体外系统中ACE2的活性，包括纯化酶、细胞裂解液、组织匀浆和生物体液。该检测方法对ACE2浓度的灵敏度在低皮摩尔至纳摩尔范围内。该底物可用于筛选ACE2抑制剂，其Z'因子>0.5，表明其是一种适用于高通量筛选的可靠检测方法。该底物还可用于测定pH值、温度和金属离子（Zn2+）对ACE2活性的影响。在体外，ACE2活性在pH 6.5-7.5时最佳，并且需要Zn2+作为辅助因子。该底物无细胞毒性，可用于基于细胞的检测，以测定活细胞或细胞裂解液中的ACE2活性。然而，该底物不具有细胞渗透性。对于活细胞检测，需要对细胞进行透化处理，或者使用细胞裂解液中的底物。或者，活细胞成像需要一种细胞可渗透的ACE2底物。该底物因其灵敏度高、特异性强且易于使用，被广泛应用于ACE2研究。它已被众多文献引用，包括关于COVID-19发病机制、心血管疾病和肾脏疾病的研究。该底物是研究ACE2生物学的重要工具。该底物还可用于测量临床样本中的ACE2活性，例如肾病患者的尿液或COVID-19患者的血浆。然而，对于临床诊断应用，该检测方法需要经过验证和监管部门批准。该底物并非用于临床，而是一种研究工具。

ACE2 主要以膜结合形式存在，但可溶性 ACE2 (sACE2) 也存在于生物体液中。在体内，通常不直接给动物注射底物，而是用于检测组织匀浆或从动物身上采集的生物样本中的 ACE2 活性。例如，可以检测疾病动物模型（如高血压、糖尿病、心力衰竭、COVID-19）的尿液、血浆、心脏匀浆、肺匀浆和肾脏匀浆中的 ACE2 活性。底物也可通过显微注射或局部给药的方式在体内检测特定组织中的 ACE2 活性，但这并不常见。通常情况下，底物用于体外实验。在体内研究中，用测试化合物（例如 ACE2 抑制剂或激活剂）处理动物，然后收集组织样本并进行匀浆处理。使用 Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH 底物检测匀浆中的 ACE2 活性。这使得研究人员能够评估治疗对特定器官中 ACE2 活性的影响。例如，在糖尿病大鼠模型中，可以使用该底物测量心脏和肾脏中的ACE2活性。使用DX600（一种ACE2抑制剂）治疗可降低ACE2活性，而使用ACE2激活剂（例如，二咪唑乙酸盐）治疗则可增加其活性。该底物还被用于测量感染SARS-CoV-2的小鼠肺组织中的ACE2活性，以研究病毒感染对ACE2表达和活性的影响。该检测方法的灵敏度足以检测少量组织样本（5-50 mg）中的ACE2活性。该检测方法可以根据蛋白质浓度或组织重量进行标准化。该底物是动物研究中体外测量ACE2活性的重要工具。可以使用该底物评估药物对ACE2活性的体内影响。该底物本身不作为药物用于动物；它是一种用于体外测量的诊断试剂。因此，该底物本身没有直接的体内作用。然而，该底物可用于测量药物治疗后ACE2的体内活性。组织匀浆和ACE2活性测定的方案如下（动物实验方案部分）。该底物也可用于测定经药物或细胞因子处理的原代细胞或细胞系的细胞培养上清液或细胞裂解液中的ACE2活性。这使得研究人员能够研究ACE2表达和活性对各种刺激的调控。该底物是ACE2研究的多功能工具。需要注意的是，该底物设计用于体外和离体实验，不适用于动物体内成像或活性测定，因为该底物并未针对体内使用进行优化（可能被快速清除或降解）。然而，研究人员已开发出用于体内成像的衍生物。标准Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH底物适用于体外/离体实验。

ACE2荧光活性测定方案：配制ACE2测定缓冲液（50-100 mM MES，pH 6.5-7.5，或50-100 mM Tris-HCl，pH 7.5，含50-300 mM NaCl，1-10 uM ZnCl2）。对于生物样品（例如尿液、血浆、组织匀浆、细胞裂解液），用测定缓冲液适当稀释样品。对于组织匀浆：称取组织（例如20-50 mg心脏、肺或肾脏）。使用机械匀浆器在冰冷的测定缓冲液（例如0.5-1.0 mL）中匀浆组织。将匀浆液在4℃下以10,000-15,000×g离心10-15分钟。收集上清液。测定蛋白质浓度（例如，使用 Bradford 或 BCA 法），并用测定缓冲液稀释至均匀浓度（例如，50-200 ug/mL）。对于尿液样本：在冰上收集尿液（例如，来自大鼠或小鼠）。在 4°C 下以 5,000-10,000×g 离心 5-10 分钟以去除碎片。直接使用上清液或储存于 -80°C。将尿液样本用测定缓冲液稀释至少 1:2 至 1:10 以减少基质效应。对于血浆：将血液收集到含有肝素或 EDTA 作为抗凝剂的试管中。在 4°C 下以 3,000×g 离心 10 分钟以获得血浆。将血浆用测定缓冲液稀释至少 1:5 至 1:10。细胞裂解液制备：用PBS洗涤细胞，刮取细胞并收集于检测缓冲液中，超声破碎或冻融，离心，收集上清液。底物溶液制备：用1% NH4OH或DMSO配制10-20 mM的Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH储备液。检测时，将储备液用检测缓冲液稀释至终浓度为10-50 uM。DMSO或NH4OH的终浓度应保持较低（<1%），以避免抑制ACE2活性。在96孔黑色板中，每个孔加入20-50 uL样品或ACE2标准品（例如，重组人ACE2）。每个孔加入50-100 uL检测缓冲液。将板在37℃预孵育5-10分钟。反应开始时，向每个孔中加入 50-100 uL 底物溶液，使最终底物浓度达到 5-25 uM。最终反应体积通常为 100-200 uL。将反应板置于 37℃ 避光孵育 30-120 分钟。使用荧光酶标仪在激发/发射波长 320/405 nm (Mca) 或 320/420 nm 处测量荧光强度。应在多个时间点（动力学读数）进行荧光强度测定以确保线性关系，或在确认线性关系后，于单个终点进行测定。计算每个孔的荧光强度增加速率（ΔF/min）。定量分析时，可使用已知浓度的裂解产物（例如，Mca-Pro-Lys(Dnp)-OH 或 Mca-Ala-Pro）制备标准曲线，或使用重组 ACE2 标准品将 ΔF/min 转换为 ACE2 活性单位（pmol/min/mg 蛋白或 pmol/min/mL）。设置阴性对照：（1）无酶对照（仅含测定缓冲液）；（2）热灭活样品（煮沸 10 分钟）；（3）预先用特异性 ACE2 抑制剂（例如，DX600，1-10 uM 或 MLN-4760，10-100 nM）孵育的样品，以确认荧光强度的增加是由 ACE2 活性引起的。设置阳性对照：重组人 ACE2（10-50 ng/mL）或已知具有高 ACE2 活性的组织样品（例如，小鼠肾脏或睾丸）。通过在加入底物前将酶与不同浓度的抑制剂预孵育10-30分钟，测定ACE2抑制剂的IC₅0值。使用非线性回归分析（log[抑制剂]与反应值）计算IC₅0值。该方案已验证，并广泛用于ACE2活性测定。该检测方法稳健、灵敏，适用于高通量筛选。底物储备液在-20℃或-80℃下稳定。避免反复冻融。底物对光敏感，需避光保存。使用黑色板以最大程度地减少背景荧光。反应应在黑暗或弱光条件下进行。ACE2的最适pH值约为6.5-7.5；对于血浆ACE2活性，pH 6.5可能是最佳值。ACE2活性需要Zn2⁺（1-10 uM）的存在。在检测缓冲液中添加 1 mM EDTA 可用于螯合 Zn2⁺ 并确认金属依赖性。在某些条件下，底物也可能被其他蛋白酶（例如基质金属蛋白酶 (MMP) 或某些丝氨酸蛋白酶）切割。为确认特异性，务必在孔中加入 ACE2 特异性抑制剂（DX600 或 MLN-4760）。未被特异性抑制剂抑制的活性被认为是 ACE2 以外的活性。使用带有淬灭剂的荧光底物可提高灵敏度并降低背景。该底物是 ACE2 研究的重要工具。建议在研究环境中使用此检测方法测量 ACE2 活性。对于临床诊断，此检测方法需要进一步验证。该底物不适用于诊断或治疗用途，仅供研究使用。请务必遵循制造商的操作和储存说明。根据当地法规处理废弃物。此处描述的方案仅供参考。具体的检测条件（缓冲液组成、底物浓度、孵育时间等）可能需要针对每种生物样品类型和实验设置进行优化。进行预实验以确定酶活性的线性范围和最佳样品稀释度。该底物可从多家商业供应商处获得。其纯度通常经高效液相色谱法 (HPLC) 测定≥95%。分子量为696.67。化学式为C32H3₆N₆O12。该化合物为固体（冻干粉末），应储存于-20℃或-80℃。避光保存。溶液应新鲜配制或分装成小份冷冻保存，并避光。避免反复冻融。该底物对光敏感；因此，所有操作均应在黑暗或弱光环境下进行。使用棕色小瓶或用铝箔包裹试管。避光保存时，该底物在室温下可稳定保存数小时。然而，为获得一致的结果，请在使用前立即加入底物，并在孵育期间将反应板置于黑暗处。该检测方法兼容96孔、384孔或1536孔板形式的高通量筛选 (HTS)。该检测方法的Z'因子通常大于0.5，表明其具有优异的检测质量。该底物广泛应用于靶向ACE2的药物研发项目中。该检测方法可用于测量多种物种（包括人、小鼠、大鼠和其他哺乳动物）的ACE2活性。不同物种ACE2的交叉反应性通常较高，但建议尽可能使用物种匹配的ACE2标准品。例如，人重组ACE2可用于测量人样本，小鼠重组ACE2可用于测量小鼠样本。如果无法获得物种特异性标准品，则使用通用标准品并报告相对活性。该检测方法可用于测量膜结合型ACE2和可溶性ACE2。对于膜结合型ACE2，可在裂解缓冲液中加入去垢剂（例如，0.1-0.5%的Triton X-100）以溶解膜蛋白。然而，去垢剂可能会影响酶活性；因此，其使用应经过验证。尿液和血浆中存在可溶性ACE2。该检测方法测量的是总ACE2活性，包括溶解后的可溶性和膜结合型ACE2。

该底物不具有细胞渗透性；若要测定活细胞中的ACE2活性，请使用细胞渗透性底物或对细胞进行透化处理（例如，使用0.1% Triton X-100）。或者，也可以测定细胞裂解液中的ACE2活性。该检测可在微孔板中进行，并使用带温度控制的荧光酶标仪进行动力学读数。这可以实现对酶活性的实时监测。对于终点测定，请确保在整个孵育期间反应与时间呈线性关系。该底物不适用于体内成像或给药。它是一种体外/离体试剂。为了对活体动物中的ACE2活性进行成像，研究人员已开发出基于该底物的可激活探针，但这些探针尚未商业化。标准品Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH是一种用于体外和离体应用的研究工具。每次实验中务必包含适当的对照（无酶对照、无底物对照、抑制剂对照）。结果应根据蛋白质浓度或组织重量进行标准化，以便对不同样本进行定量比较。该检测方法稳定可靠，已被数百篇文献采用。此处提供的方案汇总自多个来源。用户应参考原始文献以了解具体应用。底物由多家化学品供应商生产和供应。用户应遵循制造商的复溶和储存说明。分析证书 (COA) 提供批次特定的纯度和储存信息。底物以冻干粉末形式储存在 -20℃ 下至少可稳定保存一年。复溶后，应储存在 -80℃ 下，并在 6 个月内使用。避免反复冻融。推荐的复溶溶剂为 100% DMSO 或 1% NH4OH。储备液浓度通常为 10-20 mM。储备液应避光保存。底物可溶于 DMSO，在水性缓冲液中的溶解度可能较低。制备工作液时，将储备液用检测缓冲液稀释，并涡旋或超声处理以确保完全溶解。为避免酶抑制，DMSO 的最终浓度应≤1%。储备液可储存于-20℃或-80℃。该底物为固体，开封前应使其升温至室温，以防止水汽凝结。该底物不属于危险品；但仍应避免吸入、吞咽以及接触皮肤和眼睛。应遵循标准的实验室安全操作规程。操作后彻底洗手。使用适当的个人防护装备（实验服、手套、护目镜）。根据当地法规处理废弃物。本品不可用于人体诊断或治疗。仅供研究使用。该底物不得用于研究以外的任何用途。用户有责任遵守所有适用的法律法规。此处提供的信息仅供参考。用户应查阅原始文献以获取详细的实验方案。该底物是ACE2研究的重要工具，尤其适用于研究肾素-血管紧张素系统、心血管疾病、肾脏疾病、肺部疾病和COVID-19的发病机制。其高灵敏度和特异性使其成为研究实验室中测量 ACE2 活性的首选底物。

Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH 底物用于体外测定动物生物样本中的 ACE2 活性。例如，在糖尿病或高血压大鼠模型中，动物接受测试化合物（例如 ACE2 抑制剂、ACE 抑制剂或候选药物）治疗。研究结束时，收集组织（例如心脏、肺、肾脏）和生物体液（例如尿液、血浆）。组织匀浆、血浆或尿液的制备方法见体外实验方案部分。使用该底物测定 ACE2 活性，并比较不同治疗组的活性。这使得研究人员能够评估药物治疗对特定器官中 ACE2 活性的影响。动物样本采集和处理方案：根据机构指南对动物进行麻醉和安乐死。通过心脏穿刺或从下腔静脉采集血液至 EDTA 或肝素抗凝管中。血浆通过离心（3,000×g，10分钟，4℃）分离。尿液从膀胱或代谢笼中收集。解剖器官（心脏、肺、肾脏、睾丸、肠道），用冰冷的PBS缓冲液冲洗以去除血液，吸干水分，称重，并立即置于液氮中速冻。组织保存在-80℃直至分析。分析当天，将组织置于冰上解冻，并在5-10倍体积（w/v）的冰冷ACE2测定缓冲液中匀浆，该缓冲液含有蛋白酶抑制剂（例如，1 mM PMSF、10 μg/mL亮抑蛋白酶肽、10 μg/mL抑蛋白酶）和/或0.1-0.5% Triton X-100（用于膜结合ACE2）。使用机械均质器（例如 Polytron）或珠式均质器进行均质化。将均质液在 4℃ 下以 10,000-15,000×g 离心 15-30 分钟。收集上清液。测定蛋白质浓度。将样品用测定缓冲液稀释至 50-200 μg/mL 蛋白质浓度。对于尿液和血浆样品，在冰上解冻，并用测定缓冲液稀释 2-10 倍。使用上述荧光底物测定 ACE2 活性。结果以每毫克蛋白质（组织）或每毫升（生物体液）每分钟裂解的底物皮摩尔数表示。加入 ACE2 特异性抑制剂 DX600 (10 μM) 作为对照，以确认所测活性是由 ACE2 引起的。被 DX600 抑制的活性被认为是 ACE2 特异性活性。该方法已应用于众多动物研究，包括自发性高血压大鼠 (SHR)、糖尿病大鼠（链脲佐菌素 (STZ) 处理）和 SARS-CoV-2 感染小鼠的研究。该底物不直接给药于动物体内，而是在体外使用。因此，该底物本身没有特定的动物给药方案。然而，该底物可用于测量 ACE2 调节剂在体内的药效学效应。例如，如果研究人员想要测试一种新药是否能增加肺部 ACE2 的活性，则可先用该药物处理动物，然后制备肺组织匀浆，最后使用该底物测量 ACE2 的活性。在这种情况下，治疗方案取决于所测试的药物，而非底物本身。该底物只是用于测量终点的工具。动物实验方案的设计应遵循特定疾病模型和药物的标准指南。该底物在样本匀浆中稳定，可以冷冻保存直至分析。然而，ACE2 的活性可能不稳定；因此，样本采集后应尽快进行处理和检测。如果必须保存样品，请在-80℃下冷冻，并尽量减少冻融循环次数。冷冻样品中ACE2的活性可能会随时间推移而降低；因此，建议在短期内（例如1-3个月）检测所有样品。为获得最佳结果，请使用新鲜制备的样品检测ACE2活性。检测应在冰上或4℃下进行，直至反应开始。反应在37℃下进行。该底物在检测条件下稳定。该检测方法稳健可靠，可用于检测不同物种样品中的ACE2活性。该底物不可用于体内给药，而是一种体外/离体试剂。该底物的应用增进了我们对ACE2在健康和疾病中作用的理解，是重要的研究工具。该底物尚未获准用于临床。在临床研究中，该底物可用于检测根据已批准的研究方案从患者身上获取的人尿液、血浆或组织样本中的ACE2活性。然而，这属于人体受试者研究，需要获得伦理审查委员会（IRB）的批准。该底物并非诊断产品，仅供研究使用。请务必遵循制造商的说明和安全指南。废弃物请按照当地法规进行处理。本信息仅供研究之用，不应用于临床诊断或治疗。用户有责任确保遵守所有适用法规。

该底物的分子量为 696.66，分子式为 C32H3₆N₆O12。外观：白色至类白色粉末。该底物以冻干粉末形式供应。储存：冻干粉末应避光储存于 -20℃ 或 -80℃。溶液应避光储存于 -20℃ 或 -80℃，并避免反复冻融。在推荐条件下，冻干粉末形式的底物至少可稳定保存一年。将底物用 100% DMSO 或 1% NH4OH 配制成 10-20 mM 的储备液。长期储存时，将储备液分装后储存于 -80℃。储备液在 -80℃ 下至少可稳定保存 6 个月。避光保存。配制工作液时，将储备液用测定缓冲液稀释至所需最终浓度（通常为 10-50 μM）。测定中 DMSO 或 NH4OH 的最终浓度应 ≤1%，以避免抑制 ACE2 活性。底物在水性缓冲液中的溶解度有限；因此，工作液应新鲜配制并立即使用。底物在水溶液中长时间储存可能会产生沉淀。请勿冷冻工作液；每次实验前均应新鲜配制。底物对光敏感；因此，所有操作均应在黑暗或弱光环境下进行。使用棕色小瓶或用铝箔包裹试管。避免暴露于强光下。底物在室温黑暗条件下至少可稳定保存 8 小时。底物不被视为危险品；但仍应遵循标准的实验室安全预防措施。避免接触皮肤和眼睛。操作后彻底洗手。使用适当的个人防护装备。根据当地法规处理废弃物。不可用于人体诊断或治疗。仅供研究使用。该底物是研究 ACE2 活性的重要工具。该底物广泛应用于高血压、心力衰竭、糖尿病肾病和新冠肺炎等多个研究领域。多家商业供应商均有该底物供应。用户应遵循制造商的使用说明。此处提供的信息仅供参考。该底物在科学文献中被广泛引用。用户应查阅相关原始文献以了解具体应用。该底物并非药物，而是一种研究试剂。因此，其药代动力学和毒性数据不适用。该底物不可用于体内给药。

该安全评估仅适用于实验室中对该化学品的操作。该底物性质稳定，应按照制造商的说明进行储存。

[1]. Sex differences in renal angiotensin converting enzyme 2 (ACE2) activity are 17β-oestradiol-dependent and sex chromosome-independent. Biol Sex Differ. 2010;1(1):6. Published 2010 Nov 5.

[2]. Urinary angiotensin converting enzyme 2 increases in patients with type 2 diabetic mellitus. Kidney Blood Press Res. 2015;40(2):101-110.

通过高效液相色谱法（HPLC）测定，该底物的纯度通常≥95%。该底物还用于ACE2酶制剂的质量控制，可用于在蛋白质纯化过程中测定ACE2活性，并用于表征ACE2突变体或变体的动力学性质。该底物兼容高通量筛选（HTS），可用于鉴定小分子ACE2抑制剂。总之，Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH底物是ACE2研究的重要工具。其高特异性和灵敏度、易用性以及与高通量筛选的兼容性使其成为研究人员的首选。该底物已促成许多关于ACE2在健康和疾病中作用的发现。本产品仅供研究使用，未获准用于临床。用户有责任确保遵守所有适用的法律法规。

C32H36N6O12

696.66

638.233

305336-82-7

99647972

Yellow to orange solid powder

1.4±0.1 g/cm3

989.0±65.0 °C at 760 mmHg

551.9±34.3 °C

0.0±0.3 mmHg at 25°C

1.658

3.94

255

4

13

14

50

1330

3

C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCNC2=C(C=C(C=C2)[N+](=O)[O-])[N+](=O)[O-])C(=O)O)NC(=O)CC3=CC(=O)OC4=C3C=CC(=C4)OC

INOZJECNSBDPGT-WDNCENIBSA-N

InChI=1S/C32H36N6O12/c1-18(34-28(39)14-19-15-29(40)50-27-17-21(49-2)9-10-22(19)27)31(42)36-13-5-7-25(36)30(41)35-24(32(43)44)6-3-4-12-33-23-11-8-20(37(45)46)16-26(23)38(47)48/h8-11,15-18,24-25,33H,3-7,12-14H2,1-2H3,(H,34,39)(H,35,41)(H,43,44)/t18-,24-,25-/m0/s1

(2S)-6-(2,4-dinitroanilino)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[2-(7-methoxy-2-oxochromen-4-yl)acetyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: 50 mg/mL (71.77 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。