5-FAM-Alkyne

目录号: V73311 纯度: ≥98%
5-FAM-Alkyne 是一种选择性且灵敏的荧光生物标记物,可用于标记碱性磷酸酶 (ALP)。
5-FAM-Alkyne CAS号: 510758-19-7
产品类别: Phosphatase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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产品描述
5-FAM-Alkyne 是一种选择性高、灵敏度高的荧光生物标记物,可用于标记碱性磷酸酶 (ALP)。5-FAM-Alkyne 是一种点击化学试剂。它含有炔基,可与带有叠氮基团的化合物发生 CuAAc 催化的叠氮-炔环加成反应。
5-FAM-Alkyne 是一种基于呫吨的绿色荧光探针,属于 5-羧基荧光素 (5-FAM) 家族,其末端带有炔基。该化合物可用作碱性磷酸酶 (ALP) 的高选择性、高灵敏度荧光生物传感器。炔基使其能够进行铜催化的叠氮-炔环加成反应(点击化学),从而应用于生物偶联。5-FAM-Alkyne 广泛应用于生物化学研究中,用于酶活性检测、蛋白质标记和荧光分析。
生物活性&实验参考方法
靶点
5-FAM-Alkyne is designed to target and detect alkaline phosphatase (ALP) activity. The compound itself is not an enzyme inhibitor but rather a fluorescent substrate or probe. Upon dephosphorylation by ALP, the probe releases a fluorescent signal that can be quantitatively measured. The alkyne functionality allows for covalent attachment to azide-modified biomolecules via click chemistry, expanding its utility for labeling and detection applications in complex biological systems.
体外研究 (In Vitro)
单个携带FAM荧光团的分子即可发出强烈的荧光信号,并易于扩散到溶液中[1]。体外实验表明,5-FAM-炔烃可作为荧光探针用于检测ALP活性。该化合物具有优异的光物理性质,最大吸收波长为490 nm,最大发射波长为513 nm,摩尔消光系数为80.0 L mmol⁻¹ cm⁻¹。该探针具有高灵敏度和选择性,可用于实时监测溶液中的酶活性。脱磷酸化后,荧光团释放并产生与ALP浓度相关的强荧光信号。
体内研究 (In Vivo)
5-FAM-炔烃主要用作体外标记和检测试剂,因此其体内应用受到限制。该化合物的荧光特性使其具有成像应用的潜力,但其在活体生物中的应用尚未得到充分表征。该探针可用于离体组织染色或基于细胞的荧光成像研究。然而,该化合物主要设计用于生物化学和分子生物学应用,而非体内药理学。
酶活实验
5-FAM-炔烃的体外酶活性测定包括将探针与ALP酶在合适的缓冲液(通常为Tris-HCl或甘氨酸缓冲液,pH 8-10)中于37°C孵育。使用荧光分光光度计或酶标仪实时监测反应进程,测量激发波长490 nm和发射波长513 nm处的荧光强度。ALP活性通过荧光强度随时间增加的速率进行定量。对照组包括不加酶的反应和加入已知ALP抑制剂的反应,以验证特异性。
细胞实验
对于体外细胞检测,首先培养细胞并裂解,然后将细胞裂解液与 5-FAM-炔烃探针在检测缓冲液中孵育。通过测量荧光强度来确定细胞裂解液中的 ALP 活性。或者,也可以将活细胞与探针孵育,并使用流式细胞仪或荧光显微镜测量荧光强度。该探针还可用于免疫标记应用,检测 ALP 标记的二抗。
动物实验
5-FAM-炔烃的体内动物研究并不常见,因为该化合物主要用作体外研究试剂。如果用于体内,该探针将通过静脉注射给药,并进行荧光成像以检测组织中的ALP活性。然而,此类应用尚未成熟,该化合物的药代动力学和生物分布也尚未得到充分表征。
药代性质 (ADME/PK)
由于5-FAM-炔烃主要用作研究试剂而非候选药物,其药代动力学性质尚未得到充分表征。该探针可溶于pH>8的水性缓冲液,以及醇类、DMSO和DMF。其溶液稳定性可能有限,建议每次实验均配制新鲜溶液。在推荐的储存条件下,该化合物以固体形式储存稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
5-FAM-炔烃的毒理学数据有限。该化合物被视为研究用化学品,应按照标准实验室安全防护措施进行操作。作为一种荧光探针,它不适用于治疗用途,其毒性特征尚未经过系统评估。该化合物可能刺激皮肤和眼睛,操作时应使用适当的个人防护装备。
参考文献

[1]. A Sensitive Fluorescence Biosensor for Alkaline Phosphatase Activity Based on the Cu(II)-dependent DNAzyme. Anal Chim Acta. 2016 Dec 15;948:98-103.

其他信息
5-FAM-炔烃是一种多功能荧光探针,用于ALP检测和生物偶联应用。该化合物的绿色荧光、高灵敏度和炔烃功能使其成为酶活性测定、蛋白标记和点击化学应用的宝贵工具。它广泛应用于生化研究、诊断试剂开发和分子生物学。该探针仅供研究使用,未获批准用于临床诊断或治疗应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C24H15NO6
分子量
413.38
精确质量
413.089
CAS号
510758-19-7
PubChem CID
89857150
外观&性状
Yellow to brown solid powder
密度
1.6±0.1 g/cm3
沸点
709.6±60.0 °C at 760 mmHg
熔点
313 °C(dec.)
闪点
382.9±32.9 °C
蒸汽压
0.0±2.3 mmHg at 25°C
折射率
1.767
LogP
2
tPSA
105
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
762
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C#CCNC(=O)C1=CC2=C(C=C1)C3(C4=C(C=C(C=C4)O)OC5=C3C=CC(=C5)O)OC2=O
InChi Key
UNBAJBIGCBVWJU-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C24H15NO6/c1-2-9-25-22(28)13-3-6-17-16(10-13)23(29)31-24(17)18-7-4-14(26)11-20(18)30-21-12-15(27)5-8-19(21)24/h1,3-8,10-12,26-27H,9H2,(H,25,28)
化学名
3',6'-dihydroxy-3-oxo-N-prop-2-ynylspiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carboxamide
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 50 mg/mL (120.95 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4191 mL 12.0954 mL 24.1908 mL
5 mM 0.4838 mL 2.4191 mL 4.8382 mL
10 mM 0.2419 mL 1.2095 mL 2.4191 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们