Proteinase K (protease K; Protease K) 中文名称: 蛋白酶 K

别名: 蛋白酶 K;蛋白激酶K溶液;ML蛋白酶K溶液;重组蛋白酶K; Proteinase K 蛋白酶 K;蛋白酶 K冻干粉;蛋白酶K溶液;酶制剂蛋白酶 K; 林伯氏白色念球菌;蛋白酶K;蛋白酶;蛋白酶K(原装);蛋白内切酶K;内肽酶 K;肽酶 K

目录号: V73396 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

蛋白酶K（Protease K）是一种用于蛋白质消化的非特异性丝氨酸蛋白酶。

Proteinase K (protease K; Protease K) CAS号: 39450-01-6
产品类别: Ser Thr Protease

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
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产品描述

蛋白酶K（Protease K）是一种用于蛋白质消化的非特异性丝氨酸蛋白酶。在存在 SDS 或尿素的情况下，蛋白酶 K 在各种 pH 值 (4-12)、盐浓度和温度单位下均具有活性。蛋白酶K可用于改进提取和检测病毒核酸的方法。

生物活性&实验参考方法

体外研究 (In Vitro)	MTX 和 BSA 之间的酰胺键以及 BSA 结构内的酰胺键可以被蛋白酶 K 破坏[2]。指南（这是我们建议的方案；应该对其进行调整以满足您的独特需求；它仅作为指南）。无需提取RNA，使用蛋白酶K即可直接从接种病毒转运介质（VTM）中检测到SARS-COV2病毒成分，蛋白酶K具有更好的蛋白质降解能力[3]。 SARS-CoV2 rRTPCR 检测方案涉及的步骤如下： 1. 将每个 SARS-COV2 样本的 VTM 分入三个 45 μL EP 管中； 2. 添加 2.5 µL (20 mg/mL) 浓缩蛋白酶 K (PK)，最终浓度为 PK ~1 mg/ml VTM； 3. 25℃孵育5分钟； 4. 60℃孵育15分钟； 5. 98°C 孵育 10 分钟，4°C 保存样品。 6. 以5 µL提取的RNA为模板，进行rRTPCR检测； 7. 采用BIORAD CFX96™实时热循环仪进行rRTPCR检测，阳性标准循环阈值(Ct)值小于40。蛋白酶K提高了痰样本回收核酸的浓度，增强其均质效果和阳性率[4]。甲型流感病毒（IAV）核酸提取步骤如下： 1. 将标本分入3个500 μL EP管； 2. 加入 500 μL 蛋白酶 K 缓冲液（0.4 mg/mL）； 3. 55℃孵育25分钟，每五分钟涡旋一次； 4. 使用自动化核酸提取系统（中国上海之江生物科技有限公司）提取200 μL样品的RNA； 5. 使用 1.8 至 2.0 的标准范围评估纯 RNA 产品的 A260/A280 比率。
参考文献	[1]. Proteinase K From Tritirachium Album Limber. Eur J Biochem . 1974 Aug 15;47(1):91-7. [2]. Multifunctional nanoparticles from albumin for stimuli-responsive efficient dual drug delivery. Bioorg Chem. 2019 Jul;88:102959. [3]. Vitality of Proteinase K in rRTPCR Detection of SARS-CoV2 Bypassing RNA Extraction. Front Cell Infect Microbiol. 2021 Nov 3;11:717068. [4]. Comparative Evaluation of Three Preprocessing Methods for Extraction and Detection of Influenza A Virus Nucleic Acids from Sputum. Front Med (Lausanne). 2018 Mar 2;5:56.

体外研究 (In Vitro)

MTX 和 BSA 之间的酰胺键以及 BSA 结构内的酰胺键可以被蛋白酶 K 破坏[2]。指南（这是我们建议的方案；应该对其进行调整以满足您的独特需求；它仅作为指南）。无需提取RNA，使用蛋白酶K即可直接从接种病毒转运介质（VTM）中检测到SARS-COV2病毒成分，蛋白酶K具有更好的蛋白质降解能力[3]。 SARS-CoV2 rRTPCR 检测方案涉及的步骤如下： 1. 将每个 SARS-COV2 样本的 VTM 分入三个 45 μL EP 管中； 2. 添加 2.5 µL (20 mg/mL) 浓缩蛋白酶 K (PK)，最终浓度为 PK ~1 mg/ml VTM； 3. 25℃孵育5分钟； 4. 60℃孵育15分钟； 5. 98°C 孵育 10 分钟，4°C 保存样品。 6. 以5 µL提取的RNA为模板，进行rRTPCR检测； 7. 采用BIORAD CFX96™实时热循环仪进行rRTPCR检测，阳性标准循环阈值(Ct)值小于40。蛋白酶K提高了痰样本回收核酸的浓度，增强其均质效果和阳性率[4]。甲型流感病毒（IAV）核酸提取步骤如下： 1. 将标本分入3个500 μL EP管； 2. 加入 500 μL 蛋白酶 K 缓冲液（0.4 mg/mL）； 3. 55℃孵育25分钟，每五分钟涡旋一次； 4. 使用自动化核酸提取系统（中国上海之江生物科技有限公司）提取200 μL样品的RNA； 5. 使用 1.8 至 2.0 的标准范围评估纯 RNA 产品的 A260/A280 比率。

参考文献

[1]. Proteinase K From Tritirachium Album Limber. Eur J Biochem . 1974 Aug 15;47(1):91-7.

[2]. Multifunctional nanoparticles from albumin for stimuli-responsive efficient dual drug delivery. Bioorg Chem. 2019 Jul;88:102959.

[3]. Vitality of Proteinase K in rRTPCR Detection of SARS-CoV2 Bypassing RNA Extraction. Front Cell Infect Microbiol. 2021 Nov 3;11:717068.

[4]. Comparative Evaluation of Three Preprocessing Methods for Extraction and Detection of Influenza A Virus Nucleic Acids from Sputum. Front Med (Lausanne). 2018 Mar 2;5:56.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C29H27N2O12P
分子量	626.5046
精确质量	391.2
CAS号	39450-01-6
外观&性状	White to off-white solid powder
密度	1.3±0.1 g/cm3
折射率	1.648
LogP	2.5
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	H2O: 25 mg/mL
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

H2O: 25 mg/mL

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	1.5962 mL	7.9808 mL	15.9617 mL
	5 mM	0.3192 mL	1.5962 mL	3.1923 mL
	10 mM	0.1596 mL	0.7981 mL	1.5962 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。