| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
None (excipient). C14-4 is an ionizable lipid that complexes with mRNA and forms LNPs, facilitating delivery of CAR mRNA into primary human T cells. It enables efficient transfection of hard-to-transfect cells such as T cells, leading to CAR expression on the T cell surface.
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| 体外研究 (In Vitro) |
C14-4 LNPs 能高效包封 CAR mRNA（>90%）。体外实验表明，C14-4 LNPs 能高效转染原代人 T 细胞（通常 30-60% 的 T 细胞为 CAR 阳性）。C14-4 LNPs 可实现瞬时 CAR 表达，并在转染后 24-48 小时达到峰值。在共培养实验中，用 C14-4 LNPs 生成的 CAR-T 细胞对靶癌细胞（例如 CD19 阳性的 Raji 细胞）表现出强效的细胞毒性，这可通过靶细胞裂解（LDH 释放）和细胞因子（IFN-γ、IL-2）的产生来衡量。
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| 体内研究 (In Vivo) |
C14-4 LNPs已被评估用于体内生成CAR-T细胞。将包裹抗CD19 CAR mRNA的C14-4 LNPs静脉注射到免疫功能正常的实验小鼠体内，可诱导T细胞表达CAR。这些体内生成的CAR-T细胞能有效清除CD19阳性肿瘤细胞，从而降低肿瘤负荷并延长生存期。C14-4 LNPs具有较低的全身毒性和良好的生物分布。
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| 酶活实验 |
C14-4 (C₈4H1₇3N₅O₇，分子量 1365.30) 为浅黄色至黄色液体。制备脂质纳米颗粒 (LNP) 时，将 C14-4 溶解于乙醇中，并与辅助脂质（例如 DSPC、胆固醇、PEG2000-DMG）按优化的摩尔比（例如 50:10:38.5:1.5）混合。然后，通过微流控混合将混合物与含有 CAR mRNA 的酸性水溶液缓冲液（25-50 mM 乙酸钠，pH 4-5）混合。LNP（粒径 80-120 nm）自发形成。通过透析或切向流过滤 (TFF) 去除乙醇，并将 pH 值调节至 7.4。使用 Ribogreen 法测定包封率（>90%）。采用动态光散射法（DLS）表征颗粒尺寸、多分散指数（PDI，0.1-0.2）和zeta电位（pH 5时约为+10至+30 mV，pH 7.4时约为0 mV）。采用TNS荧光法测定pKa值（约为6.5-6.8）。
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| 细胞实验 |
在体外研究中，首先利用CD3+磁珠分离法从外周血单核细胞（PBMC）中分离出原代人T细胞。然后，在IL-2（100-200 IU/mL）存在下，用抗CD3/CD28磁珠或抗体激活T细胞24-48小时。将激活的T细胞接种于96孔或24孔板（1-2×10⁵个细胞/孔），使用无血清培养基（例如X-VIVO15），并用C14-4 LNPs处理，CAR mRNA剂量为0.5-5 ug/1×10⁶个细胞。4-6小时后，将含LNP的培养基更换为含IL-2的新鲜培养基。转染后24-48小时，使用流式细胞术，通过蛋白L或抗F(ab')2抗体染色评估CAR表达。细胞毒性评估方法是将 CAR-T 细胞（效应细胞）与靶细胞（例如 Raji、K562）以效应细胞与靶细胞的比例（1:1 至 20:1）共培养 4-24 小时，然后进行 LDH 释放试验或基于流式细胞术的杀伤试验。细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α）的产生通过 ELISA 法测定。
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| 动物实验 |
在体内研究中，将包裹抗CD19 CAR mRNA的C14-4 LNPs通过尾静脉注射给免疫功能正常的小鼠（例如，6-8周龄的BALB/c或C57BL/6小鼠），mRNA剂量为0.2-2 mg/kg。对于肿瘤模型：在LNP治疗前3-7天，将CD19阳性肿瘤细胞（例如，A20、Raji，1-5×10⁵/只小鼠）静脉注射给小鼠。LNP在第1、3、5天给药（多次给药）。通过生物发光成像（如果肿瘤细胞表达荧光素酶）或测量肿瘤体积（对于皮下模型）评估肿瘤负荷。监测生存期。为了定量CAR-T细胞的生成：在不同时间点采集外周血，并通过流式细胞术测量T细胞上的CAR表达。采集组织（脾脏、肝脏、骨髓）用于CAR表达分析。生物分布：使用荧光标记的脂质纳米颗粒（LNP），并对组织进行离体成像。采用ELISA法检测血浆中细胞因子释放综合征（CRS）标志物（IL-6、IFN-γ、TNF-α）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未有关于C14-4的详细药代动力学数据报道。静脉注射后，C14-4脂质纳米颗粒的循环半衰期约为2-4小时，主要蓄积于肝脏（约占剂量的40-60%）和脾脏（约占剂量的20-30%）。该可电离脂质的pKa值约为6.5-6.8，使其能够有效逃逸内体。其代谢可能涉及酯键的水解，随后脂质片段通过胆汁和肾脏途径清除。其高分子量（1365.30 Da）提示其口服生物利用度较低。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
C14-4 LNPs具有高转染效率和低细胞毒性（在2.5 μg/mL mRNA浓度下，原代人T细胞的细胞存活率>85%）。体内实验表明，在CAR mRNA剂量≤1 mg/kg静脉注射时，C14-4 LNPs耐受性良好。可能出现轻微、短暂的肝酶（ALT/AST）和促炎细胞因子（IL-6、IFN-γ）升高，这是LNP给药的典型反应。在治疗剂量下，尚未报告严重不良事件（例如神经毒性、细胞因子释放综合征）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
C14-4（C14-494，CAS 2639634-80-1，C₈₄H₁₇₃N₅O₇，分子量 1365.30）纯度≥98%，为浅黄色至黄色液体。需储存于-20℃。C14-4是一种可电离脂质，用于将CAR mRNA递送至T细胞。目前尚未有临床试验报道，仅供研究使用。C14-4可实现CAR-T细胞的体内生成，为体外CAR-T细胞制备提供了一种更简便且可能更安全的替代方案。该技术目前处于临床前开发阶段。
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| 分子式 |
C84H173N5O7
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|---|---|
| 分子量 |
1365.30
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| 精确质量 |
1364.333
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| CAS号 |
2639634-80-1
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| PubChem CID |
164687424
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow liquid
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| LogP |
27.4
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| tPSA |
136
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
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| 可旋转键数目(RBC) |
80
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| 重原子数目 |
96
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| 分子复杂度/Complexity |
1420
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCCCCCCCCCCC(CN(CCN1CCN(CC1)CCOCCN(CC(CCCCCCCCCCCC)O)CC(CCCCCCCCCCCC)O)CCOCCN(CC(CCCCCCCCCCCC)O)CC(CCCCCCCCCCCC)O)O
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| InChi Key |
OQALBVGFAKJDAR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C84H173N5O7/c1-6-11-16-21-26-31-36-41-46-51-56-80(90)75-87(68-72-96-74-70-89(78-83(93)59-54-49-44-39-34-29-24-19-14-9-4)79-84(94)60-55-50-45-40-35-30-25-20-15-10-5)66-65-85-61-63-86(64-62-85)67-71-95-73-69-88(76-81(91)57-52-47-42-37-32-27-22-17-12-7-2)77-82(92)58-53-48-43-38-33-28-23-18-13-8-3/h80-84,90-94H,6-79H2,1-5H3
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| 化学名 |
1-[2-[2-[bis(2-hydroxytetradecyl)amino]ethoxy]ethyl-[2-[4-[2-[2-[bis(2-hydroxytetradecyl)amino]ethoxy]ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]amino]tetradecan-2-ol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (73.24 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7324 mL | 3.6622 mL | 7.3244 mL | |
| 5 mM | 0.1465 mL | 0.7324 mL | 1.4649 mL | |
| 10 mM | 0.0732 mL | 0.3662 mL | 0.7324 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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