| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CENP-E 16.1 nM (IC50)
PF-2771 specifically targets the centromere protein E (CENP-E), a mitotic kinesin (kinesin-7) that plays an essential role in the spindle assembly checkpoint and chromosome alignment during mitosis. The compound inhibits CENP-E motor activity with an IC50 of 16.1 nM. PF-2771 shows no inhibitory effect on ATPase activities of highly related kinesins (0% inhibition of Eg5/KSP, chromokinesin, and MCAK at both 1 or 10 microM), demonstrating excellent selectivity within the kinesin superfamily. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PF-2771 的 IC50 值为 16.1 nM，是一种强效且特异性的 CENP-E 抑制剂，可抑制 CENP-E 的运动活性。PF-2771 不抑制与其密切相关的驱动蛋白的 ATPase 活性（在 1 μM 和 10 μM PF-2771 浓度下，MCAK、铬驱动蛋白和 Eg5/KSP 的抑制率均为 0%）。PF-2771 对 74 种蛋白激酶的活性抑制作用不明显（在 1 μM PF-2771 浓度下抑制率均低于 23%，在 10 μM PF-2771 浓度下抑制率低于 40%）。PF-2771 对基底样乳腺癌肿瘤细胞具有细胞毒性（EC50 值小于 0.1 μM），但对正常细胞或癌前细胞系无影响（EC50 值大于 5 μM）。在 MDA-MB-468 细胞中，PF-2771 (100 nM) 会导致染色体排列缺陷[1]。
体外实验表明，PF-2771 (IC50 = 16.1 nM) 能高效且选择性地抑制 CENP-E 马达活性。它对 74 种蛋白激酶无活性（1 uM 浓度下抑制率均 <23%，10 uM 浓度下抑制率 <40%）。PF-2771 对基底样乳腺癌肿瘤细胞具有细胞毒性，EC50 <0.1 uM，而对正常细胞或癌前细胞系无影响（EC50 >5 uM）。在 MDA-MB-468 细胞中，PF-2771 (100 nM) 可导致有丝分裂过程中染色体排列异常，表明 CENP-E 依赖性分子事件（例如组蛋白 H3 Ser-10 磷酸化）与功能性有丝分裂缺陷相关。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在患有 AA1077 乳腺肿瘤的 SCID 小鼠中，PF-2771（100 mg/kg，每天腹腔注射）能有效抑制 CENP-E 运动活性并促进肿瘤消退[1]。
体内实验表明，PF-2771 具有显著的抗肿瘤功效。在携带 AA1077 乳腺肿瘤的 SCID 小鼠中，PF-2771（100 mg/kg，每日腹腔注射）可有效抑制 CENP-E 的运动活性并促进肿瘤消退。在用 PF-2771 治疗的患者来源的基底细胞型乳腺癌异种移植模型中，观察到肿瘤完全消退。在紫杉烷类耐药的基底细胞型乳腺癌模型中，PF-2771 也观察到肿瘤消退。这些结果提示 CENP-E 可能是三阴性/基底细胞型乳腺癌的有效治疗靶点。 |
| 酶活实验 |
为了评估无细胞体系中CENP-E马达的抑制情况，我们采用了一种生化ATPase活性测定方法。将纯化的重组CENP-E马达结构域与不同浓度的PF-2771（0、2.5、5、10、20、30、45 nM）在含有浓度范围为0.977至1000 uM ATP的反应缓冲液中孵育。通过比色法或孔雀绿法检测释放的无机磷酸盐的量来测定酶活性。IC50值（16.1 nM）由剂量-反应抑制曲线计算得出。
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| 细胞实验 |
在细胞实验中，将基底样乳腺癌细胞系（例如MDA-MB-468）接种于96孔板中，并用PF-2771系列稀释液（0.01至10 uM）处理48-72小时。使用CellTiter-Glo发光法测定细胞活力，以确定EC50值。在机制研究中，用PF-2771（例如100 nM）处理细胞后进行固定。进行组蛋白H3 Ser-10磷酸化（磷酸化HH3-Ser10）的免疫荧光染色，以监测染色体排列缺陷。染色体排列情况通过共聚焦显微镜进行评估。
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| 动物实验 |
在体内疗效研究中，使用携带AA1077乳腺肿瘤异种移植瘤的免疫缺陷小鼠（SCID小鼠）。PF-2771配制成浓度为10 mg/mL的合适溶剂，例如10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45%生理盐水。该化合物每日腹腔注射给药，剂量为100 mg/kg。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。终点指标包括肿瘤生长抑制率（TGI）和肿瘤消退评估。收集肿瘤组织进行磷酸化HH3-Ser10的Western blot分析，以确认靶点结合情况。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
在基线-a异种移植瘤模型中进行的药代动力学分析表明，PF-2771的暴露量与磷酸化HH3-Ser10水平的升高和肿瘤生长的抑制密切相关，表明其具有良好的药效学特性。该化合物可溶于DMSO（≥32 mg/mL，57.75 mM）。体内给药时，可将其配制成10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45%生理盐水溶液（≥2.5 mg/mL，4.51 mM），以达到足够的全身暴露量从而发挥疗效。预测logP值：3.8，tPSA值：106，密度：1.22±0.1 g/cm³。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PF-2771的具体毒理学数据在文献中尚不详述。然而，其在有丝分裂期靶向CENP-E的高选择性机制表明，靶向毒性可能主要与快速分裂的细胞相关，这与临床前疗效研究的观察结果一致：在SCID小鼠中，该化合物在高达100 mg/kg/天的剂量下均具有良好的耐受性。在有效剂量下，未观察到明显的体重减轻或急性毒性，表明该化合物作为研究化合物具有良好的安全性。其对74种蛋白激酶的选择性也表明其脱靶激酶相关毒性极低。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PF-2771由辉瑞全球研发中心开发，是一种首创的高效选择性CENP-E化学探针。该化合物的作用机制是抑制CENP-E马达ATPase活性，从而破坏有丝分裂过程中染色体的正常排列，导致有丝分裂停滞和细胞死亡，尤其适用于染色体高度不稳定的癌细胞。这种选择性为治疗基底样/三阴性乳腺癌提供了独特的治疗窗口。PF-2771目前处于临床前研究阶段；尚未有关于该药物的临床试验或FDA批准的报道。
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| 分子式 |
C29H36CLN5O4
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|---|---|
| 分子量 |
554.08
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| 精确质量 |
553.245
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| CAS号 |
2070009-55-9
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| PubChem CID |
118704759
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.22±0.1 g/cm3(Predicted)
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| LogP |
3.8
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| tPSA |
106
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
820
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC(C)OC1=C(C=C(C=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)C3=CN(C(=N3)C(=O)C)C)CNC(=O)CN(C)C)Cl
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| InChi Key |
VHBJNUOZEQTSNN-QHCPKHFHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H36ClN5O4/c1-18(2)39-26-12-11-22(14-24(26)30)29(38)32-23(15-31-27(37)17-34(4)5)13-20-7-9-21(10-8-20)25-16-35(6)28(33-25)19(3)36/h7-12,14,16,18,23H,13,15,17H2,1-6H3,(H,31,37)(H,32,38)/t23-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(2S)-1-[4-(2-acetyl-1-methylimidazol-4-yl)phenyl]-3-[[2-(dimethylamino)acetyl]amino]propan-2-yl]-3-chloro-4-propan-2-yloxybenzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ≥ 32 mg/mL (57.75 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.51 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.51 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.51 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8048 mL | 9.0240 mL | 18.0479 mL | |
| 5 mM | 0.3610 mL | 1.8048 mL | 3.6096 mL | |
| 10 mM | 0.1805 mL | 0.9024 mL | 1.8048 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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