| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TNF-alpha-IN-6 targets the TNFalpha protein directly, but through an allosteric mechanism. The compound binds to the TNFalpha homotrimer at a site distinct from the receptor-binding interface. This allosteric binding induces conformational changes within the TNFalpha trimer, which ultimately leads to a reduced ability of the cytokine to bind and activate its receptors, TNFR1 and TNFR2. The KD value of 6.8 nM indicates a very high binding affinity. This allosteric inhibition is distinct from orthosteric inhibitors that directly compete for the receptor-binding site, offering a novel mode of pharmacological intervention for TNFalpha-mediated diseases.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，TNF-α-IN-6 是一种高效的 TNFα 抑制剂。通过表面等离子共振 (SPR) 测定，其解离常数 (KD) 为 6.8 nM，表明该化合物具有很强的结合亲和力。该化合物表现出变构作用模式，即它与 TNFα 三聚体上一个不同于主要受体结合界面的位点结合。这种结合导致构象变化，从而降低 TNFα 激活其下游信号通路的能力。体外抗炎活性评估显示，该化合物能显著降低脂多糖 (LPS) 刺激的外周血单核细胞 (PBMC) 产生的促炎细胞因子。这些细胞实验的确切 IC₅0 值尚未公开，但可能在低纳摩尔范围内。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，TNF-α-IN-6 被描述为一种口服有效的变构 TNFα 抑制剂。它已在多种炎症动物模型中进行了测试，例如胶原诱导性关节炎 (CIA) 小鼠模型（一种标准的类风湿性关节炎模型）。预计口服该化合物可降低这些模型中的临床评分、爪肿胀和关节破坏。该化合物还在脓毒症和急性炎症模型中进行了评估，预计可降低 TNFα 水平并提高生存率。该化合物在体内与 TNFα 高亲和力结合并改变其构象的能力是其抗炎活性的基础，为治疗 TNFα 驱动的疾病提供了一种独特的药理学策略。
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| 酶活实验 |
用于检测 TNF-α-IN-6 与 TNF-α 结合亲和力的典型非细胞结合分析方法是表面等离子共振 (SPR)。本实验使用 Biacore SPR 仪器。重组人 TNF-α 通过标准胺偶联化学方法固定在 CM5 传感器芯片上。TNF-α-IN-6 配制于运行缓冲液（10 mM HEPES，pH 7.4，150 mM NaCl，0.005% Tween-20）中，浓度范围为 0.1 - 100 nM。将分析物以 30 uL/min 的流速注入到 TNF-α 包被的芯片表面，持续 120 秒以进行结合，随后进行 300 秒的解离。在每个循环之间，用 10 uL 10 mM 甘氨酸-HCl 溶液（pH 2.0）再生芯片表面。传感器图谱采用空白表面和仅含缓冲液的注射液进行双重参考。稳态响应单位 (RU) 拟合到 1:1 结合模型，以计算结合速率常数 (ka)、解离速率常数 (kd) 和平衡解离常数 (KD)。已报道的 TNF-α-IN-6 的 KD 为 6.8 nM。
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| 细胞实验 |
典型的体外细胞TNF-α-IN-6检测方法使用人单核细胞系THP-1。细胞在添加了10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素的RPMI-1640培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。检测时，将THP-1细胞以1 × 10⁵个细胞/孔的密度接种于96孔板中，并用100 nM佛波醇酯（PMA）处理48小时，诱导其分化为巨噬细胞样细胞。之后更换不含PMA的新鲜培养基，细胞静置24小时。加入不同浓度（0.1 nM - 10 uM）的TNF-α-IN-6，预孵育1小时。最后，用1 ug/mL脂多糖（LPS）刺激细胞24小时。刺激后，收集培养上清液，并使用市售高灵敏度TNFα ELISA试剂盒测定人TNFα的浓度。EC₅0是指与仅用LPS处理的对照组相比，使TNFα产生量降低50%的化合物浓度。细胞活力采用MTT法或CellTiter-Glo法进行评估。
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| 动物实验 |
TNF-α-IN-6 的体内动物研究通常采用胶原诱导性关节炎 (CIA) 模型，以 8 周龄雄性 DBA/1J 小鼠为模型。在第 0 天，小鼠尾根部皮内注射 100 μL 含有 100 μg 牛 II 型胶原蛋白和弗氏完全佐剂 (CFA) 的乳剂进行免疫。在第 21 天，注射 100 μg 胶原蛋白和弗氏不完全佐剂 (IFA) 进行加强免疫。从第 21 天起，将 TNF-α-IN-6 配制成赋形剂（例如，0.5% 甲基纤维素或 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45% 生理盐水），并以 1、3 和 10 mg/kg 的剂量每日口服一次。每日监测小鼠的关节炎临床症状，根据肿胀和发红程度对每只爪子进行0至4分的评分。每周两次使用游标卡尺测量爪子厚度。研究结束时（第42天），处死小鼠，收集爪子进行组织病理学分析（苏木精-伊红染色和番红O染色），以评估关节炎症、滑膜形成和软骨损伤。采集血液样本，通过ELISA法分析血清细胞因子（TNFα、IL-1β、IL-6）。所有动物实验均需事先获得IACUC批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TNF-α-IN-6 的详细药代动力学特性尚未公开。由于该化合物在动物模型中被描述为“口服有效”，预计其在小鼠体内具有可接受的口服生物利用度。该化合物的分子量为 495.54 g/mol，预计具有亲脂性，这可能有助于其良好的膜渗透性。在典型的变构 TNFα 抑制剂药代动力学研究中，该化合物将通过静脉注射 (IV) 和口服 (PO) 两种途径给药于小鼠。将在多个时间点（例如，给药后 0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时）采集血样。血浆浓度将通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 进行分析。关键参数，包括血浆峰浓度 (Cmax)、达峰时间 (Tmax)、末端半衰期 (t1/2)、清除率 (CL)、分布容积 (Vd) 和口服生物利用度 (F)，将采用非房室模型分析进行计算。目前尚无人体药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚未有关于TNF-α-IN-6的毒理学数据报道。作为一种研究化合物，它尚未经过全面的监管毒理学研究。在已报道的疗效研究中，该化合物在测试剂量下可能具有良好的耐受性，因为未提及明显的毒性迹象。其肝毒性、肾毒性或其他器官特异性毒性的可能性仍不清楚。研究人员在处理该化合物时应遵循标准安全规程。建议在通风橱内操作，并使用个人防护装备（PPE），包括丁腈手套、实验服和护目镜。如接触皮肤，请立即用肥皂和水清洗。如接触眼睛，请用清水彻底冲洗15分钟，必要时就医。仅供研究使用；不得用于人体治疗。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TNF-α-IN-6 并非已获批准的药物，也未进行临床开发。它是一种研究级小分子，是研究 TNFα 生物学及其在炎症性疾病中作用的重要工具。其独特的变构作用机制，使其与 TNFα 的结合亲和力 (KD) 为 6.8 nM，与传统的 TNFα 抑制剂相比，具有独特的药理学特征。它被用于药理学研究，以探索调节 TNFα 信号通路的新策略，这有望开发出用于治疗类风湿性关节炎、炎症性肠病 (IBD) 和银屑病等疾病的新型口服疗法。仅供研究使用；不得用于人体诊断或治疗。
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| 分子式 |
C26H25N9O2
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|---|---|
| 分子量 |
495.54
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| 精确质量 |
495.213
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| CAS号 |
2699704-20-4
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| PubChem CID |
162641389
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
1.3
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| tPSA |
131
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
942
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1(C#N)=NC=CC=C1CN1C2=NC(C3=CN=C(N4CCN5C(=O)NC[C@]5([H])C4)N=C3)=CC=C2C(=O)C1(C)C
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| InChi Key |
RUVSMFOFQJDXHE-GOSISDBHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H25N9O2/c1-26(2)22(36)19-5-6-20(32-23(19)35(26)14-16-4-3-7-28-21(16)10-27)17-11-29-24(30-12-17)33-8-9-34-18(15-33)13-31-25(34)37/h3-7,11-12,18H,8-9,13-15H2,1-2H3,(H,31,37)/t18-/m1/s1
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| 化学名 |
3-[[6-[2-[(8aR)-3-oxo-1,2,5,6,8,8a-hexahydroimidazo[1,5-a]pyrazin-7-yl]pyrimidin-5-yl]-2,2-dimethyl-3-oxopyrrolo[2,3-b]pyridin-1-yl]methyl]pyridine-2-carbonitrile
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (201.80 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0180 mL | 10.0900 mL | 20.1800 mL | |
| 5 mM | 0.4036 mL | 2.0180 mL | 4.0360 mL | |
| 10 mM | 0.2018 mL | 1.0090 mL | 2.0180 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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