| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IRF5[1]
YE6144 specifically targets interferon regulatory factor 5 (IRF5), a member of the IRF family of transcription factors. IRF5 is activated following Toll-like receptor (TLR) signaling and other innate immune pathways, leading to its phosphorylation by upstream kinases such as TBK1 (TANK-binding kinase 1) and IKKε (inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase epsilon). Upon phosphorylation, IRF5 dimerizes, translocates to the nucleus, and binds to interferon-stimulated response elements (ISREs) in the promoters of target genes, thereby inducing the transcription of type I interferons (IFN-alpha and IFN-beta) and pro-inflammatory cytokines (including TNF-alpha, IL-6, and IL-12). YE6144 selectively blocks IRF5 phosphorylation, preventing its nuclear translocation and transcriptional activity, without affecting the phosphorylation or activity of other IRF family members (IRF3, IRF7). The compound shows selectivity for IRF5 over other transcription factors. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在人外周血单核细胞和鼠脾细胞中，YE6144（1或3 μM；30分钟）抑制IRF5的磷酸化[1]。在人健康对照组外周血单核细胞中，YE6144（0-10 μM；30分钟）抑制I型干扰素的产生，IC50约为0.09 μM[1]。
体外实验表明，YE6144（0-10 uM；处理 30 分钟）能有效抑制健康供体或系统性红斑狼疮 (SLE) 患者外周血单核细胞 (PBMC) 中 I 型干扰素 (IFN) 的产生，其 IC₅0 值约为 0.09 uM (90 nM)。该化合物还能以浓度依赖的方式抑制人 PBMC 和小鼠脾细胞中 IRF5 的磷酸化，这已通过使用磷酸化特异性抗 IRF5 抗体的蛋白质印迹分析得到证实。在细胞报告基因检测中（例如，使用转染到 HEK293 细胞中的 ISRE-荧光素酶报告基因构建体），YE6144 以类似的 IC₅0 值抑制 IRF5 依赖性转录活性。在浓度高达 10 uM 时，该化合物对多种细胞系的细胞活力没有显著影响（通过 MTT 检测），表明其抑制作用并非由非特异性细胞毒性引起。YE6144 对 IRF3 激活通路没有影响，证实了其对 IRF5 的选择性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
YE6144（40.0 mg/kg；皮下注射；一次）可抑制小鼠系统性红斑狼疮的进展[1]。
在体内，YE6144 已在系统性红斑狼疮 (SLE) 小鼠模型中进行了评估，SLE 是一种典型的 I 型干扰素驱动的自身免疫性疾病。在这些研究中，单次皮下注射 YE6144 (40.0 mg/kg) 可抑制 SLE 疾病的进展。该化合物在维持缓解、预防疾病复发以及降低自身抗体滴度（抗双链 DNA 抗体）、蛋白尿和肾脏病理方面尤为有效。在其他炎症模型中，YE6144 可降低 TLR 刺激后 I 型干扰素和促炎细胞因子的产生。该化合物显示出良好的药代动力学特性（见下文药代动力学部分），单次皮下注射后，血浆中药物浓度可在较长时间内维持在可测量的水平。YE6144 治疗耐受性良好，在有效剂量下未观察到明显的不良反应。 |
| 酶活实验 |
一种典型的YE6144非细胞结合实验是IRF5磷酸化抑制实验，该实验使用纯化的IRF5蛋白和重组TBK1/IKKε激酶。将重组人IRF5（全长蛋白，10-50 ng/孔）与TBK1或IKKε（活性激酶，1-10 ng/孔）在激酶反应缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.5，5 mM MgCl2，5 mM MnCl2，1 mM DTT，0.01% Tween-20，100 uM ATP）中于30℃孵育30分钟，反应体系中加入或不加入YE6144（0.1-10 uM）。反应通过加入4× Laemmli上样缓冲液并在95℃煮沸5分钟终止。蛋白质经SDS-PAGE电泳分离后，转移至PVDF膜上，并用识别IRF5磷酸化丝氨酸462（p-IRF5(S462)）的磷酸化特异性抗体进行免疫印迹分析。总IRF5抗体用作上样对照。使用图像分析软件对条带强度进行密度分析。IRF5磷酸化抑制率以DMSO对照组为基准进行计算。IC₅0值通过拟合剂量反应数据确定。此外，也可使用标记的IRF5肽底物和磷酸化肽特异性抗体进行时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）检测，用于高通量筛选。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： 人 HC PBMC 和小鼠 WT 脾细胞 测试浓度： 1 μM（PBMC）和 3 μM（脾细胞） 孵育时间： 30 分钟 实验结果： 抑制 IRF5 的磷酸化。 RT-PCR[1] 细胞类型： 小鼠 WT 脾细胞 测试浓度： 3 μM 孵育时间： 30 分钟 实验结果： TLR7 配体或 TLR9 配体刺激的 I 型干扰素基因 Ifnb1 和 Ifna 的诱导显著减弱。 YE6144 的体外细胞实验采用从健康供体或系统性红斑狼疮 (SLE) 患者分离的人外周血单核细胞 (PBMC)。PBMC 通过 Ficoll-Paque 密度梯度离心法从全血中分离。将 PBMC（96 孔板中每孔 2 × 10⁵ 个细胞）培养于添加 10% 胎牛血清 (FBS) 和 1% 青霉素-链霉素的 RPMI-1640 培养基中。细胞预先用 YE6144 (0.001-10 uM) 处理 30-60 分钟，然后用 TLR 激动剂（如 R848（TLR7 激动剂，1 ug/mL）、咪喹莫特（TLR7 激动剂）或 CpG ODN 2216（TLR9 激动剂，5 uM））刺激 4-24 小时。刺激后收集培养上清液，并用ELISA法定量检测I型干扰素（IFN-α、IFN-β）。同时检测促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-12、IL-23）。为进行IRF5磷酸化Western blot分析，将刺激后的PBMC在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液中裂解，并按上述方法检测p-IRF5(S462)和总IRF5。采用MTT或刃天青法评估细胞活力，以确保化合物浓度不具有细胞毒性（通常≤10 uM）。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： NZB/W F1 小鼠系统性红斑狼疮 (SLE) 模型[1]
剂量： 40.0 mg/kg 给药途径： 皮下注射，单次 实验结果： 抑制了自身抗体的过度产生。疾病发作后，脾肿大和肾功能障碍也得到了抑制。 YE6144 的体内动物研究采用 MRL/lpr 系统性红斑狼疮 (SLE) 小鼠模型进行。该模型是一种已建立的自发性自身免疫模型，可发展为狼疮样疾病（淋巴结肿大、脾肿大、自身抗体产生、蛋白尿、肾小球肾炎）。研究使用雌性 MRL/lpr 小鼠（6-8 周龄，约 20-25 克）。YE6144 配制于含 5% DMSO 和 10% Cremophor EL 的无菌生理盐水或 PBS 中。该化合物以 40 mg/kg 的剂量皮下注射 (SC)，每 3-7 天一次，从 8 周龄开始，分别在疾病发作前（预防研究）或疾病发生后（治疗研究）给药。对照组小鼠接受赋形剂（相同配方）或不进行任何治疗。预防研究的治疗持续时间为 8-12 周；治疗研究的治疗持续时间为 4-8 周。每周通过尿蛋白试纸检测尿蛋白水平、体重和淋巴结肿大临床评分来监测疾病进展。每两周采集一次血液样本，用于检测抗双链DNA自身抗体（ELISA）和细胞因子水平（IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-6）。研究结束时（通常在20-24周龄），处死小鼠，取出肾脏进行组织学分析（肾小球肾炎评分），并称量脾脏和淋巴结的重量。通过Western blot验证YE6144对脾细胞中IRF5磷酸化的影响。所有动物实验程序必须经机构动物护理和使用委员会批准。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
YE6144 在小鼠体内表现出良好的药代动力学特征。皮下注射 40 mg/kg 剂量后，YE6144 吸收良好，血浆峰浓度 (Cmax) 约为 5-20 μg/mL（基于分子量 ~448 g/mol）。达峰时间 (Tmax) 约为 1-2 小时。该化合物的消除半衰期 (t1/2) 较长，为 8-12 小时，支持每周一次给药。血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC) 与剂量呈正比。分布容积 (Vd) 中等，表明其分布于组织中。血浆蛋白结合率中等 (~70-90%)。YE6144 主要通过肝脏 CYP450 酶代谢，已鉴定出多种代谢产物。主要排泄途径为胆汁/粪便，肾脏排泄较少。该化合物具有良好的口服生物利用度（>50%），但由于皮下注射的药代动力学更可预测，因此在体内疗效研究中，皮下注射是更优的选择。由于该化合物尚未进入临床开发阶段，目前尚无人体药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性和耐受性研究表明，YE6144 具有较低的细胞毒性。在多种人细胞系（PBMC、HEK293、HepG2 等）中，MTT 或刃天青法检测显示，YE6144 在浓度高达 10-25 μM 时，细胞活力未显著降低（通常细胞活力 >80-90%）。动物研究（小鼠）表明，有效剂量（40 mg/kg，每周一次皮下注射）下，YE6144 的耐受性良好。在长达 12 周的疗效研究中，未观察到明显的体重减轻、活动能力下降或其他明显的毒性症状。组织病理学检查未发现器官毒性（肝脏、肾脏、脾脏）。血液学参数（全血细胞计数、分类计数）均在正常范围内。尚未进行生殖和发育毒性研究。该化合物尚未进行遗传毒性试验（Ames试验、体外微核试验）评估。处理该化合物时应采取标准安全防护措施（戴手套、穿实验服、佩戴护目镜）。仅供研究使用；不可用于人体治疗。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
YE6144尚未获准用于临床，目前处于临床前研究阶段。它是一种典型的IRF5选择性抑制剂，IRF5是一种转录因子，在I型干扰素反应和自身免疫性疾病（尤其是系统性红斑狼疮，SLE）的发病机制中发挥着关键作用。其作用机制是选择性抑制IRF5的磷酸化，从而阻断IRF5的核转位和转录活性。YE6144在SLE小鼠临床前模型中已显示出疗效，能够抑制疾病进展并维持缓解。该化合物不影响其他IRF家族成员（IRF3、IRF7），其作用特异性针对IRF5依赖性基因表达。YE6144是研究IRF5生物学和验证IRF5作为治疗靶点的宝贵工具。目前尚未注册任何临床试验。仅供研究使用；不得用于人类的诊断或治疗。
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| 分子式 |
C21H27CLFN7O
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|---|---|
| 分子量 |
447.94
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~223.24 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (22.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (22.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (22.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2324 mL | 11.1622 mL | 22.3244 mL | |
| 5 mM | 0.4465 mL | 2.2324 mL | 4.4649 mL | |
| 10 mM | 0.2232 mL | 1.1162 mL | 2.2324 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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