| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Kd: 23 nM (cavolin-1)[1]
WL47 TFA specifically targets caveolin-1 (CAV1), a 22-kDa integral membrane protein that is the primary structural component of caveolae. CAV1 contains a scaffolding domain (CSD, amino acids 82-101) that interacts with and modulates the activity of numerous signaling proteins, including Src family kinases, endothelial nitric oxide synthase (eNOS), G-proteins, and growth factor receptors. Under normal conditions, CAV1 assembles into high-molecular-weight oligomers (approximately 300-800 kDa) that are essential for caveolae formation and function. WL47 TFA binds to CAV1 with high affinity (Kd = 23 nM) and disrupts CAV1 oligomerization, thereby interfering with caveolae integrity and CAV1-mediated signaling compartmentalization. The compound is selective for CAV1 over other proteins, including BSA, casein, and HEWL. By disrupting CAV1 oligomers, WL47 TFA can modulate a wide range of cellular processes dependent on caveolae, including endocytosis, mechanotransduction, and signal transduction. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Caveolin-1（简称 CAV）是一种分子量为 22 kDa 的单调膜蛋白。它仅穿过单层脂质双层，其 N 端和 C 端均位于细胞质侧。当多个 CAV 拷贝寡聚化时，它们可以形成大分子量复合物，使膜向内弯曲，形成直径在 50 至 100 nm 之间的内陷，即“小窝”。从 gp41 中提取的 36 个氨基酸肽段 T20 可阻止 HIV 病毒与 CD4+ T 细胞融合。与原始 T20 亲本序列相比，WL47 的溶解度提高了 7500 倍，长度缩短了 80%。本文利用 CAV 寡聚体和寡聚化程度测定技术，在体外验证了 WL47 的活性。本研究利用一种能自发寡聚化生成特定直径 CAV 纳米颗粒的 CAV 变体 (CAV(FLV)) 来研究 WL47 的解聚作用。在还原剂存在下，WL47 不能有效抑制寡聚化，表明二硫键介导的二聚化是 WL47 发挥活性的必要条件。
体外生化实验证实，WL47 TFA 是一种高亲和力 CAV1 配体（Kd = 23 nM），并且是 CAV1 寡聚体的有效破坏剂。该化合物对 CAV1 的选择性高于其他蛋白质，包括 BSA、酪蛋白和 HEWL，这已通过表面等离子共振 (SPR) 或荧光偏振结合亲和力测定得到证实。WL47 TFA 的溶解度比原始 T20 母体序列高 7500 倍，这改善了其操作性，并允许在生化和细胞实验中测试更广泛的浓度范围。尺寸排阻色谱、天然凝胶电泳或交联实验表明，该化合物能够破坏 CAV1 寡聚体，WL47 TFA 处理后，CAV1 的分子量分布从高分子量寡聚体转变为低分子量物种（二聚体或单体）。在相同条件下，该化合物不影响其他膜蛋白的寡聚化，这与其对 CAV1 的选择性相符。WL47 TFA 对寡聚体的破坏作用呈浓度依赖性，在浓度约为 1-10 uM 时达到最大效果。该化合物在标准实验室条件下稳定。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
文献中尚未报道WL47 TFA的体内研究。该化合物主要用作体外研究的生化工具，用于了解CAV1寡聚化及其功能后果。然而，鉴于WL47 TFA对CAV1具有高亲和力和选择性，它可能在动物模型中用于研究caveolin-1寡聚化在包括癌症、心血管疾病和神经退行性疾病在内的多种疾病中的作用。例如，在小鼠癌症模型中，破坏CAV1寡聚体可能影响肿瘤生长、血管生成或转移；在心脏病模型中，它可能影响心脏肥大或缺血再灌注损伤。然而，迄今为止尚未发表此类研究。WL47 TFA的体内药代动力学和耐受性尚不清楚。仅供研究使用；不可用于人体治疗。
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| 酶活实验 |
WL47 TFA 的标准非细胞检测方法是利用表面等离子共振 (SPR) 技术测量其与纯化 CAV1 蛋白的结合亲和力。重组人 CAV1（全长或支架结构域）在大肠杆菌或昆虫细胞中表达，并通过亲和层析纯化。CAV1 通过胺偶联固定在 CM5 传感器芯片上。在 25℃ 下，将浓度递增（0.1-1000 nM）的 WL47 TFA 溶液注入到固定化的 CAV1 表面，流动相为运行缓冲液（10 mM HEPES，pH 7.4，150 mM NaCl，0.005% Tween-20，0.1 mg/mL BSA），流速为 30-50 uL/min。记录结合（120 秒）和解离（300 秒）阶段。每个循环之间对传感器芯片表面进行再生。数据采用 1:1 Langmuir 结合模型进行拟合，以确定 ka（缔合速率常数）、kd（解离速率常数）和 Kd（平衡解离常数）。对于 CAV1 寡聚体破坏实验，将纯化的 CAV1 蛋白（10-50 ug）与 WL47 TFA（0-50 uM）在缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 8.0，150 mM NaCl，0.1% Triton X-100）中于 25°C 孵育 30 分钟。使用预先用相同缓冲液平衡的 Superose 6 柱，通过尺寸排阻色谱 (SEC) 分析 CAV1 的寡聚状态，并在 280 nm 处进行紫外检测。或者，也可以通过非还原性天然 PAGE 分析样品，然后用抗 CAV1 抗体进行免疫印迹分析。高分子量条带（>400 kDa）的消失和单体/二聚体条带（22 kDa 和 44 kDa）的出现表明寡聚体遭到破坏。
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| 细胞实验 |
WL47 TFA 的体外细胞实验在表达 caveolin-1 的细胞系（例如 HEK293、HeLa、MCF-7 或原代内皮细胞）中进行。细胞在添加 10% FBS 和 1% 青霉素-链霉素的 DMEM 培养基中，于 37℃、5% CO2 条件下培养。对于 CAV1 寡聚体破坏研究，将细胞接种于 10 cm 培养皿中，培养至 80-90% 汇合度。用 WL47 TFA（0.1-10 uM）处理细胞 1-24 小时。处理后，用 PBS 洗涤细胞，并在 RIPA 裂解缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1% Triton X-100、0.5% 脱氧胆酸钠、0.1% SDS、蛋白酶抑制剂混合物）中裂解。细胞裂解液经离心（12,000×g，10分钟，4℃）澄清。CAV1的寡聚状态通过交联（使用1 mM BS3交联剂）和SDS-PAGE电泳及Western blotting分析（使用抗CAV1抗体）进行评估。CAV1介导的信号通路（例如eNOS磷酸化、Src活性、ERK1/2磷酸化）的影响通过Western blotting（使用磷酸化特异性抗体）进行评估。在某些情况下，使用荧光标记配体和共聚焦显微镜或流式细胞术测量对caveolae依赖性内吞作用（例如霍乱毒素B亚单位或白蛋白的摄取）的影响。通过MTT法评估细胞活力，以确保化合物浓度不具有细胞毒性。化合物通常溶解于DMSO中，并用培养基稀释；最终DMSO浓度应≤0.1%。
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| 动物实验 |
由于 WL47 TFA 主要是一种生化工具，因此其体内动物研究并非标准流程。然而，若用于动物模型，典型的实验方案如下：使用雌性 BALB/c 小鼠（6-8 周龄，约 20 克）。将 WL47 TFA 配制于无菌 PBS 或生理盐水中（可添加或不添加 5% DMSO 以增强溶解度），并以 0.1-10 mg/kg 的剂量，每日一次或隔日一次，连续给药 1-14 天，通过腹腔注射 (IP) 或静脉注射 (IV) 给药。对照组仅接受溶剂（PBS + 5% DMSO）。研究终点取决于所研究的具体疾病模型。例如，在癌症模型（皮下异种移植）中，每 2-3 天测量一次肿瘤体积；在心血管模型中，可测量血压或心脏功能；在炎症模型中，可定量分析组织细胞因子水平。研究结束后，采集组织样本（例如肿瘤、心脏、肺、肝脏、肾脏、脑组织）用于分析 CAV1 寡聚化（通过非变性 PAGE 或 SEC）和下游信号通路（通过蛋白质印迹法）。所有动物实验均需事先获得机构动物护理和使用委员会的批准。对于 WL47 TFA 而言，此类研究仅为假设，因为目前尚无已发表的体内研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
WL47 TFA 的药代动力学 (PK) 特性尚未见报道。该化合物是一种基于肽的探针（分子量约为 1814 g/mol），口服生物利用度可能较低，因此任何潜在的体内应用都需要注射给药。该化合物的高溶解度（比母体肽 T20 的溶解度高 7500 倍）可能有利于其配制成肠外给药制剂。三氟乙酸盐 (TFA) 用于提高溶解度。WL47 TFA 的消除半衰期 (t1/2)、分布容积 (Vd) 和代谢途径尚不清楚。该化合物可能通过肾脏排泄或在体内发生蛋白水解降解而清除。目前尚无人体药代动力学数据。该化合物仅供研究使用，不得用于人体给药。
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| 参考文献 |
[1]. Amanda J H Gilliam,et al. Affinity-Guided Design of Caveolin-1 Ligands for Deoligomerization. J Med Chem. 2016 Apr 28;59(8):4019-25.
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| 其他信息 |
WL47 TFA 尚未获准用于临床，也未进行临床开发。它是一种用于研究 caveolin-1 (CAV1) 结构和功能的研究用肽探针。其作用机制包括与 CAV1 高亲和力结合 (Kd = 23 nM) 并有效破坏 CAV1 寡聚体，而 CAV1 寡聚体是 caveolae 的组成单元。通过破坏 CAV1 寡聚化，WL47 TFA 可以调节 caveolae 依赖性过程，包括内吞作用、机械转导以及 CAV1 相互作用蛋白（例如 eNOS、Src 激酶、GPCR）的信号区室化。该化合物比原始 T20 母体序列更小（缩短 80%）且溶解度更高（提高 7,500 倍），使其成为体外生化研究的理想工具。WL47 TFA 对 CAV1 具有选择性，而对 BSA、酪蛋白和 HEWL 等无关蛋白则无选择性。目前尚未注册任何临床试验。仅供研究使用；不可用于人类的诊断或治疗。
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| 分子式 |
C82H131N24F3O29S4
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| 相关CAS号 |
WL47
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~50 mg/mL (~25.74 mM)
H2O :~33.33 mg/mL (~17.16 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (1.29 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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