Uty HY Peptide (246-254) (TFA)

目录号: V76381 纯度: ≥98%
Uty HY Peptide (246-254) TFA是一种源自UTY蛋白的HY表位H-YDb,可用作男性特异性移植抗原HY。
Uty HY Peptide (246-254) (TFA) 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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10mg
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产品描述
Uty HY 肽 (246-254) TFA,一种源自 UTY 蛋白的 HY 表位 H-YDb,可作为雄性特异性移植抗原 HY 加以利用。
Uty HY肽(246-254)TFA是一种合成的9个氨基酸肽(序列:WMHHNMDLI),来源于小鼠Y染色体上普遍转录的四肽重复序列基因(UTY)。它作为H-YDb表位发挥作用,并被用作雄性特异性移植抗原。TFA盐可提高其水溶性和稳定性。
生物活性&实验参考方法
靶点
The peptide binds to the MHC class I molecule H‑2Dᵇ on the surface of antigen‑presenting cells. This complex is then recognized by CD8+ T‑cell receptors on cytotoxic T lymphocytes, leading to T‑cell activation and lysis of the presenting cells. In transplantation settings, this recognition underlies the rejection of male grafts by female recipients.
体外研究 (In Vitro)
以雌性小鼠脾细胞为效应细胞,雄性小鼠靶细胞(或经肽脉冲处理的雌性靶细胞)进行的体外细胞毒性试验表明,Uty HY肽(1-10 ug/mL)可特异性地增强表达H-2ᵇ的靶细胞对经雄性细胞免疫的雌性小鼠T细胞的裂解作用。这种裂解活性呈剂量依赖性,可通过⁵¹Cr释放或基于流式细胞术的杀伤试验进行测定。
体内研究 (In Vivo)
在H-2ᵇ单倍型雌性小鼠(例如C57BL/6)中,单次皮下或腹腔注射溶于弗氏完全佐剂(CFA)的Uty HY肽(50-200 ug)可诱导针对雄性细胞的强烈CD8+ T细胞反应。当这些免疫的雌性小鼠随后接受雄性皮肤移植时,移植片会以加速的、T细胞依赖的方式被排斥(中位生存时间<20天,而未免疫的雌性小鼠的中位生存时间>50天)。
酶活实验
肽与H-2Dᵇ分子之间的直接结合分析可采用表面等离子共振(SPR)或基于竞争的复性分析进行。在复性分析中,将重组H-2Dᵇ重链和β2-微球蛋白变性,然后稀释到含有Uty HY肽(10-100 uM)的复性缓冲液中。复性后的MHC-肽复合物可通过构象特异性抗体(例如28-14-8S)进行检测。或者,可将肽脉冲导入RMA-S细胞(一种抗原加工相关转运蛋白缺陷细胞系),并通过流式细胞术检测细胞表面H-2Dᵇ-肽复合物。
细胞实验
将RMA-S细胞(H-2ᵇ)与Uty HY肽(0.01-100 uM)在26℃下孵育过夜,以使外源肽与空载MHC I分子结合。然后将细胞转移至37℃孵育2小时以稳定复合物。使用抗H-2Dᵇ抗体(例如,克隆34-2-12)染色检测H-2Dᵇ-肽复合物的表面表达,并通过流式细胞术进行分析。对于T细胞活化实验,将雌性脾细胞与经肽脉冲和辐照处理的雄性脾细胞共培养5天,然后检测其细胞毒活性。
动物实验
将6-8周龄的C57BL/6雌性小鼠尾根部皮下注射100 μg Uty HY肽(溶于100 μL完全弗氏佐剂中)进行免疫。7-10天后,将取自雄性C57BL/6供体的全层皮肤移植到小鼠皮下进行攻击。每日通过目测和触诊监测移植片的存活情况;排斥反应定义为移植片坏死面积>90%。或者,也可以收集免疫小鼠的脾细胞,并进行体外细胞毒性试验。
药代性质 (ADME/PK)
由于快速蛋白水解,该肽在血浆中的半衰期非常短(<10分钟)。三氟乙酸盐不会改变这一点。该9肽足够小,可以被肾脏过滤并在肾小管中降解。为了诱导T细胞反应,必须将该肽配制成佐剂(例如,完全弗氏佐剂),以延长其在注射部位的停留时间并激活固有免疫。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
Uty HY肽在小鼠实验剂量(<200 μg)下无毒。CFA乳剂可引起局部注射部位反应(肉芽肿),极少数情况下会引起全身炎症反应。在此浓度下,TFA反离子不会导致毒性。尚未有遗传毒性或器官毒性的报道。
参考文献
[1]. Greenfield A, et al. An H-YDb epitope is encoded by a novel mouse Y chromosome gene. Nat Genet. 1996;14(4):474-478.
其他信息
Uty HY肽是一种明确的模型抗原,可用于研究CD8+ T细胞反应、移植免疫学和免疫耐受。它是H-2ᵇ单倍型中少数已知的H-Y表位之一。该肽广泛用于研究移植排斥机制、测试免疫抑制药物的疗效以及研究T细胞受体识别。它并非治疗药物,仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C55H78F3N15O15S2
相关CAS号
Uty HY Peptide (246-254);261172-28-5
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~12.5 mg/mL (~9.54 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (76.31 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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