| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TRFS-red selectively targets thioredoxin reductase (TrxR), a crucial selenoprotein in the cellular antioxidant defense system. The probe's structure includes a disulfide bond that is specifically reduced by the selenocysteine residue in the active site of TrxR. This reduction triggers an intramolecular cyclization reaction, which releases a highly fluorescent naphthalimide molecule. The spectral properties of TRFS-red are tuned for in vivo and in vitro imaging, allowing for the real-time monitoring of TrxR activity in living systems.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在活的HeLa细胞中，TRFS-red（1 μM；30-120分钟）产生红色荧光信号，且大部分红色荧光出现在胞质溶胶中[1]。在TEBU缓冲液中，TRFS-red（10 μM）在50 mM Tris-HCl和1 mM EDTA存在下，pH 7.4时的最大吸收波长约为530 nm[1]。TRFS-red在pH 5.5-8.5范围内均能显示稳定的荧光信号[1]。
体外实验表明，TRFS-red 是一种灵敏且选择性高的 TrxR 活性传感器。在含有纯化酶的无细胞体系中测试时，TRFS-red 对 TrxR 表现出高响应率和高灵敏度。当探针与重组 TrxR 在其辅因子 NADPH 存在下孵育时，观察到红色荧光强度显著增加，且呈浓度依赖性。该探针对其他常见的生物还原剂（如谷胱甘肽 (GSH) 和半胱氨酸）的响应极低，证实了其对 TrxR 的高选择性（Sec 依赖性）[25L22-L24] [3L36-L37]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
TRFS-red 专为活细胞成像而设计，用于在天然环境中可视化 TrxR 的活性。研究表明，TRFS-red 可渗透细胞，并产生主要分布于胞质溶胶（TrxR 主要亚型所在之处）的红色荧光信号。用 1 uM TRFS-red 处理 HeLa 细胞 30 至 120 分钟后，细胞内出现强烈的红色荧光信号，表明细胞内的 TrxR 酶能够有效还原该探针。当细胞预先用已知的 TrxR 抑制剂（如金诺芬或 DNCB）处理后，该信号显著降低，证实了其特异性 [25L26-L27]。
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| 酶活实验 |
使用 TRFS-red 进行 TrxR 酶活性测定可在 96 孔板中进行。向含有 100 uL 50 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.4）、2 mM EDTA、0.2 mg/mL BSA、50 uM TRFS-red 和不同浓度重组 TrxR1 的反应混合物中，加入 200 uM NADPH 于室温下启动反应。在动力学模式下监测 10-30 分钟内的荧光强度变化（激发波长 550 nm，发射波长 620 nm）。荧光强度变化的初始线性斜率与 TrxR 的浓度和活性成正比，从而可以确定探针的响应动力学和灵敏度。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞成像，将HeLa或其他贴壁细胞接种于玻璃底培养皿或96孔板中，并使其过夜贴壁。移除培养基，将细胞置于含1 uM TRFS-red的无血清培养基中，在37℃、CO2培养箱中孵育30-120分钟[3L38-L39]。对于抑制实验，细胞可预先用抑制剂（如金诺芬，1 uM）处理60分钟。孵育后，用PBS洗涤细胞两次以去除过量的探针。然后使用荧光显微镜或配备TRITC/Cy3滤光片组的高内涵成像系统对细胞进行成像。荧光强度可用于定量分析TrxR的相对活性。
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| 动物实验 |
TRFS-red 可用于小动物模型中 TrxR 活性的体内成像。典型的实验方案是将 TRFS-red（例如，溶于 100 μL 含 5% DMSO 的 PBS 缓冲液中）以 0.5-2 mg/kg 的剂量皮下或静脉注射 (iv) 至小鼠体内。随后用异氟烷麻醉动物，并使用配备适当激发和发射滤光片（例如，605 nm 激发，660 nm 发射）的体内成像系统 (IVIS) 进行全身荧光成像。在注射后不同时间点（例如，0、15、30、60 和 120 分钟）采集图像，以监测探针在不同组织中的激活情况。荧光信号的降低可能与 TrxR 活性改变的疾病状态相关，例如在小鼠中风模型中 [25L36-L37]。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TRFS-red 是一种用作诊断工具而非治疗药物的化学探针；因此，它不具备传统的药代动力学特性。其体内行为的特征在于其分布和清除，这对于成像应用至关重要。TRFS-red 的红移发射对其体内应用至关重要，因为它能够更深地穿透组织并最大限度地减少动物体内的自发荧光，从而为活体动物中 TrxR 活性的成像提供更高的信噪比。该探针可在脑组织等组织中被检测到，并随着荧光团的释放而随时间推移被清除。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
TRFS-red 是一种用于科研应用的荧光探针，并非治疗药物，因此通常不进行正式的毒性研究（例如 LD50）。作为一种科研化学品，应按照标准的实验室安全预防措施进行操作。该化合物已成功用于活细胞和体内成像，表明在有效剂量（例如体外 1 μM，体内 1-2 mg/kg）和暴露时间下，其通常无细胞毒性且耐受性良好。然而，释放的荧光团的作用尚未完全明确，因此始终建议谨慎使用。本品仅供科研使用，严禁用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TRFS-red 是首个用于硫氧还蛋白还原酶 (TrxR) 的红色发射“关-开”型探针 [3L24-L25]。它被开发为一种化学探针，用于研究细胞内氧化还原过程的动态变化，尤其是在氧化应激和疾病的背景下。它对于可视化与调控细胞生长和凋亡的信号通路相关的酶活性具有重要价值，尤其是在癌症研究中 [3L26-L29]。该探针具有改进的光谱特性，是研究 TrxR 系统在包括癌症和神经退行性疾病在内的各种疾病中作用的重要工具。它并非治疗药物，尚未获准用于临床，也未进行临床试验。
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| 分子式 |
C28H28CLN3O11S2
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|---|---|
| 分子量 |
682.12
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| 外观&性状 |
Brown to black solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~5 mg/mL (~7.33 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4660 mL | 7.3301 mL | 14.6602 mL | |
| 5 mM | 0.2932 mL | 1.4660 mL | 2.9320 mL | |
| 10 mM | 0.1466 mL | 0.7330 mL | 1.4660 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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