OVA (241-270) (TFA)

目录号: V76672 纯度: ≥98%
OVA (241-270) TFA 是一种非特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 肽,是由卵清蛋白产生的片段。
OVA (241-270) (TFA) 产品类别: Peptides | 多肽
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产品描述
OVA (241-270) TFA 是一种非特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 肽,是由卵清蛋白衍生的片段。
OVA (241-270) TFA 是一种合成的 30 个氨基酸肽片段,来源于鸡卵清蛋白 (OVA)。该肽段包含全长卵清蛋白的第 241 至 270 位氨基酸残基(序列:AKDSDEHHEGILQVYQTAYTPGAGGVIEV)。它是一种非特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 肽。该化合物以 TFA 盐的形式提供,以提高其溶解度和稳定性。这种研究级肽段可用于研究抗原加工和呈递、T 细胞识别以及免疫应答。它尤其适用于研究 MHC I 类和 II 类途径。
生物活性&实验参考方法
靶点
OVA (241-270) TFA contains multiple T cell epitopes that can be recognized by both CD4+ and CD8+ T cells after processing. In the context of antigen-presenting cells, this peptide is taken up, processed, and presented on MHC class I and class II molecules. It activates OVA-specific T cells (particularly OT-I and OT-II T cells) in a non-specific manner. This peptide enables the study of T cell activation, proliferation, and cytokine production. It is a non-specific activator of cytotoxic T lymphocytes (CTLs). It is a fragmented peptide of the OVA antigen. This peptide plays an important role in the immune system by activating CTLs, which are specialized immune cells that identify and kill infected or abnormal cells.
体外研究 (In Vitro)
在体外,OVA (241-270) TFA 被树突状细胞 (DC) 或其他抗原呈递细胞 (APC) 摄取后,经加工处理并呈递给 T 细胞。与可直接加载到 MHC I 类分子上的最小表位肽 OVA (257-264) 不同,较长的 OVA (241-270) 肽需要胞内加工处理。在基于细胞的检测中,将骨髓来源的树突状细胞 (BMDC) 与 OVA (241-270) (10-100 ug/mL) 脉冲孵育 2-4 小时,洗涤后与 OVA 特异性 CD8+ T 细胞 (OT-I) 或 CD4+ T 细胞 (OT-II) 共培养。T 细胞活化通过 CD69 表达、增殖(CFSE 稀释法)或细胞因子(IFN-γ、IL-2)产生进行检测。由于存在重叠表位,该肽可以引起 CD4+ 和 CD8+ T 细胞的反应。
体内研究 (In Vivo)
在体内,OVA (241-270) TFA 可用于启动 C57BL/6 小鼠的 T 细胞应答。将 OVA (241-270) 肽(每只小鼠 50-200 ug)乳化于弗氏完全佐剂 (CFA) 中,或与其他佐剂混合,通过皮下或腹腔注射免疫小鼠。或者,该肽也可以包裹在脂质体或纳米颗粒中递送。7-14 天后,收集脾细胞或淋巴结细胞,并在体外用该肽进行再刺激。通过细胞内细胞因子染色、ELISpot 或细胞毒性试验分析 T 细胞应答。较长的肽段可能与最小表位的加工方式不同,这有助于深入了解抗原加工途径。该肽段还有助于诱导 BALB/c 小鼠的迟发型超敏反应 (DTH)。
酶活实验
OVA (241-270) TFA 不用于无细胞酶活性测定。对于受体结合测定,由于该肽需要加工处理,因此不能直接使用。然而,可以进行 T 细胞杂交瘤活化测定来研究抗原呈递。将骨髓来源树突状细胞 (BMDC) 或脾脏来源的抗原呈递细胞 (APC) 接种于 96 孔板中(1×10⁵ 个细胞/孔)。加入 OVA (241-270) TFA (0.1-100 uM),孵育 2-4 小时。洗涤后,加入 OVA 特异性 T 细胞杂交瘤(例如,用于 CD8+ 反应的 B3Z 杂交瘤或其他用于 CD4+ 反应的杂交瘤),每孔 1×10⁵ 个细胞。18-24 小时后,通过 IL-2 生成(ELISA)或 lacZ 表达(使用 β-半乳糖苷酶比色底物,例如 CPRG)来检测活化情况。 T 细胞活化的 EC50 值由剂量反应曲线计算得出。
细胞实验
对于T细胞增殖实验,从OT-I转基因小鼠中分离CD8+ T细胞(或从OT-II小鼠中分离CD4+ T细胞)。使用基于磁珠的阴性选择法富集脾细胞。将分离的T细胞用CFSE(5 uM,10分钟,37℃)标记。将抗原呈递细胞(APC,辐照脾细胞或骨髓来源树突状细胞,BMDC)与OVA(241-270)和TFA(1-100 ug/mL)孵育2小时,然后充分洗涤以去除游离肽。将CFSE标记的T细胞以1:1的比例加入APC中。72小时后,使用流式细胞术通过CFSE稀释法检测T细胞增殖。或者,在24小时时通过CD69和CD25的表达来评估T细胞活化。为检测细胞因子生成,收集培养上清液48小时,并用ELISA法分析IFN-γ、IL-2、TNF-α(用于检测CD8+细胞)以及IL-4、IL-5、IL-13(用于检测CD4+ Th2细胞反应)。雌性BALB/c小鼠用于迟发型超敏反应(DTH)研究。OVA(241-270)TFA参与迟发型超敏反应的发生和发展。
动物实验
在免疫研究中,将雌性C57BL/6小鼠(6-8周龄,每组n=5-8)皮下注射OVA(241-270) TFA(每只小鼠100 μg),该肽乳化于完全弗氏佐剂(CFA)(体积比1:1)中,注射部位为尾根部或侧腹部。对照组仅注射CFA。第7天,小鼠接受相同剂量肽的加强免疫,但使用不完全弗氏佐剂(IFA)。第14天,收集脾脏和引流淋巴结(腹股沟和腘窝淋巴结)。制备单细胞悬液。为了检测抗原特异性记忆反应,将2×10⁵个脾细胞与OVA(241-270)肽(0-100 μg/mL)共培养48-72小时。收集上清液,用于多重检测或ELISA检测细胞因子。或者,可进行ELISpot检测以计数IFN-γ或IL-4斑点形成细胞。在迟发型超敏反应(DTH)研究中,BALB/c小鼠先用OVA(241-270)(100 μg溶于完全弗氏佐剂,皮下注射)进行免疫。第7天,在小鼠足垫或耳部皮内注射肽(50 μg溶于50 μL PBS)进行激发。24小时后,通过测量足垫肿胀(使用游标卡尺)或耳部厚度来评估DTH反应。该肽对DTH反应至关重要。
药代性质 (ADME/PK)
TFA盐的分子量为3535.92 Da,分子式为C156H247F3N34O53S1。冻干粉末应储存在密封容器中,于-80℃(2年)或-20℃(1年)下防潮保存。溶液储存应在密封防潮条件下,于-80℃保存6个月或于-20℃保存1个月。该肽通常可溶于DMSO(10-20 mg/mL)和PBS。TFA盐可提高其溶解度。工作溶液应新鲜配制或分装保存,以避免反复冻融。避免长时间暴露于光照和潮湿环境中。该化合物为白色或类白色固体。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
本产品仅供研究使用,不可用于人体治疗。目前尚无该肽的具体毒性数据。在用于T细胞检测的浓度(1-100 μg/mL)下,该肽通常无毒。TFA反离子在高浓度(例如>0.1% v/v)下可能具有细胞毒性,但在细胞培养中会被稀释至安全水平(最终TFA浓度<0.01%)。应遵循标准实验室安全操作规程,包括使用个人防护装备(手套、实验服、护目镜)。避免吸入粉末。该肽不适用于人体体内实验。动物实验应按照已批准的机构指南进行。该肽是一种研究工具,而非临床药物。
参考文献
[1]. Ming-Chieh Yang, et al. Buccal injection of synthetic HPV long peptide vaccine induces local and systemic antigen-specific CD8+ T-cell immune responses and antitumor effects without adjuvant. Cell Biosci. 2016 Mar 3;6:17.
其他信息
OVA (241-270) 是一种源自卵清蛋白的 30 肽,包含多个重叠表位,可被 CD4+ 和 CD8+ T 细胞识别。它是研究抗原加工、呈递和 T 细胞免疫的重要研究工具。它常被用作研究 MHC I 类和 II 类抗原呈递途径的模型抗原。该肽是一种非特异性 CTL 肽,这意味着它在加工后可以以抗原特异性但非 MHC 限制性的方式激活 CTL。它被广泛应用于多种免疫学研究,包括疫苗研究、免疫耐受机制、自身免疫性疾病模型和癌症免疫疗法。该肽源自 OVA 抗原。本产品并非药物,也未获得 FDA 批准。请勿包含供应商信息。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C156H247F3N34O53S1
相关CAS号
OVA (241-270);2648610-97-1
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO :~100 mg/mL (~28.28 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (0.71 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (0.71 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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