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目录号: V76694 纯度: ≥98%
NMNNAGDKWSAFLKEQSTLAQMYPLQEIQNLTVKLQLQALQQ 是一种 ACE(血管紧张素转换酶)2 (ACE2) 相关肽,可用于研究 ACE2 的功能。
NMNNAGDKWSAFLKEQSTLAQMYPLQEIQNLTVKLQLQALQQ 产品类别: Angiotensin Receptor
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
NMNNAGDKWSAFLKEQSTLAQMYPLQEIQNLTVKLQLQALQQ 是一种 ACE(血管紧张素转换酶)2(ACE2)相关肽,可用于研究 ACE2 的功能。
NMNNAGDKWSAFLKEQSTLAQMYPLQEIQNLTVKLQLQALQQ 是一种合成的长链肽,对应于人血管紧张素转换酶 2 (ACE2) 胞外结构域的一个重要片段。ACE2 是一种 I 型跨膜蛋白,是肾素-血管紧张素系统 (RAS) 的关键调节因子。该肽的分子量为 4835.47 g/mol,分子式为 C213H342N58O66S2,以研究级三氟乙酸 (TFA) 盐的形式提供,以提高其溶解度和稳定性。它主要用作研究工具,用于研究 ACE2 的功能,特别是其与其他蛋白质的相互作用以及其在催化血管紧张素 II (Ang II) 转化为血管舒张剂血管紧张素 (1-7) (Ang 1-7) 中的作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
This peptide is an ACE2-related peptide that spans a large portion of its N-terminal extracellular catalytic domain. Its primary utility is as a binding substrate or epitope for studying the interaction between ACE2 and other proteins, such as the SARS-CoV-2 spike protein or natural ligands like angiotensin II. While not an inhibitor itself, it can be used in competition assays to map binding sites. The parent protein, ACE2, is a zinc metalloprotease whose main physiological targets are Ang II and Ang I. By converting Ang II (a potent vasoconstrictor) into Ang 1-7 (a vasodilator), ACE2 plays a crucial counter-regulatory role within the RAS, protecting against hypertension, heart failure, and lung injury. This long peptide allows researchers to explore these binding and catalytic properties in a simplified, cell-free system.
体外研究 (In Vitro)
搜索结果中没有针对该特定肽段的体外活性数据。然而,全长ACE2蛋白的体外活性已得到充分证实。已知重组人ACE2 (rhACE2) 能有效从其底物血管紧张素II上切割C端苯丙氨酸残基,生成血管紧张素(1-7)。ACE2蛋白的酶活性可使用荧光肽底物进行测定,例如Mca-APK(Dnp)-OH,该底物在切割后会发出荧光。该长肽段代表受体结合域(RBD),更可能用于结合研究而非酶活性测定。它可能与ACE2的天然配体相互作用,从而阻断其与活性位点的结合。
体内研究 (In Vivo)
目前尚无该肽段的具体体内数据。然而,全长ACE2蛋白的生物学效应已被广泛研究。小鼠ACE2基因敲除会导致严重的血管紧张素II依赖性心肌收缩力缺陷、高血压以及肺损伤易感性增加。相反,在动物高血压、动脉粥样硬化和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型中,ACE2过表达或重组ACE2给药具有保护作用。该肽段可能用于体内阻断病毒蛋白与ACE2的相互作用,但其疗效尚未得到证实。由于它是ACE2的片段,预计其体内活性表现为竞争性结合剂而非催化酶。
酶活实验
无细胞ELISA结合试验可用于研究ACE2肽与其他蛋白质的相互作用。将96孔板用1-5 ug/mL的ACE2肽包被液包被于包被缓冲液中,4℃过夜。然后,用3% BSA的PBS-T缓冲液(含0.05% Tween-20)在室温下封闭1小时。将系列稀释的重组SARS-CoV-2刺突蛋白(S1亚基或RBD结构域,0.01-100 ug/mL)加入孔中,37℃孵育2小时。洗涤后,加入HRP标记的、特异性识别刺突蛋白His标签的抗体。用TMB底物显色,用H2SO4终止反应,并在450 nm处读取吸光度值。该方案用于绘制 ACE2 受体与病毒之间的相互作用图,长肽可用作阻断试剂来测试相互作用的特异性。
细胞实验
针对该特定肽段的细胞实验方案尚不完善。然而,研究人员可以进行基于细胞的流式细胞术结合实验。将表达ACE2的细胞(例如瞬时转染ACE2表达质粒的HEK293细胞或天然表达ACE2的A549人肺上皮细胞)分离并重悬于FACS缓冲液(PBS + 1% BSA)中。然后将细胞与不同浓度的ACE2相关肽段(例如0.1-100 uM)在冰上孵育30分钟。洗涤后,可以使用针对该肽段序列的特异性一抗(如有)检测结合的肽段,随后使用荧光标记的二抗。或者,也可以使用生物素标记的肽段,随后使用链霉亲和素-PE进行检测。最后,通过流式细胞术分析细胞。平均荧光强度(MFI)的变化表明发生了结合。该实验可用于测定肽与细胞表面 ACE2 受体的 Kd 值。
动物实验
该肽的体内研究方案可能包括使用异种移植小鼠模型进行成像研究。在成像实验中,可以将该肽与近红外 (NIR) 染料(例如 Cy5.5 或 IRDye 800CW)偶联,以构建光学示踪剂。为了研究肿瘤或炎症中 ACE2 的表达,将 5×10⁶ 个 ACE2 阳性肿瘤细胞(例如 A549 肺癌细胞)皮下注射到 6-8 周龄的雌性 BALB/c 裸鼠体内。当肿瘤体积达到 200-300 mm³ 时,通过尾静脉注射标记肽(5-10 mg/kg)。使用 IVIS Spectrum 或类似的成像系统在不同时间点(注射后 0、1、2、4、6、8 和 24 小时)进行体内成像。通过测量感兴趣区域(ROI)来量化肿瘤内的荧光强度,并使用过量的未标记肽(50-100 mg/kg)进行阻断实验以验证其特异性。实验结束时进行离体生物分布实验。
药代性质 (ADME/PK)
本产品为高纯度(≥98%)的冻干白色至类白色固体粉末。应密封保存于-20℃,防潮,可稳定保存长达3年。溶液长期保存建议于-80℃,保存时间不超过6个月。本产品在DMSO中的溶解度约为33.33 mg/mL(约6.89 mM)。体内给药的配制方案如下:将肽溶解于10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45%生理盐水的混合溶液中,配制成浓度≥2.5 mg/mL(0.52 mM)的澄清注射液。由于其分子量较高(4835.47 g/mol),本产品在循环系统中具有较长的半衰期,但主要通过网状内皮系统清除。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
本产品仅供研究使用,不可用于人体诊断或治疗。作为一种研究级肽,其含有三氟乙酸盐,因此尚无具体的毒性数据。如果浓度超过0.1%,三氟乙酸反离子在细胞培养中可能会产生问题,但在大多数体内和体外应用中,工作稀释度下不会造成此问题。应遵循标准的实验室安全操作规程,包括使用个人防护装备(PPE),例如手套和护目镜。主要注意事项是,由于其序列较长,必须小心处理和储存,以避免肽的降解和聚集。
其他信息
这种长链肽(序列由36个氨基酸组成)是一种研究ACE2相关蛋白-蛋白相互作用的工具。人ACE2蛋白是肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的关键组成部分,它通过将强效血管收缩剂血管紧张素II降解为血管舒张剂血管紧张素1-7来拮抗ACE的作用。该肽来源于与病毒刺突蛋白相互作用的区域,因此对传染病相关研究具有重要意义。三氟乙酸(TFA)盐是一种常用的合成抗衡离子,用于改善肽的理化性质,以用于研究应用。该肽的高分子量(约4835 Da)是蛋白质相互作用研究中使用的大型合成片段的典型特征。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C213H342N58O66S2
分子量
4835.47
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO :~33.33 mg/mL (~6.89 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.2068 mL 1.0340 mL 2.0681 mL
5 mM 0.0414 mL 0.2068 mL 0.4136 mL
10 mM 0.0207 mL 0.1034 mL 0.2068 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们