| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
LyP-1 TFA targets the p32 protein (also known as gC1qR or HABP1), a receptor that is overexpressed on the surface of tumor-associated cells, including cancer cells and tumor-associated macrophages, and is involved in mitochondrial function and cell adhesion.
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| 体外研究 (In Vitro) |
LyP-1 TFA 是一种肿瘤靶向肽，能够以高亲和力选择性地与 p32 受体结合。结合后，它会被细胞内吞。这种肽可用于将治疗药物或成像探针特异性地递送至肿瘤部位。研究表明，LyP-1 会在肿瘤中积聚，并被癌细胞摄取。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在 LyP-1 处理组中，LyP-1 TFA（8 周）显著降低了斑块的占据率和形成率。此外，与对照肽相比，LyP-1 处理后从缺氧斑块中释放的巨噬细胞凋亡率更高[1]。光学成像采用近红外荧光染料 (Cy5.5) 来识别 LyP-1 肽。在接种 4T1 细胞后的第 3、7、14 和 21 天，通过上肢中节指骨向荷瘤 BALB/c 小鼠注射 Cy5.5-LyP-1 (0.8 nmol)。肿瘤细胞接种后第3、7、14和21天，荧光强度分别为0.024、0.038、0.048和0.106×10⁶ photon/cm²/sec。这些值分别是对侧淋巴结的1.02、1.63、2.04和4.52倍。淋巴结中Cy5.5-LyP-1染色与LYVE-1共定位，提示LyP-1肽特异性结合于淋巴管[1]。
体内研究表明，LyP-1 TFA能够归巢至肿瘤部位并被癌细胞内化。LyP-1 TFA治疗8周可显著减少斑块形成和斑块占据，同时增加缺氧斑块中巨噬细胞的凋亡率，表明其在动脉粥样硬化和癌症治疗中具有潜在的应用价值。 |
| 酶活实验 |
为了测定 LyP-1 TFA 与重组 p32 蛋白的亲和力，我们进行了非细胞结合实验。表面等离子共振 (SPR) 实验是一种典型的方法。简而言之，重组 p32 蛋白通过胺偶联固定在 CM5 传感器芯片上。LyP-1 TFA 配制于运行缓冲液（10 mM HEPES、150 mM NaCl、0.005% Tween-20，pH 7.4）中，浓度范围为 1 nM 至 10 uM。监测结合（2-3 分钟）和解离（5-10 分钟）阶段。通过将传感器图拟合到 1:1 Langmuir 结合模型来计算解离常数 (KD)。或者，也可以进行 ELISA 结合实验。将 96 孔板用重组 p32 蛋白（1-5 ug/mL，溶于 PBS）包被，并在 4℃ 下过夜。将微孔板用 3% BSA 或 5% 脱脂牛奶封闭。加入系列稀释的生物素标记的 LyP-1 TFA（0.001-1000 nM），孵育 1-2 小时。洗涤后，加入 HRP 标记的链霉亲和素。用 TMB 底物显色，并在 450 nm 处测量吸光度。EC50 值由剂量反应曲线计算得出。在竞争性结合实验中，未标记的 LyP-1 TFA 与标记的示踪剂竞争结合位点。
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| 细胞实验 |
LyP-1 TFA 的细胞活性检测采用 p32 阳性癌细胞系，例如 MDA-MB-231（乳腺癌）、HeLa 或 A549（肺癌），或 p32 阳性肿瘤相关巨噬细胞。在结合和摄取研究中，将细胞接种于 96 孔板或 24 孔板的盖玻片上（1-5×10⁴ 个细胞/孔），并使其过夜贴壁。LyP-1 TFA 通过末端胺基或连接子进行荧光标记（例如，FITC、Cy5 或罗丹明），或与纳米颗粒/药物偶联。将荧光标记的肽以 0.1-10 uM 的浓度加入细胞中，并在 37℃ 下孵育 30-120 分钟。用冰冷的PBS缓冲液洗涤细胞以去除未结合的肽，然后使用荧光酶标仪测量荧光强度（激发/发射波长取决于荧光染料），或通过共聚焦显微镜观察（DAPI用于细胞核染色，LyP-1荧光染料用于肽段染色）。在竞争性实验中，细胞在加入标记肽之前，先用10-100倍过量的未标记LyP-1 TFA（0.1-1 mM）预孵育30分钟。在细胞毒性实验中，细胞用LyP-1 TFA（0.1-100 uM）处理24-72小时，并通过MTT或CellTiter-Glo检测细胞活力。在细胞凋亡实验中，细胞用Annexin V-FITC/PI染色，并通过流式细胞术进行分析。在药物递送研究中，LyP-1 与化疗药物（例如，阿霉素、紫杉醇）或纳米颗粒偶联。细胞用偶联物（药物当量为 0.01-10 uM）处理 24-72 小时。在巨噬细胞极化研究中，THP-1 来源的巨噬细胞用 LyP-1 TFA（1-50 uM）处理，并通过流式细胞术检测 M1 和 M2 标志物（CD86、CD206）来评估其极化状态。
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| 动物实验 |
体内动物实验采用小鼠肿瘤异种移植模型（例如，MDA-MB-231乳腺癌、A549肺癌）或动脉粥样硬化模型（ApoE-/-小鼠）。在肿瘤靶向研究中，将5×10⁶个p32阳性肿瘤细胞皮下植入6-8周龄雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到100-200 mm³时，经尾静脉注射荧光标记的LyP-1 TFA（0.1-2 mg/kg）。在不同时间点（0.5、1、2、4、8、12、24小时），处死小鼠，并采集器官（肿瘤、肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺）和血液。使用IVIS荧光成像系统对组织进行成像，并量化荧光强度。或者，也可以通过荧光显微镜观察冷冻组织切片，从而观察标记肽的分布。在治疗研究中，将与药物（例如阿霉素）或毒素偶联的 LyP-1 定期（例如每 3 天或每 7 天一次，持续 2-4 周）静脉注射。使用游标卡尺测量肿瘤体积，并监测生存情况。在动脉粥样硬化研究中，将 6-8 周龄的雄性 ApoE-/- 小鼠喂食高脂饮食 8-12 周以诱导斑块形成。每周 3 次腹腔注射（1-10 mg/kg）或静脉注射（0.5-5 mg/kg）LyP-1 TFA，持续 8 周。治疗结束后，处死小鼠，切取主动脉，固定后用油红 O 染色以定量斑块面积。对主动脉根部的冰冻切片进行 H&E 染色和巨噬细胞（Mac-2 或 CD68）染色。通过 TUNEL 染色评估细胞凋亡。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
LyP-1 TFA 是一种环状肽（分子量约为 1106 Da）。作为一种肽，其药代动力学特征是肾清除迅速且在血浆中易被蛋白酶降解，导致半衰期短（未修饰肽的半衰期通常小于 30 分钟）。与线性肽相比，环状结构（二硫键）赋予其一定的抗蛋白酶稳定性，但半衰期仍然较短。TFA 盐可提高其溶解度。其分布容积仅限于血管腔和高灌注组织。该肽主要经肾脏排泄。为了改善其在治疗应用中的药代动力学，LyP-1 通常与纳米颗粒、聚合物（例如 PEG）偶联或封装于脂质体中，这可以延长循环时间并通过 EPR 效应增强肿瘤蓄积。详细的参数（Tmax、Cmax、AUC、t½、CL、Vd）尚未标准化，取决于偶联物的配方。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
LyP-1 TFA 是一种研究工具，而非治疗药物。未修饰肽的毒性数据尚未发表。动物研究表明，小鼠静脉或腹腔注射剂量高达 10 mg/kg 的未偶联 LyP-1 肽耐受性良好，未出现明显的毒性反应或显著的体重下降。主要毒性可能与载体（药物、毒素、纳米颗粒）有关，而非 LyP-1 肽本身。TFA 反离子可能引起刺激。应遵循肽类操作的标准安全预防措施。
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| 参考文献 |
[1]. Fan Zhang, et al.Imaging tumor-induced sentinel lymph node lymphangiogenesis with LyP-1 peptide. Amino Acids. 2012 Jun;42(6):2343-51.
[2]. Ningning Song, et al. Recent progress in LyP-1-based strategies for targeted imaging and therapy. Drug Deliv. 2019 Dec;26(1):363-375. |
| 其他信息 |
LyP-1（序列：CGNKRTRGC）是一种通过噬菌体展示技术发现的环状肽。其靶点p32（gC1qR）是一种多功能蛋白，在多种实体瘤和缺氧区域的肿瘤相关巨噬细胞中过表达。该肽与肿瘤细胞结合后可被其内吞，有利于细胞内药物递送。LyP-1已被用于肿瘤成像、靶向药物递送和肿瘤生物学研究。目前仅供研究使用，尚未获得临床应用的监管批准。三氟乙酸盐形式可提高其溶解度和稳定性。
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| 分子式 |
C38H66F3N17O14S2
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| 相关CAS号 |
LyP-1;454487-07-1
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~90.40 mM)
H2O :~100 mg/mL (~90.40 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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