| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
LAH4 targets anionic lipids present in the outer membrane of bacterial membranes, as well as anionic phospholipids in eukaryotic cell membranes, enabling it to disrupt membranes and deliver nucleic acids across lipid bilayers.
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| 体外研究 (In Vitro) |
LAH4 TFA能够与DNA复合，结合细胞表面膜，并在被包裹于内体中时，在pH值下降时导致内体膜破裂[1]。LAH4 TFA对质粒DNA具有很强的转染能力。体外实验表明，LAH4家族肽段能够有效地用siRNA处理人细胞系[2]。LAH4 TFA通过内体酸化和蛋白酶体途径的加工，介导蛋白质和核苷酸货物的胞内递送。这促进了蛋白质的内化，并增强了树突状细胞向CD8+ T细胞呈递蛋白质抗原的能力。此外，LAH4 TFA还能增强CpG的内化，从而激活NF-κB并放大CpG的佐剂效应[3]。枯草芽孢杆菌和大肠杆菌对LAH4 TFA的抗菌特性具有耐药性。然而，在杀菌剂量下，该肽不会溶解人类红细胞。比较 pH 5 和 pH 7.5 时，LAH4 TFA 的抗菌活性显著增强了两个数量级[4]。
LAH4 TFA 对革兰氏阴性菌（大肠杆菌）和革兰氏阳性菌（枯草芽孢杆菌）均具有抗菌活性。在 pH 5 时，其抗菌活性比 pH 7.5 时高两个数量级。重要的是，该肽在杀菌浓度下不会裂解人红细胞。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内模型已证实LAH4对细菌感染具有抗菌功效。然而，关于LAH4 TFA的详细体内动物实验数据有限。由于其具有较高的质粒DNA递送能力，该肽主要用于体外基因递送研究。
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| 酶活实验 |
LAH4的非细胞结合分析通常采用表面等离子共振（SPR）或基于脂质体的分析方法。对于SPR，由阴离子脂质（例如，1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，POPG）和中性脂质（例如，1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，POPC）组成的磷脂囊泡（脂质体）通过聚碳酸酯膜挤出制备，以获得均一的粒径（直径100-200 nm）。脂质体固定在疏水性L1传感器芯片上，如果使用生物素化脂质，则固定在链霉亲和素芯片上。在运行缓冲液（10 mM HEPES，150 mM NaCl，pH 5.0 或 7.5）中，将浓度范围为 1 nM 至 10 uM 的 LAH4 TFA 溶液流过芯片。实时监测结合情况，并通过将传感器图拟合到 1:1 或双态结合模型来计算动力学参数（ka、kd、KD）。对于脂质体泄漏测定，将脂质体加载自猝灭浓度（50-100 mM）的羧基荧光素。将脂质体与 LAH4 TFA（0.1-10 uM）孵育，并随时间测量染料释放后的荧光去猝灭情况（激发波长 490 nm，发射波长 520 nm）。泄漏百分比相对于 0.1% Triton X-100 完全裂解后的脂质体计算。对于等温滴定量热法 (ITC)，用 LAH4 滴定脂质囊泡，以测量膜结合的热力学参数（ΔH、ΔS、ΔG），并确定结合化学计量。
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| 细胞实验 |
LAH4 TFA 的细胞活性测定采用细菌菌株（大肠杆菌、枯草芽孢杆菌）和哺乳动物细胞系（HEK293、HeLa、CHO）进行转染研究。抗菌活性测定中，细菌在 LB 培养基中过夜培养，稀释至 OD600 值约为 0.001，然后在 96 孔板中与浓度为 0.1-100 uM 的 LAH4 TFA 于 37℃ 孵育 16-20 小时。最小抑菌浓度 (MIC) 定义为抑制可见细菌生长（OD600 < 0.05）的最低浓度。杀菌活性测定中，细菌用 2×、4× 和 8× MIC 的 LAH4 处理 2 小时，然后进行系列稀释，涂布于 LB 琼脂平板上，过夜培养后计数菌落形成单位 (CFU)。在核酸转染实验中，将编码报告基因（例如GFP、荧光素酶）的质粒DNA与LAH4 TFA以不同的N/P比（LAH4氨基与DNA磷酸基团的比例，通常为2:1至10:1）形成复合物。复合物的形成方法是将DNA（0.5-1 ug）与LAH4在无血清培养基中混合，并在室温下孵育20-30分钟。将24孔或96孔板中汇合度为70-80%的细胞用上述复合物在无血清培养基中处理2-4小时，然后更换为含10% FBS的完全培养基。24-48小时后，通过检测GFP荧光（使用荧光显微镜或流式细胞仪）或荧光素酶活性（使用酶标仪并添加荧光素底物）来测量转染效率。在哺乳动物细胞毒性试验中，细胞用 LAH4 TFA（1-100 uM）处理 24 小时，然后使用 MTT 或 CellTiter-Glo 法评估细胞活力。溶血试验使用收集于 EDTA 抗凝管中的人红细胞 (hRBC)，用 PBS 洗涤，并重悬至 1-2% 的血细胞比容。将 hRBC 与 LAH4 TFA（0.1-1000 uM）在 PBS 中于 37℃ 下振荡孵育 1 小时。离心后，在 540 nm 处测量上清液中的血红蛋白含量，并使用 0.1% Triton X-100 来判断溶血是否达到 100%。研究表明，LAH4 在杀菌浓度下引起的溶血作用极小（<5%）。
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| 动物实验 |
在小鼠细菌感染模型中进行了LAH4 TFA的体内疗效研究。将6-8周龄的雌性BALB/c或C57BL/6小鼠腹腔注射致死剂量的大肠杆菌（1-5×10⁷ CFU）或金黄色葡萄球菌。通常在感染后30分钟至2小时内，以1-20 mg/kg的剂量腹腔或静脉注射LAH4 TFA。监测小鼠存活5-7天。对于组织负荷研究，小鼠按上述方法感染，6-24小时后，通过心脏穿刺采集血液，并取出肝脏、肾脏和脾脏等器官，匀浆后接种于LB琼脂平板上进行菌落计数。为评估全身毒性，健康小鼠单次接受 LAH4 TFA（1-50 mg/kg，腹腔注射或静脉注射），并监测 7 天，观察包括体重、行为和食物摄入量变化在内的毒性迹象。采集血液样本进行血清生化（ALT、AST、肌酐、BUN）和血液学（CBC）分析。为研究生物分布，小鼠注射荧光标记的 LAH4 肽，并在注射后不同时间点使用 IVIS 成像系统进行成像。其他给药途径包括气管内给药（用于肺部感染模型）或皮下给药（用于皮肤感染模型）。目前关于 LAH4 在动物模型中的详细药代动力学参数报道较少。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于 LAH4 TFA 是一种研究用肽而非临床候选药物，因此其药代动力学数据尚未得到充分表征。LAH4 是一种由约 24-26 个氨基酸组成的肽（分子量约为 2500-3000 Da），易受血清蛋白酶的蛋白水解降解，并迅速被肾脏清除。静脉注射后，其在啮齿动物体内的半衰期预计较短（数分钟至不足 1 小时）。该肽预计无法穿过血脑屏障。虽然目前尚无公开数据，但需要使用放射性标记或荧光标记的 LAH4 在小鼠体内进行组织分布研究，以进行详细的表征。三氟乙酸盐 (TFA) 形式可改善溶解度和操作性能，但不会显著改变其药代动力学行为。在研究应用中，LAH4 通常采用局部给药（瘤内或腹腔注射）而非全身给药，以在最大限度减少全身暴露的同时达到足够的局部浓度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
LAH4 TFA 的急性毒性已通过溶血试验进行评估，结果表明，在杀菌浓度下，LAH4 不会溶解人红细胞。浓度高达 1000 μM 时，溶血率仍低于 5%，与 Triton X-100 对照组相比。在培养的哺乳动物细胞（HEK293、HeLa）中，LAH4 表现出浓度依赖性细胞毒性，IC50 值通常大于 50 μM，表明其具有抗菌应用的治疗窗口。在小鼠急性毒性研究中，腹腔或静脉注射剂量高达 20 mg/kg 的 LAH4 TFA 通常耐受性良好，未观察到明显的体重减轻、行为改变或死亡。在较高剂量（50-100 mg/kg）下，急性毒性症状可能包括嗜睡、竖毛和轻度胃肠道不适。小鼠的LD50值尚未精确测定，但据估计腹腔注射给药的LD50值大于50 mg/kg。尚未进行慢性毒性、致癌性或生殖毒性研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
LAH4 是一种两亲性肽，最初基于抗菌肽 magainin 设计，已被研究用于抗菌治疗和核酸递送等领域。该肽由 24 个氨基酸组成（序列：KKLLKKLLKKLLKKKLLKKLLKKLLK）。它对细菌外膜中的阴离子脂质具有很强的亲和力，这使其对细菌而非宿主细胞（宿主细胞主要由两性离子膜构成）具有选择性抗菌活性。其 pH 依赖性活性（pH 5 时活性比 pH 7.5 时高两个数量级）表明，LAH4 在酸性环境中可能特别有效，例如感染部位、肿瘤微环境或细胞摄取后的内体。这种 pH 敏感性也增强了其破坏内体膜并将核酸递送到细胞质的能力，使其成为基因治疗应用的一种很有前景的工具。 LAH4 是一种细胞穿透肽 (CPP)，已被用于将质粒 DNA、siRNA 和其他核酸载体递送至细胞内。该化合物仅供研究使用，尚未获得临床应用的监管批准。
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| 分子式 |
C134H229F3N38O29
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|---|---|
| 分子量 |
2893.55
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| 相关CAS号 |
LAH4;184776-51-0
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~34.56 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 25 mg/mL (8.64 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3456 mL | 1.7280 mL | 3.4560 mL | |
| 5 mM | 0.0691 mL | 0.3456 mL | 0.6912 mL | |
| 10 mM | 0.0346 mL | 0.1728 mL | 0.3456 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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