KSPWFTTL TFA

目录号: V76845 纯度: ≥98%
KSPWFTTL TFA 是 p15E 跨膜蛋白的免疫显性 Kb 限制性表位。
KSPWFTTL TFA 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
KSPWFTTL TFA 是 p15E 跨膜蛋白上的一种免疫优势 Kb 限制性表位。KSPWFTTL TFA 可以恢复肿瘤细胞系对 AKR/Gross MuLV 抗细胞毒性 T 淋巴细胞的敏感性。
KSPWFTTL TFA 是一种免疫优势的 Kb 限制性表位,来源于内源性嗜性鼠白血病病毒的 p15E 跨膜蛋白。这种合成肽用于免疫学研究,以研究 CD8+ T 淋巴细胞反应和病毒免疫学。三氟乙酸 (TFA) 盐可提高肽的溶解度和稳定性。
生物活性&实验参考方法
靶点
KSPWFTTL TFA targets the immune system, specifically serving as an antigen that binds to MHC class I molecules (Kb-restricted). It is recognized by cytotoxic T lymphocytes (CTLs) specific to the p15E epitope, facilitating T-cell activation and target cell lysis. The peptide is presented by the H-2Kb MHC molecule on antigen-presenting cells, leading to CTL-mediated killing.
体外研究 (In Vitro)
由逆转录病毒 p15 TM 包膜蛋白产生 KSPWFTTL TFA。用 KSPWFTTL TFA 肽脉冲处理后,细胞溶解性 T 淋巴细胞 (CTL) 不敏感变异株 cl.18-5 克隆系变得易受抗病毒 CTL 裂解[2]。
KSPWFTTL TFA 源自逆转录病毒 p15 TM 包膜蛋白。在无细胞实验中,通过表面等离子共振或 ELISA 测定其与纯化的 H-2Kb MHC 分子的结合亲和力,通常表现出高纳摩尔至低微摩尔的亲和力。该肽与 MHC 形成稳定的复合物,从而能够被特异性 T 细胞受体识别。
体内研究 (In Vivo)
在基于细胞的检测中,对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)不敏感的变异株cl.18-5克隆系用KSPWFTTL TFA肽进行脉冲处理。脉冲处理后,细胞变得易受针对p15E表位的抗病毒CTL裂解。该肽可恢复细胞对CTL介导的杀伤作用的敏感性,这可通过标准的铬-51释放试验或基于流式细胞术的细胞毒性试验进行测量。
酶活实验
采用无细胞MHC-肽结合实验测定KSPWFTTL TFA与H-2Kb的结合亲和力。将纯化的可溶性H-2Kb分子与荧光参考肽和不同浓度(1-100 uM)的KSPWFTTL TFA孵育。过夜孵育后,通过尺寸排阻色谱或抗MHC捕获分离结合的和游离的肽,并测量荧光强度以计算IC50值。
细胞实验
小鼠肿瘤细胞系 cl.18-5(一种 Rauscher 病毒诱导的 RBL-5 白血病变异株)培养于含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中。细胞用 KSPWFTTL TFA(1-100 uM)在 37℃ 下脉冲处理 2-4 小时,然后洗涤。将这些经肽脉冲处理的靶细胞与抗病毒 CTL 以不同的效应细胞与靶细胞比例(例如 10:1 至 100:1)共培养 4 小时。采用标准的铬-51 释放试验或铕释放试验检测特异性裂解。
动物实验
体内实验在C57BL/6小鼠中进行。小鼠皮下注射KSPWFTTL TFA(50-100 μg),该肽乳化于弗氏完全佐剂中。7-10天后,收集脾细胞,并在体外用肽进行再次刺激。在攻毒实验中,将肽脉冲靶细胞(例如,用CFSE或铬-51标记的脾细胞)静脉注射,并在18-24小时后通过分析靶细胞回收率来测量体内细胞毒性。
药代性质 (ADME/PK)
KSPWFTTL TFA 的分子量为 1093.15 Da(游离碱),分子式为 C50H71N10O14。TFA 反离子可提高其水溶性,报道的水溶性为 66.67 mg/mL。该肽粉末在 -80℃ 下可稳定保存 2 年,或在 -20℃ 下可稳定保存 1 年。溶液状态下,应密封保存于 -80℃ 下 6 个月,或在 -20℃ 下 1 个月,并避免受潮。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
KSPWFTTL TFA 少量用于免疫学研究,在典型的实验浓度下(体外 1-100 μM,体内每只小鼠 50-100 μg)通常无毒。尚未有明显的急性或慢性毒性报道。处理该肽时应遵循标准的实验室安全防护措施(戴手套、穿实验服、戴护目镜)。
参考文献

[1]. An immunodominant Kb-restricted peptide from the p15E transmembrane protein of endogenous ecotropic murine leukemia virus (MuLV) AKR623 that restores susceptibility of a tumor line to anti-AKR/Gross MuLV cytotoxic T lymphocytes. J Virol. 1994 Feb;68(2):897-904.

[2]. Antiretroviral cytolytic T-lymphocyte nonresponsiveness: FasL/Fas-mediated inhibition of CD4(+) and CD8(+) antiviral T cells by viral antigen-positive veto cells. J Virol. 1999 May;73(5):3826-34.

其他信息
KSPWFTTL TFA 是一种仅供研究使用的肽,尚未获准用于临床。KSPWFTTL 序列代表一种免疫优势表位,可被 CD8+ T 细胞在 H-2Kb MHC I 类分子背景下识别。它被广泛用作模型抗原,用于研究小鼠模型中的细胞毒性 T 淋巴细胞反应、病毒免疫学和癌症免疫疗法。该肽来源于 AKR/Gross 鼠白血病病毒 (MuLV) 的 p15E 蛋白。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C50H71F3N10O14
相关CAS号
KSPWFTTL;153049-05-9
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~66.67 mg/mL (~60.99 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (91.48 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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