| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Kallikrein[1]
KKI-5 TFA targets tissue kallikrein (also known as kallikrein 1), a serine protease that cleaves kininogen to release the vasoactive peptide kallidin (lysyl-bradykinin). The KKI-5 peptide encompasses the aa388-389 kallikrein proteolytic site in kininogen-1, and thus acts as a competitive inhibitor, binding to the active site of kallikrein and preventing the cleavage of natural substrates such as kininogen. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
牛激肽原-1的氨基酸序列386-391（包含激肽释放酶的蛋白水解位点388-389）与KKI-5肽段等效。由于合成的KKI-5能够降低乳腺癌细胞的侵袭能力，因此其在癌细胞侵袭和转移中的作用正受到研究[1]。
在无细胞实验中，KKI-5 TFA 可抑制纯化组织激肽释放酶的酶活性。该抑制作用可使用荧光肽底物（例如 Z-Phe-Arg-AMC）进行测定。将激肽释放酶与底物和不同浓度（0.1-100 uM）的 KKI-5 TFA 孵育；荧光强度（激发波长 360 nm/发射波长 460 nm）的降低表明存在抑制作用。激肽释放酶抑制的 IC50 值通常在低微摩尔范围内。KKI-5 也可能抑制纤溶酶。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在乳腺癌细胞系（例如MDA-MB-231、MCF-7）中，KKI-5 TFA（10-100 uM）可降低癌细胞的侵袭能力，该结果通过Matrigel Transwell侵袭实验测定。将细胞接种于含有KKI-5 TFA的上室，并使其穿过Matrigel基质胶向趋化因子（例如10% FBS或生长因子）方向侵袭。该肽在这些浓度下可减弱细胞侵袭，且对细胞活力无显著影响，表明其作用机制是抑制细胞迁移而非产生细胞毒性。
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| 酶活实验 |
在无细胞荧光测定中，将纯化的人类组织激肽释放酶（激肽释放酶 1）与荧光底物 Z-Phe-Arg-AMC (50 uM) 在含有 0.1% BSA 的 Tris-HCl 缓冲液 (pH 8.0) 中孵育。加入不同浓度 (0.1-100 uM) 的 KKI-5 TFA，并在 37℃ 下孵育 30-60 分钟。测量荧光强度（激发波长 360 nm，发射波长 460 nm）。根据剂量反应曲线计算 IC50 值。对照组包括不添加抑制剂和已知的激肽释放酶抑制剂（例如抑肽酶）。
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| 细胞实验 |
MDA-MB-231乳腺癌细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中。侵袭实验中，Transwell小室（孔径8 um）用100 uL浓度为1 mg/mL的Matrigel包被，待其凝固。将5×10⁴个细胞（溶于200 uL无血清培养基）接种于上室，并加入不同浓度的KKI-5 TFA（0-100 uM）。下室加入600 uL含10% FBS的培养基作为趋化因子。24-48小时后，用棉签去除上室膜表面未侵袭的细胞，并将下室膜表面侵袭的细胞固定，用结晶紫染色，并在显微镜下计数。
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| 动物实验 |
KKI-5 TFA 可在乳腺癌转移小鼠模型中进行评估。例如，将 MDA-MB-231-luc2 细胞经尾静脉注射建立肺转移模型。小鼠每日或隔日接受 KKI-5 TFA（例如，10-50 mg/kg）腹腔或静脉注射治疗，持续 3-4 周。通过生物发光成像（检测荧光素酶标记细胞）或离体肺组织分析（例如，计数转移结节）监测肿瘤转移负荷。该肽有望减少转移性定植。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
KKI-5 TFA 是一种合成肽，分子量为 887.90 Da，分子式为 C37H56N11O11（含 TFA）。TFA 盐可提高其溶解度。由于其易被蛋白水解降解和肾脏清除，该肽的半衰期很短（仅几分钟），因此在体内研究中需要频繁给药或持续输注。它可以配制成注射用无菌水或 PBS 溶液。对于长期研究，与 PEG 偶联或制成缓释微粒可能更有益。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
KKI-5 TFA 在研究剂量（小鼠 10-50 mg/kg）下通常耐受性良好。尚未有报道出现明显的全身毒性或器官损伤。由于激肽释放酶抑制可能影响血压调节，因此建议在某些研究设计中密切监测血流动力学参数。应遵循标准的实验室安全预防措施（佩戴手套、穿实验服）。该化合物仅供研究使用，不得用于人类治疗。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
KKI-5 TFA 是一种仅供研究使用的组织激肽释放酶肽抑制剂。其序列 Ac-PFRSVQ-NH2 对应于牛激肽原-1 中的激肽释放酶蛋白水解位点（氨基酸残基 386-391）。最初，它被描述为一种新型丝氨酸蛋白酶抑制剂，可同时抑制激肽释放酶和纤溶酶，并具有抗乳腺癌细胞侵袭和转移的抗癌活性。KKI-5 TFA 也可能具有治疗血管性水肿的潜力。尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C37H56F3N11O11
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|---|---|
| 分子量 |
887.90
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| 相关CAS号 |
KKI-5;97145-43-2
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~9.09 mg/mL (~10.24 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 12.5 mg/mL (14.08 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1263 mL | 5.6313 mL | 11.2625 mL | |
| 5 mM | 0.2253 mL | 1.1263 mL | 2.2525 mL | |
| 10 mM | 0.1126 mL | 0.5631 mL | 1.1263 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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