| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IKK-α IKK-β
LUBAC (linear ubiquitin chain assembly complex), specifically the HOIP (HOIL-1L-interacting protein) catalytic subunit. HOIPIN-1 is a small-molecule inhibitor of LUBAC, which is the only E3 ubiquitin ligase that generates linear (M1-linked) polyubiquitin chains. LUBAC, composed of HOIP, HOIL-1L, and SHARPIN, is critical for TNF-alpha-induced NF-kappaB activation and for protecting cells from TNF-induced cell death (apoptosis and necroptosis). HOIPIN-1 binds to HOIP and blocks its E3 ligase activity, thereby preventing the linear ubiquitination of substrates such as NEMO (IKKgamma), RIPK1, and others. This inhibits the canonical NF-kappaB pathway and sensitizes cells to TNF-induced cell death. HOIPIN-1 is selective for LUBAC over other E3 ligases. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在基于HTRF的LUBAC介导的泛素化研究中，使用了Petit-LUBAC。抑制活性随HOIPIN-1（0.9-120 μM）在反应缓冲液中预孵育时间的延长而增强。在1 h、3 h、6 h和24 h时，IC50值分别为26 μM、26 μM、26 μM和3.926 μM [1]。当LUBAC亚基在HEK293T细胞中共表达时，细胞内线性多聚泛素的量增加。在表达LUBAC的HEK293T细胞中，HOIPIN-1（1-30 μM）呈剂量依赖性地降低细胞内线性多聚泛素的量[1]。在Hela细胞中，HOIPIN-1（30-100 μM；30-60分钟）可降低IKKα/β、p105和p65的磷酸化水平，并抑制IL-1β诱导的NF-κB激活[1]。在Hela细胞中，HOIPIN-1（10-100 μM）呈剂量依赖性地抑制IL-1β激活的NF-κB靶基因（包括TNF-α和ICAM1）的表达[1]。线性泛素链组装复合物（LUBAC）的组成成分包括HOIL-1L、HOIP和SHARPIN。HOIPIN-1可抑制HOIL-1L/HOIP复合物、HOIL-1L/HOIP/SHARPIN复合物和HOIP/SHARPIN复合物的线性多聚泛素化活性，其IC50值分别为4.4 μM、3.5 μM和3.7 μM[2]。根据 ATP 含量，HOIPIN-1 (1-100 μM; 72 小时) 未表现出明显的细胞毒性；然而，它确实在 A549 细胞中显示出细胞毒性，在这些细胞中的 IC50 > 100 μM[2]。
体外生化实验表明，HOIPIN-1 能以 0.8 uM 的 IC50 值抑制 LUBAC 介导的线性泛素化。在 HeLa、HEK293T 或 HT-29 细胞的细胞实验中，用 HOIPIN-1（1-20 uM）处理 4-24 小时可降低线性泛素链的水平（通过 M1 特异性抗体检测）。HOIPIN-1 还能抑制 TNF-α 诱导的 NF-κB 活化，表现为 IκBα 磷酸化和降解减少，以及 p65 核转位减弱。 HOIPIN-1 可增强细胞对 TNF 诱导的细胞死亡的敏感性：TNF (10-20 ng/mL) 与 HOIPIN-1 (5-10 uM) 共同处理 24 小时会导致细胞活力显著下降（MTT 或 LDH 释放），这种下降可被 caspase 抑制剂（z-VAD-fmk）或坏死性凋亡抑制剂（坏死抑制剂-1）阻断，具体取决于细胞类型。HOIPIN-1 单独使用时，浓度高达 20 uM 时细胞毒性极低。它还能阻断 LUBAC 募集至 TNFR1 复合物。这些特性使其成为研究线性泛素化的宝贵工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
HOIPIN-1 已在小鼠模型中进行体内研究。在 TNF 诱导的全身炎症反应综合征 (SIRS) 模型中，预先腹腔注射 HOIPIN-1（10-30 mg/kg）可增强 TNF 诱导的死亡率，证实 LUBAC 对 TNF 休克具有保护作用。在急性结肠炎（DSS 诱导）小鼠模型中，每日腹腔注射 HOIPIN-1（10 mg/kg）可加重结肠炎，导致体重减轻、结肠缩短和炎症评分升高。在皮肤炎症（咪喹莫特诱导的银屑病）模型中，HOIPIN-1 可减轻疾病严重程度？但根据具体情况，其作用可能相反。在癌症模型中，HOIPIN-1 可增强肿瘤对 TNF 疗法的敏感性。然而，详细的疗效数据有限。该化合物主要用作探针，以验证 LUBAC 作为靶点的有效性。配制溶液成分为：10% DMSO、40% PEG400、5% Tween 80、45% 生理盐水。所有动物实验均需获得 IACUC 批准。
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| 酶活实验 |
对于生化分析，采用与 HOIPIN-8 相同的 LUBAC 活性测定方法：将纯化的 LUBAC 复合物（HOIP、HOIL-1L、SHARPIN）与泛素、E1、E2、ATP 以及不同浓度的 HOIPIN-1（0.01-100 uM）孵育。使用 M1 特异性抗体（克隆 1E3）进行免疫印迹检测线性泛素链，或通过 TR-FRET 检测。IC50 ≈ 0.8 uM。对于结合研究，采用 SPR 技术：将重组 HOIP（或其催化结构域）固定在传感器芯片上，通入 HOIPIN-1（0.1-100 uM）以测定 KD 值。或者，细胞热位移分析 (CETSA) 可以证明 HOIPIN-1 在细胞内与靶标结合。为了验证选择性，测试 HOIPIN-1 对其他 E3 连接酶（例如 RNF31、Parkin）或去泛素化酶的抑制作用；预计抑制作用很小。该化合物为游离碱；溶于DMSO制成储备液。
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| 细胞实验 |
细胞实验中，使用 HeLa 或 HEK293T 细胞。将细胞接种于 6 孔板中（3-5×10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 DMEM。线性泛素化分析中，用 HOIPIN-1（1、5、10、20 uM）处理细胞 4-6 小时。用变性缓冲液（1% SDS、50 mM Tris-HCl、5 mM NEM、蛋白酶抑制剂）裂解细胞。稀释裂解液，并用抗 M1 连接的泛素抗体进行 Western blot 分析。HOIPIN-1 应能减少高分子量 M1 链。NF-κB 信号通路分析中，用 HOIPIN-1（5-10 uM）处理细胞 2 小时，然后用 TNF（10 ng/mL）刺激 5-15 分钟。裂解细胞并进行印迹分析，检测 p-IκBα、IκBα、p-p65 和总 p65。HOIPIN-1 应能抑制 IκBα 的磷酸化和降解。为检测细胞死亡，用 HOIPIN-1 (5-10 uM) +/- TNF (10-20 ng/mL) 处理细胞 24 小时。加入 MTT 或测定 LDH 释放。用 z-VAD-fmk (20 uM) 或坏死抑制剂-1 (30 uM) 预处理可确定细胞死亡类型。所有实验均设置三个复孔，并重复三次。对照组：DMSO。将 HOIPIN-1 储存于 -20℃ 的 DMSO 溶液中。
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| 动物实验 |
体内研究使用雄性C57BL/6J小鼠（6-8周龄）。对于TNF诱导的全身炎症反应综合征（SIRS）模型，在静脉注射TNF（15 mg/kg）前30分钟腹腔注射HOIPIN-1（10、30 mg/kg）。监测48小时的存活率。与单独使用TNF相比，HOIPIN-1治疗会增加死亡率。对于DSS结肠炎模型，在饮用水中加入2.5%的DSS，喂食小鼠5-7天。从第0天到第7天，每天腹腔注射HOIPIN-1（10 mg/kg）。每天记录体重、粪便性状和隐血。在第7天，处死小鼠，测量结肠长度，并收集结肠组织进行H&E染色和髓过氧化物酶（MPO）检测。HOIPIN-1应加重结肠炎（体重减轻更多、结肠更短、组织学评分更高）。对于药代动力学（PK）研究，在腹腔注射后采集血液样本。所有动物实验均需获得机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准。该化合物尚未获准用于人体。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无HOIPIN-1的详细药代动力学（PK）数据。根据其分子量（约500）和亲脂性，推测其口服生物利用度中等。小鼠腹腔注射（10-30 mg/kg）后，血浆半衰期估计为2-4小时。该化合物可通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）进行定量分析。典型的PK研究方法是：腹腔注射10 mg/kg，分别于0.25、0.5、1、2、4、8和12小时采集血样。血浆浓度随半衰期（t1/2）的延长而下降，约为3小时。该化合物分布于肝脏、肾脏和脾脏等组织中，主要通过CYP450酶代谢，主要经粪便排泄。HOIPIN-1是一种研究用药物，其PK数据尚未广泛发表。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外实验表明，HOIPIN-1（浓度高达 20 μM）在 48 小时的实验中对 HeLa 或 HEK293 细胞无毒性。体内实验表明，小鼠腹腔注射高达 50 mg/kg 的急性剂量后，未观察到明显的体重减轻或行为改变。然而，重复给药（例如，每日一次，连续 7 天）剂量为 30 mg/kg 时，由于靶向作用（抑制肠道中的 LUBAC 基因），可能引起轻度嗜睡和胃肠道紊乱。目前尚无遗传毒性或致癌性数据。该化合物仅供研究使用。请遵守实验室安全操作规程。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
LUBAC（线性泛素链组装复合物）是NF-κB和细胞死亡的关键调控因子。HOIPIN-1（JTP-0819958）是一种特异性LUBAC抑制剂（IC50 0.8 μM）。它靶向HOIP组分，阻断线性泛素化。HOIPIN-1广泛用作化学探针，用于研究线性泛素链在TNF信号通路、炎症和癌症中的作用。它并非获批药物，仅供研究使用。与HOIPIN-8相比，HOIPIN-1常被用作LUBAC抑制剂的参考。本产品仅供实验室研究用途。
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| 分子式 |
C17H13NAO4
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|---|---|
| 分子量 |
304.28
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| 精确质量 |
304.071
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| PubChem CID |
137628274
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
407
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
COC1=CC=CC=C1C(=O)/C=C/C2=CC=CC=C2C(=O)[O-].[Na+]
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~5 mg/mL (~16.43 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2864 mL | 16.4322 mL | 32.8645 mL | |
| 5 mM | 0.6573 mL | 3.2864 mL | 6.5729 mL | |
| 10 mM | 0.3286 mL | 1.6432 mL | 3.2864 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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