| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Superoxide anion (O2•−). HKSOX-1r is a fluorescent sensor designed to specifically react with superoxide, a key reactive oxygen species (ROS) produced by NADPH oxidases and mitochondria. It does not target a specific protein or receptor; instead, it chemically reacts with superoxide to yield a fluorescent product. The probe is cell-permeable and accumulates in cells. Upon oxidation by superoxide, it emits fluorescence at 580 nm. The regioisomers (5 and 6) have similar properties. This probe is used as a tool to study oxidative stress, not as a drug. There is no pharmacological target; it is a chemical reagent.
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| 体外研究 (In Vitro) |
HKSOX-1r 5/6 混合物（2 μM；30 分钟）能够非常快速、灵敏地检测 HCT116、BV-2 和 RAW264.7 细胞中线粒体呼吸抑制剂产生的 O2?-生成 [1]。
体外实验中，HKSOX-1r（5/6混合物）可用于检测无细胞体系和活细胞中的超氧阴离子。在试管中，将HKSOX-1r（1-10 uM）与超氧阴离子生成体系（例如黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶或超氧化钾）孵育，可显著增强荧光强度（激发波长510 nm，发射波长580 nm）。该反应具有特异性；其他活性氧（H2O2、•OH、O2•-、NO、ONOO-）产生的信号极弱。该探针灵敏度高（检测限在纳摩尔级）。在细胞培养中，用HKSOX-1r（1-10 uM）处理细胞（例如巨噬细胞、神经元）30分钟至1小时（37℃），随后用佛波醇酯（PMA）或脂多糖（LPS）刺激，可通过流式细胞术或荧光显微镜检测荧光强度的增加。该信号可被超氧化物歧化酶（SOD）淬灭。该探针在常用浓度下无细胞毒性。由于其对超氧化物具有更高的特异性，因此是二氢乙锭（DHE）的更优替代品。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
HKSOX-1r 5/6 混合物（10 μM；20 分钟）用 PMA 或抗霉素 A 处理的斑马鱼胚胎显示出明显的荧光模式 [1]。
不适用（荧光探针）。HKSOX-1r 不作为药物在体内给药；它用作临床前研究中的探针，用于测量动物模型中的超氧化物水平。对于体内成像，该探针可通过静脉或腹腔注射（例如，1-5 mg/kg）到小鼠体内，并使用配备合适滤光片（激发波长 510 nm，发射波长 580 nm）的体内成像系统 (IVIS) 进行荧光成像。例如，在急性炎症小鼠模型（角叉菜胶诱导的爪水肿）中，刺激前注射 HKSOX-1r 可使炎症爪的荧光强度增加。在脓毒症模型中，肝脏荧光强度与超氧化物生成量相关。然而，该产品主要用于离体或基于细胞的检测。该混合物并非药物；而是一种研究试剂。 |
| 酶活实验 |
为验证特异性，请使用无细胞体系。制备一块96孔黑色板。加入溶于PBS缓冲液（pH 7.4）的HKSOX-1r（5 uM）。加入黄嘌呤（100 uM）和黄嘌呤氧化酶（0.1 U/mL）生成超氧阴离子。于37℃孵育15-30分钟。测量荧光强度（激发波长510 nm，发射波长580 nm）。与不添加黄嘌呤氧化酶的对照组进行比较。为验证特异性，分别用过氧化氢（100 uM）、过氧亚硝酸盐（10 uM）、羟自由基（由Fe2⁺/H2O2生成）和一氧化氮（DETA-NONOate）进行测试。只有超氧阴离子会产生强信号。该反应可被SOD（100 U/mL）抑制。动力学研究需使用酶标仪测量荧光强度随时间的变化。5/6混合物可直接使用；异构体性质相似。产物为固体。用DMSO溶解，配制成10 mM的储备液。避光保存于-20℃。
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| 细胞实验 |
对于细胞实验，将细胞（例如 RAW 264.7 巨噬细胞、原代神经元）接种于 96 孔黑色板（2×10⁴ 个细胞/孔）或 6 孔板中。在 HBSS 或无血清培养基中加入 HKSOX-1r (5 uM)，于 37℃ 孵育 30 分钟。然后用 PBS 洗涤细胞两次以去除过量的探针。用 PMA (100 nM)、LPS (1 ug/mL) 或葡萄糖 (30 mM) 刺激细胞 30-60 分钟。作为对照，预先加入 SOD (100 U/mL) 或 NADPH 氧化酶抑制剂 DPI (10 uM)。使用酶标仪（激发波长 510 nm，发射波长 580 nm）或流式细胞仪（激发波长 488 nm，发射波长 585 nm）测量荧光强度。对于显微镜观察，使用共聚焦显微镜对活细胞进行成像。该探针具有较好的光稳定性。5/6 混合物可产生均匀的信号。避免长时间暴露于光照下。探针加载后，使用 MTT 法检测细胞毒性；结果显示无毒。所有实验均包含溶剂对照（DMSO ≤0.1%）。阳性对照：二氢乙锭 (DHE) 用于比较。定量结果需使用由黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产生的超氧化物生成的标准曲线。
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| 动物实验 |
对于活体成像，请使用 IVIS Spectrum 系统。麻醉小鼠（例如 C57BL/6J）。腹腔或静脉注射 HKSOX-1r（5 mg/kg，溶于 100 μL PBS）。30 分钟后，向小鼠爪部注射角叉菜胶（50 μL，2%）诱导炎症。2-4 小时后，使用 500 nm 激发波长和 580 nm 发射波长对小鼠进行成像。测量爪部区域的辐射效率。对照组小鼠仅注射载体（PBS）。对于离体分析，成像后，收集组织（肝脏、肺脏、爪部）并匀浆；使用酶标仪测量荧光强度。该探针也可用于分离细胞的流式细胞术分析。所有动物实验均需获得 IACUC 批准。本产品不可用于人体。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
不适用。HKSOX-1r 是一种荧光探针；由于它用作试剂而非药物，因此通常不研究其药代动力学。注射后，它分布迅速，并在数小时内清除。5/6 混合物没有明显的药代动力学特征。研究无需药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
未见毒性数据。在所用浓度（细胞内 1-10 μM，小鼠内 ≤5 mg/kg）下，未见不良反应报告。该化合物不适用于人体。应采取标准安全防护措施（佩戴手套、穿实验服）。本产品仅供研究使用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HKSOX-1r 是一种新一代超氧阴离子荧光探针，旨在克服二氢乙锭 (DHE) 的局限性，DHE 也会与其他活性氧 (ROS) 发生反应。5/6 混合物表示该探针由两种区域异构体（苯环 5 位或 6 位带有官能团）混合而成。这种混合物常用于研究，因为两种异构体性质相似，且混合物更易于合成。该探针可透过细胞膜，且对超氧阴离子具有特异性，因此在研究各种疾病中的氧化应激方面具有重要价值。它并非药物，而是一种研究用化学品。
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| 分子式 |
C29H15F10NO14S2
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| 分子量 |
855.54
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~200 mg/mL (~233.77 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (5.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1689 mL | 5.8443 mL | 11.6885 mL | |
| 5 mM | 0.2338 mL | 1.1689 mL | 2.3377 mL | |
| 10 mM | 0.1169 mL | 0.5844 mL | 1.1689 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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