| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Superoxide anion (O2•−). HKSOX-1 is a chemoselective fluorescent probe that specifically reacts with superoxide via a chemical mechanism (likely a reaction with the dihydroethidine core). The reaction yields a fluorescent product (ethidium-like). The 5/6 mixture indicates that the probe is a mixture of isomers where the substituent is at the 5 or 6 position on the benzene ring; both have similar properties. This probe has high selectivity for superoxide over other ROS (H2O2, •OH, ONOO−, NO). It is used in biochemistry and cell biology to monitor superoxide production from sources such as NADPH oxidases and mitochondria. There is no receptor target.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在25 °C的磷酸钾缓冲液中,HKSOX-1 (10 μM) 与 O2+ 结合,产生强烈的、随时间增加的荧光,该荧光强度在60分钟内保持稳定。反应在10分钟内完成。HKSOX-1 (10 μM) 在pH 2.2–8.8范围内具有极佳的稳定性[1]。
体外实验表明,HKSOX-1(5/6混合物)(1-10 uM)可与黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子反应,导致荧光增强。该反应具有特异性:H2O2、过氧亚硝酸盐、一氧化氮或羟基自由基均不引起明显的荧光增强。该探针灵敏度高(检测限在低纳摩尔范围内)。在细胞培养中,用HKSOX-1(5 uM)孵育细胞30分钟后,再用PMA或LPS刺激,可通过流式细胞仪或酶标仪检测荧光强度的增加。超氧化物歧化酶(SOD)或NADPH氧化酶抑制剂(例如DPI)可抑制该信号。5/6混合物可直接使用;其异构体性能相似。该探针在5 uM浓度下孵育4小时无细胞毒性。由于其具有更高的特异性,因此优于二氢乙锭(DHE)。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用。HKSOX-1 不是药物,而是一种荧光探针。它可用于离体组织或体内成像。在体内研究中,将探针静脉注射(1-5 mg/kg)至小鼠体内;可使用 IVIS 系统对器官中的荧光进行成像。例如,在脓毒症模型中,肝脏荧光与超氧化物生成相关。然而,该混合物主要用作研究试剂。
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| 酶活实验 |
与 HKSOX-1r 和 HKSOX-1m 相同。在无细胞体系中,将 HKSOX-1 溶解于 PBS 缓冲液中(5 uM)。加入黄嘌呤(100 uM)和黄嘌呤氧化酶(0.1 U/mL)。于 37℃ 孵育 20 分钟。测量荧光强度(激发波长 510 nm,发射波长 580 nm)。通过其他活性氧(ROS)无信号以及超氧化物歧化酶(SOD)抑制来验证其特异性。5/6 混合物可直接使用。用 DMSO 溶解配制成 10 mM 的储备液,然后用 PBS 缓冲液稀释。该探针光敏,请在弱光下操作。
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| 细胞实验 |
与 HKSOX-1r 相同。将 RAW 264.7 细胞接种于 96 孔板中,用 HBSS 缓冲液(5 uM HKSOX-1)孵育 30 分钟,洗涤后,用 PMA(100 nM)或 LPS(1 ug/mL)刺激 30-60 分钟。读取荧光值。流式细胞术检测时,细胞悬浮状态下进行上样和刺激。显微镜检测时,使用活细胞成像模式。5/6 混合物在这些实验中效果良好。设置 DMSO 和 SOD 作为对照。该探针无细胞毒性。
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| 动物实验 |
与HKSOX-1r相同。体内实验中,将HKSOX-1(5 mg/kg,静脉注射)注射到小鼠体内,然后诱导炎症。使用IVIS成像系统进行成像。所有动物实验均需获得IACUC批准。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
无毒。使用浓度低。符合安全标准。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HKSOX-1 是 HKSOX 家族中最初的超氧化物探针。它对超氧化物具有高度选择性,远优于其他活性物质。5/6 混合物简化了合成。它广泛用于氧化应激研究。不可用于人体。
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| 分子式 |
C23H6F10O11S2
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| 分子量 |
712.40
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~110 mg/mL (~154.41 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.75 mg/mL (3.86 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (3.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 27.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4037 mL | 7.0185 mL | 14.0371 mL | |
| 5 mM | 0.2807 mL | 1.4037 mL | 2.8074 mL | |
| 10 mM | 0.1404 mL | 0.7019 mL | 1.4037 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。