Histone H3 (1-35) (TFA)

目录号: V76928 纯度: ≥98%
Histone H3 (1-35) TFA 是一种 35 个氨基酸 (AA) 组蛋白 H3 肽片段。
Histone H3 (1-35) (TFA) 产品类别: Peptides | 多肽
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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5mg
10mg
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产品描述
组蛋白H3 (1-35) TFA 是一种由35个氨基酸组成的组蛋白H3肽片段。组蛋白H3是真核细胞染色质结构中五种主要组蛋白之一。
组蛋白H3 (1-35) TFA是一种合成肽,对应于人组蛋白H3的N端尾部,包含第1至35位氨基酸残基。该序列包含关键的翻译后修饰位点:Lys4、Lys9、Lys14、Lys18、Lys23、Lys27等。该肽常用作组蛋白甲基转移酶和去甲基酶的底物,也可用于组蛋白识别蛋白(例如染色质结构域蛋白)的结合研究。TFA盐用于提高其溶解度。它是一种表观遗传学研究试剂,而非药物。
生物活性&实验参考方法
靶点
Histone H3 (substrate). Histone H3 (1-35) TFA is a synthetic peptide that serves as a model substrate for enzymes that modify histone tails, such as methyltransferases (e.g., SET1/MLL, EZH2, G9a), demethylases (e.g., KDM1A, KDM4, KDM5), acetyltransferases (HATs), deacetylases (HDACs), and kinases. It also binds to reader proteins that recognize specific modifications (e.g., methylated lysine). The peptide includes the N-terminal tail up to residue 35, which contains all the important modification sites. It does not have a specific pharmacological target; it is a biochemical tool.
体外研究 (In Vitro)
组蛋白 H3 是表观遗传学发展中的关键蛋白质,人们认为基因的动态和长期调控受到其序列变异和可变修饰状态的影响[1]。
在体外,组蛋白H3 (1-35) TFA可用作酶活性测定的底物。例如,在SAM存在下,重组PRC2 (EZH2)可将其Lys27位点甲基化,该甲基化可通过质谱或使用修饰特异性抗体进行检测。KDM5A也可将其Lys4位点去甲基化。该肽段可溶于水或缓冲液。由于其不具有细胞渗透性,因此不用于基于细胞的测定;它用于无细胞体系。TFA盐不影响酶活性。该肽段可进行生物素标记,用于下拉实验。它是表观遗传学中的标准试剂。
体内研究 (In Vivo)
不适用。该肽段并非体内给药,而是一种生化工具。它可用于生成针对组蛋白H3修饰的抗体,但该肽段本身并非药物。
酶活实验
对于甲基转移酶活性测定,将组蛋白H3 (1-35) TFA (1-10 uM) 与纯化的EZH2 (PRC2)复合物 (0.1-1 uM) 和S-腺苷甲硫氨酸 (SAM, 1-10 uM) 在反应缓冲液 (50 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM MgCl2, 2 mM DTT) 中于37℃孵育1-2小时。加入0.5% TFA终止反应。使用MALDI-TOF或LC-MS分析,检测甲基化引起的质量增加。对于基于ELISA的检测,将肽包被在酶标板上,并使用抗H3K27me3抗体。对于结合实验,将肽固定在链霉亲和素板上(如果已生物素化),并加入读板蛋白(例如CBX7),用特异性抗体进行检测。TFA盐可溶。溶于水。
细胞实验
不适用(无细胞)。然而,该肽可以通过电穿孔导入细胞或用于核提取物。对于细胞分析,制备细胞核提取物,与肽(10 uM)和SAM孵育,然后用修饰特异性抗体通过Western blot分析甲基化情况。这并非标准方法。通常,该肽仅用于体外实验。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
无毒性。只要采取标准预防措施,该肽即可安全操作。
参考文献

[1]. Recognition and classification of histones using support vector machine. J Comput Biol. Jan-Feb 2006;13(1):102-12.

其他信息
组蛋白H3 (1-35) 是一种广泛用于研究组蛋白修饰的底物。它包含1-35位氨基酸残基,覆盖了N端尾部,其中包含大部分调控位点(K4、K9、K14、K17、K18、K23、K27、K36)。三氟乙酸盐可提高其溶解度。本品仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C151H270F3N55O47
分子量
3665.15
相关CAS号
Histone H3 (1-35);135990-31-7
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~50 mg/mL (~13.64 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (27.28 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.2728 mL 1.3642 mL 2.7284 mL
5 mM 0.0546 mL 0.2728 mL 0.5457 mL
10 mM 0.0273 mL 0.1364 mL 0.2728 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们