| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Gbetagamma subunits of heterotrimeric G proteins. GRK2i TFA is a polypeptide inhibitor derived from the Gbetagamma-binding domain of G protein-coupled receptor kinase 2 (GRK2). GRK2 (also known as beta-adrenergic receptor kinase 1, ADRBK1) is a serine/threonine kinase that phosphorylates and desensitizes agonist-activated GPCRs. GRK2 is activated by binding to Gbetagamma dimers, which translocate the kinase to the plasma membrane. GRK2i competes with endogenous GRK2 for Gbetagamma binding, acting as a cellular antagonist. By binding to Gbetagamma, GRK2i prevents Gbetagamma from activating GRK2 and also blocks Gbetagamma-mediated signaling pathways, such as activation of PI3Kgamma, PLCbeta, and certain ion channels, independent of GRK2. Thus, GRK2i is a broad inhibitor of Gbetagamma-mediated effects. The peptide is not selective for GRK2 over other Gbetagamma effectors, as it directly targets the Gbetagamma subunit.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，GRK2i TFA（一种由29个氨基酸组成的多肽）能特异性地结合Gβγ蛋白二聚体，阻止其与GRK2及其他Gβγ效应分子的相互作用。在重组磷脂囊泡实验中，该肽段的抑制活性已得到证实，它能阻断Gβγ介导的GRK2及其他效应分子（如PI3Kγ和腺苷酸环化酶）的激活。在1-50 uM的浓度范围内，GRK2i可抑制Gβγ刺激的GRK2活性，并降低无细胞系统中Gβγ依赖的信号传导事件。该肽段（10-100 uM）还能阻断重组系统中Gβγ诱导的PLCβ和GIRK通道的激活。由于该肽段包含GRK2的Gβγ结合基序，因此其抑制作用与Gβγ的结合具有竞争性。在无细胞实验中，该肽抑制Gβγ-GRK2相互作用的IC50值在0.5-5 uM范围内，具体数值取决于实验条件。该肽也可用作分子工具，在透化细胞实验中阻断Gβγ信号通路。该肽不直接与受体结合；其靶点是异源三聚体G蛋白的Gβγ亚基。TFA盐形式不影响该肽的活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，GRK2i TFA 已被用于细胞培养和离体实验中，以阻断多种系统中的 Gβγ 信号通路。例如，在神经元培养物（如原代海马或皮层神经元）中，GRK2i（10-50 uM）可抑制 Gβγ 介导的神经突回缩、细胞迁移和轴突导向。在心肌细胞中，GRK2i（10-50 uM，通过显微注射或细胞渗透性肽变体递送）可阻断 Gβγ 依赖性信号通路，包括 PI3Kγ 和 MAPK 的激活，并降低收缩反应。在离体组织制备物（如分离的心脏或脑切片）中，GRK2i 肽（1-20 uM）通常通过灌流方式给药。然而，由于 GRK2i 是一种大型亲水性肽（29 个氨基酸，分子量约为 3.6 kDa），它不易穿过细胞膜；因此，体内研究需要采用显微注射、与细胞穿透肽（CPP）偶联（例如TAT-GRK2i）或病毒载体（例如腺相关病毒，AAV）等递送策略。未修饰的GRK2i不适用于全身性体内给药。该肽被广泛用作研究工具，以验证Gβγ信号通路在生理和病理条件下的作用，包括心脏肥大、炎症和神经系统疾病。
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| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验，可以使用表面等离子共振 (SPR) 或荧光偏振 (FP) 技术来测量 GRK2i 与 Gβγ 之间的直接结合。对于 SPR 实验：将重组 Gβγ 亚基（例如 Gβ1γ2）通过胺偶联（EDC/NHS 化学）固定在 CM5 传感器芯片上，或使用抗 Gβ 抗体进行捕获。将 GRK2i TFA 溶解于运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.005% P20、1 mM DTT）中。在 25°C 下，以 30 uL/min 的流速将浓度递增的 GRK2i 溶液（0.001-100 uM）流过固定的 Gβγ 芯片。记录结合（2 分钟）和解离（5 分钟）阶段的数据。传感器图谱采用双参考。解离常数 (KD) 通过拟合 1:1 Langmuir 结合模型计算。对于荧光偏振 (FP)：制备荧光素标记的 GRK2i (FITC-GRK2i)。在 384 孔黑色板中，将固定浓度的 FITC-GRK2i (10-50 nM) 与不同浓度的未标记 GRK2i (0.01-100 uM) 在 Gβγ (10-50 nM) 存在下于结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、100 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM DTT、0.01% NP-40）中孵育。平衡后（室温下 30-60 分钟），测量荧光偏振（激发波长 485 nm，发射波长 520 nm）。测定未标记GRK2i的IC50值，并计算Ki值。或者，可以使用竞争性ELISA：将Gβγ固定在96孔板上，加入生物素标记的GRK2i（生物素-GRK2i），分别在有或无未标记GRK2i的情况下进行，用链霉亲和素-HRP检测，并在450 nm处测量吸光度。对于使用下拉法的Gβγ-GRK2相互作用分析：将重组GRK2（或GRK2 PH结构域）与Gβγ和GRK2i孵育，然后用抗GRK2抗体进行免疫沉淀，并通过Western blot检测Gβγ。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，通常使用细胞（例如 HEK293、COS-7、原代神经元或心肌细胞）。然而，由于 GRK2i 肽段分子量较大且具有亲水性，因此无法穿透细胞膜；必须通过显微注射、电穿孔或与细胞穿透肽 (CPP)（例如 TAT、penetratin 或 Antp）偶联的方式将其递送至细胞内。对于显微注射研究：将细胞接种于玻璃盖玻片上，并使用 Eppendorf FemtoJet 或类似的显微操作仪，将 GRK2i TFA（1-100 uM，溶于注射缓冲液）进行显微注射。对于 CPP 偶联的 GRK2i：市售产品包括 TAT-GRK2i（其中 TAT 肽段 YGRKKRRQRRR 与 GRK2i 融合）或肉豆蔻酰化 GRK2i (myr-GRK2i)。将细胞在无血清培养基中用 CPP-GRK2i (1-50 uM) 处理 2-6 小时，温度为 37℃。典型的 Gβγ 信号通路检测方法如下：表达 GPCR（例如趋化因子受体 CXCR4、血管紧张素 II AT1R 或 β2-肾上腺素能受体）的细胞在无血清培养基中饥饿过夜。然后，用 CPP-GRK2i (10-50 uM) 预处理细胞 2-4 小时，随后用激动剂（例如 SDF-1α/CXCL12、血管紧张素 II 或异丙肾上腺素）刺激 5-30 分钟。通过蛋白质印迹法检测磷酸化 ERK1/2 (p-ERK，指示 MAPK 激活)、磷酸化 AKT (p-AKT，指示 PI3K 激活) 或其他相关指标来评估下游信号通路。或者，可以使用转录因子报告基因检测（例如，NF-κB-荧光素酶或SRE-荧光素酶）。GRK2i抑制Gβγ信号通路可通过磷酸化水平降低或荧光素酶活性降低来指示。对于功能性检测（例如，细胞迁移）：使用Transwell迁移实验。将细胞用CPP-GRK2i（10-50 uM）处理2-4小时，然后接种到Transwell小室（孔径8 um）的上室中，并加入无血清培养基。下室含有趋化因子（例如，CXCL12，10-100 ng/mL）。4-24小时后，用结晶紫或Calcein-AM染色下室表面的迁移细胞，并进行定量。GRK2i预计会抑制趋化因子诱导的细胞迁移。所有实验均应包含一个随机序列的GRK2i肽段作为阴性对照。 GIRK通道活性检测：在共表达GIRK1/4通道和GPCR（例如GABAB或腺苷A1受体）的CHO或HEK细胞中，可进行全细胞膜片钳电生理实验。将GRK2i（5-50 uM，通过内液管注入）透析至细胞内，并测量GIRK电流抑制情况。每种条件均应在三个复孔或三个细胞中进行，且至少进行3次独立实验。GRK2i TFA储备液：用无菌水或PBS配制成1-10 mM的浓度，储存于-20℃，避免反复冻融。
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| 动物实验 |
由于裸露的GRK2i TFA无法穿过细胞膜且血浆半衰期短，因此不用于体内研究。为了在体内研究GRK2i，研究人员通常使用细胞穿透肽（CPP）偶联物，例如TAT-GRK2i，或使用病毒载体表达GRK2i肽序列（例如AAV-GRK2i）。对于小鼠中的TAT-GRK2i：将TAT-GRK2i（1-10 mg/kg，溶于无菌生理盐水）每日腹腔注射（ip）或静脉注射（iv），持续1-14天，注射对象为成年小鼠（例如C57BL/6J，8-12周龄）。对于心脏研究，则使用心肌梗死（MI）或压力负荷过重（横向主动脉缩窄，TAC）模型。 TAT-GRK2i（2-5 mg/kg，腹腔注射）于术前1天开始每日给药，术后持续2-4周。终点指标包括超声心动图（射血分数、短轴缩短率）、心脏重量/体重比、纤维化（Masson三色染色）以及GRK2和Gβγ信号通路的Western blot检测。对于神经系统研究，TAT-GRK2i可通过脑室内（icv）注射（2-5 μL 100-500 μM溶液）或渗透泵给药。药效学效应通过行为学测试（例如，旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验）以及组织样本采集进行免疫组织化学和Western blot分析来评估。体外分析：采集组织（心脏、脑、肝脏），匀浆后，通过蛋白质印迹法检测GRK2活性或Gβγ信号通路（例如p-AKT、p-ERK）。所有动物实验程序均须经IACUC批准。TFA盐形式仅供研究使用，不得用于临床。GRK2i肽未获准作为药物使用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无GRK2i TFA的具体药代动力学(PK)数据。GRK2i是一种由29个氨基酸组成的肽（分子量约为3.6 kDa），口服生物利用度低，且由于肾脏滤过和蛋白水解降解，其在血液循环中迅速清除（血浆半衰期<5-15分钟）。为了改善药代动力学，通常将该肽与细胞穿透肽（例如TAT、穿透肽）偶联或封装于纳米颗粒中。与裸肽相比，TAT-GRK2i偶联物的半衰期延长，但清除速度仍然很快（小鼠体内t1/2为15-30分钟）。TFA盐形式用于合成过程中，不会改变其药代动力学特征。药代动力学研究：向小鼠静脉注射GRK2i或TAT-GRK2i（5 mg/kg），分别于0、5、15、30、60和120分钟采集血样，并采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）进行定量分析。该化合物可分布于心脏、肾脏和肝脏等组织，但脑渗透性较差（血浆浓度<5%）。该肽主要经肾脏（肾小球滤过）清除，并由组织肽酶代谢。详细的药代动力学参数尚未公开。GRK2i并非候选药物，而是一种研究工具。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无GRK2i TFA的具体毒性数据。体外实验表明，GRK2i（浓度高达100 μM）通常对细胞无细胞毒性（MTT或LDH释放试验结果显示），但高浓度（>50 μM）可能引起非特异性效应。体内实验表明，每日腹腔注射1-10 mg/kg的TAT-GRK2i，持续2-4周，通常耐受性良好，未见死亡或显著体重减轻的报道，但部分研究报告有轻度嗜睡。目前尚无遗传毒性、器官毒性或致癌性数据。由于GRK2i可螯合参与多种细胞功能的Gβγ亚基，长期抑制可能引起不良反应；然而，目前尚未有相关研究报道。TFA盐含量低，被认为无毒。GRK2i仅供研究使用，未获准用于人体。使用时应采取标准实验室安全防护措施（佩戴手套、实验服、护目镜）。该化合物不适用于治疗用途。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GRK2（G蛋白偶联受体激酶2）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，在GPCR（包括β-肾上腺素能受体（β-AR））的同源脱敏和内化过程中发挥关键作用。GRK2在心力衰竭、高血压和慢性炎症中过度表达，使其成为心血管疾病的治疗靶点。GRK2通过与GPCR激活后释放的游离Gβγ二聚体结合而被激活。Gβγ结合域位于GRK2的N端区域（PH结构域）。GRK2i是一种由29个氨基酸组成的肽，对应于该Gβγ结合域。它作为竞争性抑制剂，抑制Gβγ与GRK2及其他效应分子的结合。GRK2i最早由Koch及其同事于1994-1995年报道。该肽序列为WKKELRDAYREAQQLVQRVPKMKNKPRS（牛GRK2的第50-78位氨基酸残基）。三氟乙酸盐用于在冻干和储存过程中稳定肽。GRK2抑制剂已被广泛用作研究工具，用于解析心肌细胞、神经元、中性粒细胞和癌细胞中Gβγ依赖性信号通路。然而，该肽本身尚未获批用于治疗；细胞渗透性TAT-GRK2抑制剂偶联物已在心力衰竭和炎症的临床前模型中进行了测试。截至2026年，尚无基于GRK2抑制剂的疗法获批用于临床。本产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C152H257F3N50O43S
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|---|---|
| 分子量 |
3598.10
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| 相关CAS号 |
GRK2i;148505-03-7
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~27.79 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (13.90 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2779 mL | 1.3896 mL | 2.7792 mL | |
| 5 mM | 0.0556 mL | 0.2779 mL | 0.5558 mL | |
| 10 mM | 0.0278 mL | 0.1390 mL | 0.2779 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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