| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Auristatin
MMAD targets tubulin, specifically binding to the vinca domain on the beta-subunit of tubulin. This binding prevents the formation of microtubules and disrupts the mitotic spindle apparatus, leading to cell cycle arrest at the G2/M phase. The mc linker is stable in systemic circulation but is designed to be cleavable (cathepsin-sensitive) after ADC internalization into target cancer cells, releasing the active auristatin payload to exert its cytotoxic effects. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
游离的MMAD有效载荷在体外对多种人类癌细胞系表现出细胞毒活性，IC50值在低纳摩尔至皮摩尔范围内（例如，对卵巢癌、乳腺癌和肺癌细胞的IC50值为0.1-1 nM）。它能破坏微管蛋白聚合并诱导G2/M期细胞周期阻滞，最终导致细胞凋亡。当通过mc连接子偶联时，其活性在释放前被掩盖，从而最大限度地减少了脱靶毒性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
未标记的MMAD（单甲基澳瑞他汀D）是一种强效的异种移植瘤生长抑制剂，当通过抗体药物偶联物（ADC）平台递送时，可抑制小鼠体内的肿瘤生长。当通过mc连接子与肿瘤靶向抗体偶联时，Cys-mcMMAD ADC能够将有效载荷特异性地递送至肿瘤细胞，从而显著抑制肿瘤生长，且通常具有持久的疗效。其疗效呈剂量依赖性，并通常与癌细胞上靶抗原的表达相关。
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| 酶活实验 |
利用体外微管蛋白聚合实验评估MMAD有效载荷的作用机制。将纯化的猪脑微管蛋白（3 mg/mL）在含GTP的缓冲液中于37℃孵育，分别加入或不加入MMAD（0.1-100 nM）。通过分光光度法监测微管蛋白组装成微管的过程，具体方法是测量340 nm处的吸光度（浊度）随时间的变化（30-60分钟）。IC50值由最大聚合速率的抑制率计算得出。此外，还可以使用[3H]-秋水仙碱或[3H]-长春碱进行竞争性结合实验，以确定结合位点特异性。
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| 细胞实验 |
采用标准增殖试验评估MMAD或其抗体偶联药物（ADC）的细胞毒性。将靶癌细胞（例如，HER2阳性的SK-BR-3细胞，胃癌的NCI-N87细胞）接种于96孔板（5000个细胞/孔），并过夜培养。用系列稀释的ADC（0.0001-100 nM）处理细胞72-96小时。然后使用CellTiter-Glo发光法（检测ATP）或MTT比色法定量细胞活力。采用非线性回归计算IC50值。处理24-48小时后，使用Annexin V/PI双染法通过流式细胞术确认细胞凋亡。
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| 动物实验 |
在体内疗效研究中，将携带皮下异种移植瘤（例如，HER2阳性乳腺癌异种移植瘤）的雌性无胸腺裸鼠随机分为治疗组（每组n=5-10），待肿瘤平均体积达到100-200 mm³时进行分组。使用Cys-mcMMAD制备的抗体药物偶联物（ADC）通过尾静脉注射，剂量水平为1、3、10 mg/kg，分别于第0、4和8天给药（每4天一次，共3次）。每周两次测量肿瘤体积（长×宽²/²）和体重。疗效终点包括肿瘤生长抑制率（%TGI）、肿瘤消退（部分缓解或完全缓解）和无事件生存期。研究结束时，收集肿瘤和器官进行组织病理学分析和有效载荷定量。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
MMAD本身的药代动力学特征并不理想（清除迅速，半衰期短）。然而，当通过mc连接子与Cys-mcMMAD偶联到ADC构建体中时，含Cys-mcMMAD的ADC表现出抗体典型的延长循环特性：在小鼠体内半衰期为5-10天，在食蟹猴体内半衰期为1-3周。该连接子在血浆中稳定，体外14天内有效载荷释放量低于5%。裂解主要发生在靶细胞的溶酶体中。主要的清除途径是抗体支架的蛋白水解降解和胆汁/粪便排泄。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cys-mcMMAD的毒性主要归因于抗体药物偶联物（ADC）释放的游离MMAD有效载荷的机制性毒性。MMAD抑制微管蛋白，导致有丝分裂停滞，这对快速分裂的细胞具有毒性。靶向肿瘤外的毒性（例如血小板减少症、中性粒细胞减少症）是基于奥瑞他汀的ADC的剂量限制性毒性。眼部毒性（角膜病变）和周围神经病变也是潜在的不良反应。通过Cys-mc连接子偶联，游离有效载荷的全身暴露量极低，但血液毒性仍然是此类药物的固有特性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Cys-mcMMAD 是药物连接子构建体的三氟乙酸盐，该构建体由单甲基奥瑞他汀 D (MMAD) 和马来酰亚胺己酰 (mc) 连接子组成，MMAD 是一种强效的微管抑制剂，衍生自多拉司他汀 10，连接子通过半胱氨酸残基与 MMAD 连接。该连接子专门设计用于与单克隆抗体上还原链间二硫键的半胱氨酸残基偶联。MMAD 是药物外排泵 P-糖蛋白 (MDR1) 的底物，MDR1 是某些癌细胞潜在的耐药机制。Cys-mcMMAD 仅供研究使用，尚未获准作为单药用于临床。
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| 分子式 |
C54H84N8O11S2
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| 分子量 |
1085.42
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~200 mg/mL (~184.26 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (4.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (4.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (4.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9213 mL | 4.6065 mL | 9.2130 mL | |
| 5 mM | 0.1843 mL | 0.9213 mL | 1.8426 mL | |
| 10 mM | 0.0921 mL | 0.4607 mL | 0.9213 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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