Cy7-YNE

目录号: V77123 纯度: ≥98%
Cy7-YNE 是一种荧光标记试剂(Ex=700-770 nm,Em=770 nm)。
Cy7-YNE 产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
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产品描述
Cy7-YNE 是一种荧光标记试剂(激发波长 700-770 nm,发射波长 770 nm)。花菁染料可用于标记蛋白质、抗体、肽等。Cy7-YNE 是一种点击化学试剂。它含有炔基,可以与含有叠氮基的化合物发生 CuAAc 反应(铜催化叠氮-炔环加成反应)。
Cy7-YNE(Cy7炔烃)是一种近红外(NIR)七甲川菁荧光染料,其末端带有炔烃(-YNE,≡CH)基团。该炔烃基团可通过铜催化的叠氮-炔烃环加成反应(CuAAC)与叠氮修饰的生物分子(肽、蛋白质、抗体、糖类、核酸)发生化学反应,这是一种高选择性且具有生物正交性的“点击化学”反应。Cy7-YNE 专为目标分子的荧光标记而设计,可实现近红外成像(激发波长~700-770 nm,发射波长~770 nm),并具有较深的组织穿透深度(可达1-2 cm)。
生物活性&实验参考方法
靶点
Cy7-YNE does not bind to specific biological targets. Its reactive alkyne group serves as a chemical handle for click chemistry, specifically reacting with organic azides in the presence of a copper(I) catalyst. The reaction forms a stable 1,2,3-triazole linkage, covalently conjugating the Cy7 fluorophore to the azide-labeled biomolecule. After conjugation, the Cy7 fluorophore (a cyanine dye) can be excited by NIR light and emit NIR fluorescence for imaging applications. No biological target engagement beyond the chemical reaction occurs.
体外研究 (In Vitro)
Cy7-YNE作为游离染料本身不具有生物活性。其用途纯粹是化学性的:将近红外荧光标签引入目标生物分子(例如靶向配体、抗体)上。偶联后,标记探针仍保留其靶标结合能力(例如,抗体-Cy7偶联物仍能与其抗原结合)。Cy7染料具有高度稳定性、优异的光稳定性以及高消光系数(>200,000 M-¹cm-¹),可提供明亮的荧光,用于灵敏检测。炔烃点击反应具有高度特异性,不会与内源性官能团发生交叉反应。
体内研究 (In Vivo)
Cy7-YNE的体内活性取决于与其连接的生物分子(例如,肿瘤靶向抗体、RGD肽)。将Cy7标记的靶向剂与生物分子偶联后,通过静脉注射注入荷瘤小鼠体内,即可利用近红外成像系统对深部肿瘤进行实时、无创的荧光成像。由于生物组织(血液、皮肤、脂肪)在近红外波段(700-900 nm)的吸收和自发荧光极低,Cy7标记能够穿透深层组织。这使得肿瘤边缘、淋巴结转移灶以及术中荧光引导手术能够实现高对比度的可视化。
酶活实验
炔烃-叠氮环加成反应并非“受体结合”测定。然而,Cy7-YNE 的反应活性已通过体外点击化学得到证实。将模型叠氮化合物(例如,4-叠氮苯甲酸、苄基叠氮或叠氮-PEG3-生物素)溶解于水/DMSO (1:1) 混合溶液中。在反应瓶中,将 Cy7-YNE (10 uM)、叠氮化合物 (10-100 uM)、CuSO4 (100 uM)、抗坏血酸钠 (500 uM) 和铜稳定配体(例如,TBTA,100 uM)混合于 PBS 缓冲液 (pH 7.4) 中。反应在室温下进行 1-2 小时。反应进程通过 LC-MS 或 TLC(硅胶,氯仿:甲醇 9:1,Rf 值:Cy7-YNE ~0.4,产物 ~0.2)进行监测。炔烃峰的消失证实了反应效率(转化率>90%)。作为阴性对照,省略铜催化剂(无反应发生)。
细胞实验
由于Cy7-YNE是一种化学连接剂,因此目前尚无针对游离Cy7-YNE的细胞检测方法。然而,偶联后,标记分子可用于细胞结合或摄取实验。例如,使用Cy7-YNE标记EGFR靶向抗体(通过生物偶联流程:首先使用NHS-PEG4-叠氮化物对抗体进行叠氮化,然后与Cy7-YNE进行点击反应)。将Cy7标记的抗体(10 ug/mL)与EGFR阳性A431细胞(癌细胞系)在4℃(结合)或37℃(内化)下孵育1小时。洗去未结合的抗体后,用4%多聚甲醛固定细胞,并使用近红外激发(Cy7滤光片组)通过共聚焦显微镜成像。仅在 EGFR 阳性细胞中观察到特异性细胞表面染色,而在 EGFR 阴性细胞中未观察到,证实了偶联抗体仍然具有功能。
动物实验
Cy7-YNE本身不用于动物实验。其衍生的Cy7标记靶向探针用于成像研究。典型实验方案:将皮下移植U87MG胶质母细胞瘤异种移植瘤(肿瘤体积约200-400 mm³)的雌性无胸腺裸鼠(6-8周龄)经尾静脉注射(200 μL)Cy7标记的肿瘤靶向剂(例如,抗EGFR亲和体-Cy7,每只小鼠2-10 nmol染料当量)。在预定的时间点(1、4、8、12、24、48、72小时),用2%异氟烷/氧气混合气体麻醉小鼠。使用IVIS Spectrum或Pearl成像仪,在近红外荧光设置下(激发波长:710-760 nm,发射波长:790-840 nm,像素合并:中等,曝光时间:0.5-2秒)采集全身荧光图像。在最终时间点,处死小鼠,取出各器官(肿瘤、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、心脏、肠道、肌肉、骨骼),进行离体成像以量化探针的积累。计算肿瘤/肌肉和肿瘤/肝脏的荧光比值。Cy7的明亮荧光可用于深层组织成像,从而检测微小转移灶(小至<1 mm)。
药代性质 (ADME/PK)
由于Cy7-YNE是一种活性小分子(分子量约为700-1000),静脉注射后会迅速从血液循环中清除,半衰期仅为几分钟。然而,它从不以游离炔烃的形式给药,而是首先与载体结合。结合物的药代动力学性质取决于生物分子载体(例如,抗体:半衰期为数天至数周;肽:半衰期为数分钟至数小时)。Cy7染料本身不被CYP酶代谢,因此性质稳定。结合物主要通过肝脏(肝胆)和肾脏途径清除,具体取决于其大小。由于网状内皮系统摄取,染料可能在肝脏和脾脏中蓄积,这在纳米颗粒和大分子结合物中很常见。对于抗体结合物,小鼠体内的终末半衰期为5-10天。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
Cy7-YNE 是一种研究用化学品,应谨慎操作。其急性经口毒性可能较低,但目前尚无具体的 LD50 数据。该化合物可刺激眼睛、皮肤和呼吸道。应避免皮肤接触;如不慎接触,请用肥皂和水清洗。炔基的毒性不高。点击化学中使用的铜催化剂(CuSO4/抗坏血酸钠)在高浓度下对细胞和动物有毒性,但不会同时用于体内(偶联后会去除过量的催化剂)。最终纯化的 Cy7 偶联物中残留铜含量极低。目前尚未有关于 Cy7-YNE 的致突变性或致癌性数据。操作过程中需采取标准的实验室防护措施(佩戴手套、实验服和护目镜)。Cy7-YNE 仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。
其他信息
Cy7-YNE 是一种近红外 (NIR) 荧光染料(Cy7,七甲川菁),其末端带有炔基 (yne) 修饰。由于组织吸收和自发荧光极低,近红外区域 (700-1000 nm) 是体内成像的最佳选择,能够实现深层组织穿透 (1-2 cm)。炔基可作为铜催化叠氮-炔环加成 (CuAAC) 点击化学反应的“把手”,从而与叠氮标记分子(例如叠氮化抗体、叠氮糖、叠氮核苷酸)进行共价偶联。该产品广泛用于预靶向成像策略、细胞追踪和术中荧光引导手术。Cy7-YNE 未获准用于人体,仅供研究用途。请以粉末形式储存于 -20℃,避光保存。储备液(1-10 mM,溶于无水DMSO)在惰性气氛(Ar或N2)下于-20℃可稳定保存数月,以防止氧化。三氟乙酸盐形式(如有)可在中和后提高水溶性。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C38H45N3O7S2
分子量
719.91
外观&性状
Light yellow to green yellow solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO :~50 mg/mL (~69.45 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3891 mL 6.9453 mL 13.8906 mL
5 mM 0.2778 mL 1.3891 mL 2.7781 mL
10 mM 0.1389 mL 0.6945 mL 1.3891 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们