CY7-N3 (Sulfo-Cyanine7-N3)

目录号: V77125 纯度: ≥98%
CY7-N3 (Sulfo-Cyanine7-N3) 是一种用于点击化学的水溶性近红外叠氮染料。
CY7-N3 (Sulfo-Cyanine7-N3) 产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
CY7-N3(磺基花菁7-N3)是一种水溶性近红外叠氮化物染料,用于点击化学。
CY7-N3(磺基花菁7-N3)是一种水溶性近红外(NIR)荧光染料,含有叠氮官能团(-N3)。它是CY7的衍生物,设计用作点击化学试剂。该叠氮基团可与含炔烃分子发生铜催化叠氮-炔烃环加成反应(CuAAc),或与含DBCO/BCN分子发生应变促进的炔烃-叠氮环加成反应(SPAAC)。
生物活性&实验参考方法
靶点
CY7-N3 does not bind to a biological target; it is a chemical labeling reagent. The azide group (-N3) enables bioorthogonal conjugation via click chemistry reactions with alkyne, DBCO, or BCN functional groups. The CY7 fluorophore provides NIR fluorescence for detection and imaging. This click chemistry approach allows labeling of biomolecules without interfering with biological functions.
体外研究 (In Vitro)
在体外,CY7-N3 可用作点击化学的荧光标记剂。对于 CuAAc 反应,将炔基标记分子与 CY7-N3(1-5 当量)在含有 10-20% DMSO 的 PBS 缓冲液(pH 7.4)中,于 37℃ 孵育 1-12 小时,缓冲液中还需加入 CuSO4(1 mM)和抗坏血酸钠(2-5 mM)。对于 SPAAC 反应,将 CY7-N3 与 DBCO 或 BCN 偶联分子(1:1 比例)在 PBS 缓冲液(pH 7.4)中于 37℃ 孵育 2-4 小时,或在 4℃ 孵育过夜。标记产物经透析或尺寸排阻色谱纯化后,可用于荧光显微镜或流式细胞术等下游应用。
体内研究 (In Vivo)
CY7-N3 不直接用于体内活性研究。它通过点击化学反应标记靶向配体(例如抗体、肽、纳米颗粒)。然后将 CY7 标记的缀合物静脉注射到动物模型中,用于近红外荧光成像,从而实现对生物分布、肿瘤靶向和细胞过程的非侵入性追踪。CY7-N3 的水溶性有利于配制用于偶联反应以及后续体内给药的标记缀合物。
酶活实验
在体外点击化学偶联反应中,CY7-N3 不用于酶结合实验。标准偶联方案:对于 CuAAc 偶联,将 1 umol 炔基功能化的生物分子溶解于 100 uL 脱气 PBS 缓冲液(pH 7.4)中。加入 1-1.5 umol CY7-N3(1-1.5 当量)、100 uL 2 mM CuSO4(终浓度 1 mM)和 100 uL 10 mM 抗坏血酸钠(终浓度 5 mM)。在 37℃ 下轻柔摇动孵育 4-12 小时。对于 SPAAC 偶联,将 1 umol DBCO 偶联分子加入 100 uL PBS 缓冲液(pH 7.4)中,然后加入 1-1.2 umol CY7-N3 的 100 uL PBS 缓冲液(含 10-20% DMSO)。在 37℃ 下孵育 2-4 小时。通过薄层色谱(硅胶,10% 甲醇/二氯甲烷)或液相色谱-质谱联用监测偶联反应。通过尺寸排阻色谱(例如,Sephadex G-25 柱)或透析(截留分子量 3.5-10 kDa)进行纯化。通过测量 750 nm(CY7)和 280 nm(蛋白质)处的吸光度来确定标记效率。
细胞实验
在基于细胞的检测中,CY7标记的生物分子用于细胞摄取研究。将细胞(例如,1-2×10⁵个细胞/孔)接种于8孔培养皿中,并培养过夜。将CY7标记的探针以1-10 ug/mL的浓度(基于蛋白质浓度)加入培养基中,并在37℃下孵育1-4小时。用PBS洗涤细胞(3次),用4%多聚甲醛固定(15分钟,室温),用Hoechst 33342对细胞核进行复染,然后封片。荧光成像的激发/发射波长为750/775 nm。为了评估细胞活力,使用标准的MTT或CellTiter-Glo检测方法分析用标记探针处理的细胞,以确保没有非特异性细胞毒性。
动物实验
在体内动物研究中,通常将CY7标记的缀合物通过尾静脉注射给药给皮下移植了肿瘤异种移植瘤的小鼠。剂量:每只小鼠50-100 μg标记蛋白(例如抗体),溶于100-200 μL PBS缓冲液(pH 7.4)中。注射后1、6、12、24、48和72小时,使用激发波长为745-755 nm、发射波长为800 nm的带通滤波器成像系统进行体内近红外荧光成像。在终点时间点(例如72小时),处死小鼠,并收集器官(肿瘤、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏)进行离体成像,以量化生物分布。肿瘤/背景比值通过将肿瘤中的荧光信号除以邻近正常组织(例如肌肉)中的荧光信号来计算。可以通过在多个时间点(例如 5 分钟、1、4、8、24、48 小时)采集血液样本,并在血浆中进行离体荧光测量来确定药代动力学参数(AUC、半衰期)。
药代性质 (ADME/PK)
CY7-N3 的分子量为 763.95 Da。该化合物为固体(通常为黄色至深蓝色粉末),应避光储存于 -20℃。溶解度:DMSO(80 mg/mL,104.72 mM);水(由于磺酸基团的存在而可溶于水)。对于体内制剂,常用的溶剂为 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% 生理盐水,可得到浓度为 3.3 mg/mL (4.32 mM) 的澄清溶液。工作溶液应新鲜配制并立即使用。储备液应储存于 -80℃,保存时间最长可达 6 个月,并避免反复冻融。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
CY7-N3 是一种水溶性近红外染料叠氮化物,适用于点击化学反应。在典型的研究浓度(用于偶联反应的微摩尔至低毫摩尔浓度范围)下,该化合物被认为无毒。然而,操作该化合物时应格外小心(佩戴手套、实验服和护目镜)。本产品仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。目前尚未有明显的急性毒性报告。对于体内研究,应进行标准的安全性监测(体重、行为)。
其他信息
CY7-N3(磺基花菁7-N3)是一种近红外荧光染料和点击化学试剂。主要特点:(1) CY7荧光团的激发/发射波长最大值约为750/775 nm,可用于深层组织成像;(2) 磺酸基团赋予其优异的水溶性,无需在偶联反应中使用有机溶剂;(3) 叠氮基团可通过CuAAc或SPAAC点击反应进行生物正交偶联;(4) 水溶性近红外染料叠氮化物适用于通过点击反应进行细胞成像。纯度通常≥97%(HPLC测定)。常见应用:用于体外和体内成像的蛋白质、抗体、核酸和纳米颗粒的荧光标记。本产品尚未获准用于临床。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C38H47N6O7S2
分子量
763.95
外观&性状
Purple to purplish red solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO :~100 mg/mL (~130.90 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3090 mL 6.5449 mL 13.0899 mL
5 mM 0.2618 mL 1.3090 mL 2.6180 mL
10 mM 0.1309 mL 0.6545 mL 1.3090 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们