| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 40 nM (CaMKII)[1].
AIP targets the substrate‑binding site of CaMKII, preventing the phosphorylation of CaMKII substrates. Unlike ATP‑competitive inhibitors, AIP binds to the kinase domain in a manner that blocks access of peptide substrates while allowing ATP binding. AIP has high selectivity for CaMKII over other kinases, including PKA, PKC, CaMKI, CaMKIV, MLCK and PKG, with IC50 values typically in the low micromolar range (1‑5 uM for CaMKII). |
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| 体外研究 (In Vitro) |
研究发现，在有或无 Ca2+/钙调蛋白的情况下均具有活性的 Autocamtide-2 相关抑制肽 (TFA) 是 CaM 激酶 II 的强效抑制剂，IC50 为 40 nM。在所用的测试条件下，其抑制效果分别是 CaMK-(281-302Ala286) 和 KN-93 的 50 倍和 500 倍[1]。
AIP 在无细胞激酶活性测定中抑制 CaMKII 活性，IC50 值约为 1-10 uM，具体数值取决于底物浓度。该肽作为竞争性抑制剂与肽底物结合，其 Ki 值在低微摩尔范围内（Ki ~1 uM）。在浓度高达 50 uM 时，AIP 对其他嗜碱性激酶（PKA、PKC、CaMKI、CaMKIV、MLCK）的抑制作用不显著。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AIP 具有细胞渗透性，已被用于多种离体和体内模型中抑制 CaMKII 活性。例如，在啮齿动物脑片中，灌注 AIP（5-50 uM）可抑制长时程增强 (LTP) 的诱导，LTP 是一种 CaMKII 依赖性的突触可塑性形式。在心肌细胞中，胞内递送 AIP（通过膜片钳吸管或细胞渗透性 TAT 偶联物）可阻断 CaMKII 依赖性的致心律失常活性和肥大信号传导。
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| 酶活实验 |
标准体外CaMKII抑制试验（放射性）：将重组CaMKII（10 nM）与AIP TFA（0.1-50 uM）在试验缓冲液（50 mM HEPES pH 7.4、10 mM MgCl2、0.5 mM CaCl2、1 uM钙调蛋白、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA）中于室温预孵育10分钟。加入50 uM autocamtide-2或autocamtide-3底物肽和100 uM ATP（含0.5 uCi/孔33P-ATP）启动反应。30℃孵育10分钟后，将反应液点样至P81滤纸上，并按所述方法洗涤以终止反应。使用Cheng-Prusoff方程，根据剂量-反应曲线计算IC50和Ki值。不添加抑制剂的对照组测定最大活性。
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| 细胞实验 |
通用细胞CaMKII活性抑制实验：将原代神经元、心肌细胞或细胞系（例如，转染CaMKII的HEK293细胞）用1-20 uM的细胞可渗透性AIP（例如，肉豆蔻酰化AIP、TAT-AIP）处理30-60分钟，或者通过膜片钳电极导入AIP进行电生理检测。对于基于Western blot的活性检测，刺激细胞以激活CaMKII（例如，用离子霉素诱导Ca2+内流，或用电刺激神经元）。裂解细胞后，使用磷酸化特异性抗体检测CaMKII底物的磷酸化水平（例如，神经元用磷酸化GluR1 Ser831抗体，心肌细胞用磷酸化PLN Thr17抗体）。AIP以浓度依赖的方式抑制磷酸化。可通过LDH释放或台盼蓝排除法评估细胞活力。
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| 动物实验 |
体外CaMKII抑制的一般动物实验方案：处死雄性C57BL/6小鼠（每组n=5），迅速解剖海马或心脏。使用振动切片机制备急性脑片（厚度300-400 μm），并在32℃下用95% O₂/5% CO₂氧合的人工脑脊液（ACSF）中孵育。在通过高频刺激Schaffer侧支诱导长时程增强（LTP）前30-60分钟，用AIP TFA（5-20 μM）灌注脑片。对于心脏研究，通过Langendorff灌注分离成年大鼠心室肌细胞，并通过膜片钳电极将AIP（1-10 μM）透析到细胞内。使用全细胞膜片钳或荧光成像记录动作电位时程（APD）和Ca²⁺瞬变。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种肽，AIP TFA 的血浆半衰期很短（仅几分钟），这是由于全身给药后易被蛋白水解酶快速降解所致。为了提高体内稳定性和细胞摄取率，通常会使用修饰版本，例如肉豆蔻酰化 AIP (Myr-AIP) 或 TAT 偶联的 AIP。TFA 盐具有良好的水溶性 (>5 mg/mL)，便于配制成水性缓冲液。对于体外应用，AIP 可直接添加到灌注液或浴液中。Autocamtide-2 相关抑制肽 TFA 是一种研究级化合物，不适用于人类治疗。尚未对母体肽进行系统的毒性研究。在体外和体外实验中使用的浓度 (1-50 μM) 下，该肽通常无细胞毒性。在使用修饰的细胞渗透性版本的动物研究中，高剂量 (>20 μM) 时注射部位可能会出现轻微的局部炎症。操作时应采取标准安全防护措施（戴手套、穿实验服）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AIP 的肽序列为 KKALHRQEAVDAL（或类似序列，取决于生产商），对应于 CaMKII 的自身抑制区域（氨基酸残基 281-309）。它是一种高选择性的 CaMKII 抑制剂，常用作 autocamtide-2 底物研究的阴性对照。AIP 以冻干的 TFA 盐形式提供，应储存于 -20℃，避光防潮。仅供研究使用；不可用于诊断或治疗。Autocamtide-2 相关抑制肽 TFA 广泛应用于神经科学、心脏生理学和癌症研究，用于阐明 CaMKII 依赖性信号通路。
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| 分子式 |
C66H126N22O21F3
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|---|---|
| 分子量 |
1611.76
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| 相关CAS号 |
Autocamtide-2-related inhibitory peptide;167114-91-2
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~110 mg/mL (~68.25 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (31.02 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.6204 mL | 3.1022 mL | 6.2044 mL | |
| 5 mM | 0.1241 mL | 0.6204 mL | 1.2409 mL | |
| 10 mM | 0.0620 mL | 0.3102 mL | 0.6204 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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