| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ATF3 inducer 1 targets the cellular stress response pathway, leading to the upregulation of ATF3 gene expression. ATF3 acts as a transcriptional repressor or activator depending on the cellular context and the nature of the stress. In many contexts, ATF3 functions as a negative regulator of the inflammatory response by repressing the expression of pro‑inflammatory cytokines (e.g., TNF‑alpha, IL‑6, IL‑12) and chemokines. The exact molecular target of ATF3 inducer 1 is not fully elucidated but may involve the activation of stress‑sensing pathways (e.g., p38 MAPK, JNK, ER stress pathway).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 3T3-L1 细胞中，ATF3 诱导剂 1（化合物 16c）（50 μM；8 天）刺激 ATF3 mRNA 和蛋白质的表达[1]。
在无细胞检测中（不适用于转录诱导剂），ATF3诱导剂1的活性在基于细胞的系统中进行评估。在多种细胞系（例如巨噬细胞、肝细胞、癌细胞）中，用ATF3诱导剂1（1-20 uM）处理4-24小时后，ATF3 mRNA和蛋白水平呈剂量和时间依赖性增加，这可通过qPCR和Western blot检测。通常在4-8小时观察到最大诱导作用。该化合物也可能激活ATF3启动子，这可通过报告基因检测（ATF3-荧光素酶）进行评估。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
ATF3 诱导剂 1（40 mg/kg；腹腔注射；每周三次，持续十周）对小鼠具有抗代谢综合征 (MetS) 作用[1]。
在体内，ATF3诱导剂1已在炎症性疾病（例如结肠炎、脓毒症、急性肺损伤、动脉粥样硬化）的小鼠模型中进行了评估。全身给药（腹腔注射或口服）可诱导多种组织（例如结肠、肺、肝脏、脂肪组织）中ATF3的表达，并减少促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）和趋化因子的产生，从而减轻组织损伤，提高生存率并促进炎症消退。该化合物在有效剂量下通常具有良好的耐受性。 |
| 酶活实验 |
标准 ATF3 mRNA 诱导实验（基于细胞）：将细胞（例如 RAW264.7 巨噬细胞、HepG2 肝细胞、HeLa 细胞）接种于 6 孔板（5×10⁵ 个细胞/孔），并使其过夜贴壁。加入 ATF3 诱导剂 1（0.1-50 uM），并将细胞孵育 2-24 小时。使用 TRIzol 或 RNA 提取试剂盒提取总 RNA。进行逆转录以生成 cDNA。使用 ATF3 特异性引物通过 qPCR 定量 ATF3 mRNA 水平，并以管家基因（例如 GAPDH、β-肌动蛋白、18S rRNA）进行标准化。使用 ΔΔCt 法计算相对于载体对照组的诱导倍数。建议进行时间进程实验（2、4、8、12、24 小时）以确定最佳诱导时间。 EC50 值可以从最佳时间点的剂量反应曲线中得出。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： 3T3-L1 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育时间： 8 天 实验结果： ATF3 蛋白和 ATF3 mRNA 表达增加，未观察到脂质积累。 细胞ATF3蛋白诱导实验：如上所述，用ATF3诱导剂1处理细胞。用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液（或SDS-PAGE上样缓冲液）裂解细胞。采用BCA法测定蛋白浓度。取等量蛋白（20-30 ug）进行SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜，并用抗ATF3抗体（4℃过夜）进行孵育，随后用HRP标记的二抗进行孵育。通过化学发光法检测ATF3蛋白水平，并以内参（例如β-肌动蛋白、GAPDH、微管蛋白）进行标准化。使用ImageJ或类似软件进行密度分析。ATF3蛋白的诱导结果应与mRNA的诱导数据一致。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 八周龄 C57BL/6 雄性小鼠[ 1]
剂量： 40 mg/kg 给药途径： 腹腔注射；每周三次，持续 10 周 实验结果： 体重减轻，附睾白色脂肪组织 (eWAT) 脂肪细胞体积显著缩小。 一种通用的体内小鼠结肠炎模型：雄性C57BL/6小鼠（每组n=8）饮用水中添加3%葡聚糖硫酸钠（DSS）5-7天以诱导急性结肠炎。从第0天或第2天开始，每日腹腔或口服给予ATF3诱导剂1（10-50 mg/kg）。根据体重减轻、粪便性状和粪便出血情况，每日计算疾病活动指数（DAI）。在实验终点（第7-9天），处死小鼠并测量结肠长度。收集结肠组织进行组织学（H&E染色）、免疫组织化学（ATF3、F4/80、MPO）和细胞因子ELISA检测（TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10）。通过qPCR和Western blot验证结肠中ATF3的表达。也可采用脓毒症模型：将小鼠腹腔注射LPS（10-20 mg/kg）或进行盲肠结扎穿刺术（CLP）。在损伤前后给予ATF3诱导剂1，并监测72-96小时的存活情况。检测血清细胞因子水平，并评估组织损伤。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ATF3诱导剂1具有中等的口服生物利用度（啮齿动物中F%为30-60%）和较短至中等的血浆半衰期（t1/2为2-4小时）。该化合物经肝脏CYP酶（可能是CYP3A4）代谢，具有中等的血浆蛋白结合率（PB%为70-85%）。血浆峰浓度（Cmax）通常在给药后1-2小时达到。在体内疗效研究中，ATF3诱导剂1通常配制成0.5%甲基纤维素或5% DMSO/10% Tween 80/85%生理盐水用于口服，或配制成含5-10% DMSO的生理盐水用于腹腔注射。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前研究中，ATF3诱导剂1在小鼠体内耐受性良好，剂量高达100 mg/kg（口服），持续7-14天，未观察到死亡或明显的体重减轻。较高剂量（≥100 mg/kg）时，可能出现轻微的胃肠道不适（腹泻、食欲下降）。初步Ames试验表明该化合物不具有遗传毒性。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ATF3诱导剂1是一种研究用化合物，目前尚无获批的临床适应症。它被用作药理学工具，用于研究ATF3在多种生物过程中的作用，包括炎症、代谢、癌症、神经退行性疾病和组织修复。该化合物通过诱导ATF3的表达，模拟内源性应激反应，有助于识别ATF3依赖的保护性或致病性通路。ATF3是炎症消退的关键调节因子，ATF3诱导剂正被探索作为治疗炎症性疾病、脓毒症和代谢紊乱的潜在药物。仅供研究使用，不得用于人体治疗。
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| 分子式 |
C12H10N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
230.22
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~65 mg/mL (~282.34 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.03 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.03 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.3437 mL | 21.7184 mL | 43.4367 mL | |
| 5 mM | 0.8687 mL | 4.3437 mL | 8.6873 mL | |
| 10 mM | 0.4344 mL | 2.1718 mL | 4.3437 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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