AMARA peptide TFA

目录号: V77269 纯度: ≥98%
AMARA 肽 (TFA) 是盐诱导激酶 (SIK) 和腺苷酸激活蛋白激酶 (AMPK) 的底物。
AMARA peptide TFA 产品类别: AMPK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
AMARA 肽 (TFA) 是盐诱导激酶 (SIK) 和腺苷酸激活蛋白激酶 (AMPK) 的底物。
AMARA肽TFA是一种合成肽底物,可用于AMPK(AMP激活蛋白激酶)和盐诱导激酶(SIKs)。它是一种由15个氨基酸组成的肽(序列:AMARAASAAALARRR),包含这些激酶的核心识别基序,用于生化激酶测定,以在体外测量激酶活性。
生物活性&实验参考方法
靶点
The peptide is a substrate for AMPK and SIK (salt-inducible kinase). It does not bind to the peptide as a therapeutic target; rather, it serves as an artificial substrate for measuring the catalytic activity of these kinases in vitro.
体外研究 (In Vitro)
在激酶活性测定中,纯化的AMPK或SIK将磷酸基团从ATP转移到AMARA肽内的特定丝氨酸/苏氨酸残基上。这种磷酸化可以通过放射性(32P-ATP掺入)或基于发光的方法检测。
体内研究 (In Vivo)
AMARA肽仅供体外实验研究使用。它不可用于体内给药,也不具备在活体生物体内的固有生物活性。其用途严格限于无细胞生化分析,不可用于动物研究。
酶活实验
典型的体外激酶活性测定:将纯化的AMPK或含有该激酶的细胞裂解液与反应缓冲液(MgCl2、ATP和32P-ATP或未标记的ATP)以及AMARA肽底物(10-100 uM)孵育。在30℃下孵育30分钟后终止反应。将磷酸化肽收集到磷酸纤维素滤纸或链霉亲和素包被的微孔板(如果已生物素化)上。测量放射性或发光值。
细胞实验
由于AMARA肽无法穿过细胞膜,因此不用于活细胞实验。对于细胞激酶活性测定,细胞经调节剂处理后进行裂解,然后将裂解液与AMARA肽一起用于体外激酶活性测定,以定量AMPK或SIK活性。
动物实验
不适用。AMARA肽是一种用于无细胞生化分析的合成底物,不用于体内动物实验。它严格来说是一种体外研究工具,用于定量裂解液或纯化酶制剂中的激酶活性。
药代性质 (ADME/PK)
该肽以干粉形式在-20℃下可长期稳定保存。在水溶液中,于-80℃或-20℃下短期(数天至数周)储存稳定。它能抵抗快速的非特异性蛋白水解,但长时间保存后可能会降解。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于AMARA肽未在动物或细胞培养中使用,且浓度未达到可能产生毒性的水平,因此未报告其毒性。处理合成肽时,应遵循标准的实验室预防措施。
参考文献

[1]. Lkb1 controls brown adipose tissue growth and thermogenesis by regulating the intracellular localization of CRTC3. Nat Commun. 2016 Jul 27;7:12205.

其他信息
AMARA肽序列(AMARAASAAALARRR)源自AMPK的共有磷酸化基序(φ-X-Arg-XX-Ser/Thr-XX-φ,其中φ为疏水性基团)。它是AMPK活性测定中广泛使用的标准底物,并在数百篇已发表的研究中出现。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C64H116F3N27O18S
分子量
1640.84
相关CAS号
AMARA peptide;163560-19-8
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~50 mg/mL (~30.47 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 33.33 mg/mL (20.31 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.6094 mL 3.0472 mL 6.0944 mL
5 mM 0.1219 mL 0.6094 mL 1.2189 mL
10 mM 0.0609 mL 0.3047 mL 0.6094 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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