| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: MYOF[1]
Myoferlin (MYOF). HJ445A specifically binds to the MYOF-C2D domain with a KD of 0.17 μM. MYOF is a 230 kDa protein belonging to the ferlin family, characterized by multiple C2 domains (C2A through C2F) that mediate calcium-dependent phospholipid binding and membrane fusion. The C2D domain of MYOF is one of the calcium-binding domains that is critical for MYOF's function in membrane trafficking and cell signaling. By binding to the C2D domain with high affinity, HJ445A likely interferes with MYOF's ability to mediate membrane fusion events, thereby disrupting MYOF-dependent cellular processes such as cell migration, invasion, and EMT. MYOF is overexpressed in various cancers and has been implicated in tumor progression, metastasis, and poor prognosis. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
HJ445A 对胃癌细胞表现出强效的抗增殖活性，在 MGC803 细胞中的 IC50 值为 0.16 μM，在 MKN45 细胞中的 IC50 值为 0.14 μM。这些亚微摩尔级的 IC50 值表明 HJ445A 是一种高效的胃癌细胞增殖抑制剂。除了抑制增殖外，HJ445A 还以浓度依赖的方式抑制 MKN45 细胞的克隆形成，提示其能够抑制癌细胞的长期克隆形成能力。其作用机制与 MYOF 抑制有关：HJ445A 通过与 MYOF-C2D 结构域结合，破坏 MYOF 介导的信号通路，从而抑制癌细胞的增殖和存活。此外，HJ445A 还通过逆转上皮-间质转化 (EMT) 过程（癌症转移的关键步骤）来抑制胃癌细胞的迁移。
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| 体内研究 (In Vivo) |
HJ445A在体内展现出卓越的抗肿瘤活性。在胃癌临床前模型中，HJ445A能有效抑制肿瘤的生长和进展。该化合物优异的水溶性（与化合物6y相比提高了约170倍）有利于体内给药，并确保了足够的生物利用度。HJ445A通过逆转EMT过程来抑制胃癌细胞的迁移，而EMT是癌细胞获得侵袭性和转移性的关键机制。通过抑制MYOF并逆转EMT，HJ445A不仅抑制原发肿瘤的生长，而且降低了癌细胞的转移潜能。这些体内疗效数据支持HJ445A作为胃癌和其他MYOF过表达肿瘤治疗药物的潜力。
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| 酶活实验 |
采用表面等离子共振 (SPR) 或等温滴定量热法 (ITC) 测定 HJ445A 与重组 MYOF-C2D 结构域的结合亲和力。在 SPR 中，将重组 MYOF-C2D 蛋白固定在传感器芯片上，并将不同浓度的 HJ445A 注入芯片表面。实时测量结合响应（以共振单位表示），并从传感器图中确定结合速率常数 (ka) 和解离速率常数 (kd)。平衡解离常数 (KD) 计算为 kd/ka，得出 HJ445A 与 MYOF-C2D 结合的 KD 值为 0.17 μM。在 ITC 中，通过测量 HJ445A 与 MYOF-C2D 结构域结合时释放或吸收的热量来确定结合亲和力，从而获得结合化学计量比和热力学参数 (ΔH, ΔS)。
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| 细胞实验 |
将胃癌细胞系（MGC803 和 MKN45）用不同浓度（通常为纳摩尔至微摩尔级）的 HJ445A 处理 72 小时。采用标准比色法检测细胞增殖，例如 CCK-8（细胞计数试剂盒-8）或 MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）。在 450 nm (CCK-8) 或 540-570 nm (MTT) 处读取吸光度，并根据剂量反应曲线计算 IC50 值。在软琼脂中进行克隆形成实验，或将细胞以低密度接种并培养 10-14 天，以评估长期抗增殖作用。对克隆进行染色（例如用结晶紫染色）并计数，以确定克隆形成存活率的抑制情况。其他检测方法可能包括评估细胞迁移（伤口愈合或Transwell检测）和通过Western印迹法检测EMT标志物（E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白）。
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| 动物实验 |
将携带胃癌肿瘤（MGC803 或 MKN45 细胞皮下移植）的小鼠异种移植模型，通过口服或腹腔注射途径给予不同剂量的 HJ445A。定期使用游标卡尺（长 × 宽²/2）测量肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。治疗通常持续 2-4 周，或直至肿瘤达到预定大小。在研究终点，收集肿瘤进行组织病理学分析（例如，H&E 染色）和生物标志物评估（例如，Ki-67 等增殖标志物、EMT 标志物和 cleaved caspase-3 等凋亡标志物的免疫组织化学染色），以确认体内抗肿瘤疗效和靶点结合情况。HJ445A 优异的水溶性使其易于制剂化，并确保体内药物暴露的稳定性。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于水溶性显著提高（与化合物 6y 相比提高约 170 倍），预计该化合物具有良好的口服生物利用度。良好的水溶性是口服吸收和生物利用度的关键决定因素，因为它有助于药物在胃肠道中的溶解，并促进其透过肠上皮细胞。代谢稳定性可能主要通过肝脏 CYP450 酶介导，清除率适中。通常在相关剂量水平下，对啮齿动物进行静脉和口服给药后，测定标准药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t1/2、清除率、分布容积）。使用合适的载体（例如，DMSO/PEG400/生理盐水混合物或水性缓冲液）配制制剂，可充分利用该化合物优异的溶解性。现有文献中关于 HJ445A 的详细药代动力学数据报道较少。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
基于对MYOF的选择性靶向作用，预计该化合物在临床前动物模型中治疗剂量下具有可接受的安全性。MYOF主要在肌肉和某些癌细胞中表达，其正常功能参与膜转运和修复。抑制MYOF可能影响正常组织稳态，尤其是在MYOF高表达的组织中。需要进行啮齿动物的标准毒理学研究，以评估急性毒性和重复给药毒性，识别潜在的靶点相关效应，并确定治疗窗口。作为一种研究化合物，详细的毒理学数据尚未公开。该化合物仅供研究使用，不得用于人类治疗。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HJ445A是一种用于癌症研究的研究级小分子MYOF抑制剂。分子式：C24H27N7O2，分子量：445.52。可溶于DMSO（100 mg/mL）。通常在-20°C下储存以保持长期稳定性。别名：HJ445-A，H-J445-A。该化合物表现出优异的水溶性（与化合物6y相比提高约170倍），这对体内研究是一个显著优势。HJ445A用于研究肌肉蛋白在癌症发病机制中的作用，特别是在胃癌中，代表了一种验证MYOF作为治疗靶点的有前景的工具。仅供研究使用，不用于人类治疗。
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| CAS号 |
3032441-59-8
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~224.46 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.61 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 透明 DMSO 储备液，并将其添加到 400 μL PEG300 中并充分混合。 然后向上述体系中加入50 μL Tween-80，混匀。 然后继续加入450 μL生理盐水至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.61 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液，并将其添加到 900 μL 20% SBE-β-CD 盐水溶液中并充分混合。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.61 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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