| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The target of PROTAC EGFR degrader 3 is the epidermal growth factor receptor (EGFR), specifically its mutant forms including the T790M and exon 19 deletion variants. The mechanism of action involves the formation of a ternary complex among the PROTAC, EGFR, and an E3 ubiquitin ligase (likely cereblon or VHL). This complex induces ubiquitination of EGFR, marking it for degradation by the lysosome or proteasome. Unlike inhibitors that block kinase activity, PROTACs eliminate the target protein entirely. The compound has been shown to recruit lysosomal machinery for the degradation of EGFR mutants, offering a novel approach to target the oncogenic driver in lung cancer.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
PROTAC EGFR 降解剂 3（化合物 CP17）的抗增殖功效已得到证实，其对 H1975 (EGFRL858/T790M)、HCC827 (EGFRdel19) 和 A431 (EGFRWT) 细胞的 IC50 值分别为 32 nM、1.60 nM 和 >10000 nM [1]。PROTAC EGFR 降解剂 3（0、10、100、1000 和 10000 nM）的细胞活性较差，对 Ba/F3 (EGFRdel19/T790M/C797S) 和 Ba/F3 (EGFRL858/T790M/C797S) 细胞的 IC50 值分别为 481 nM 和 669 nM [1]。 PROTAC EGFR降解剂3（0-10000 nM）分别抑制PC9（EGFRdel19/T790M/C797S）和H1975（EGFRL858/T790M/C797S）细胞的生长[1]。PROTAC EGFR降解剂3（30 nM；0-72小时）处理8小时后可降低EGFRL858/T790M的表达，并在48小时后达到降解峰值[1]。PROTAC EGFR降解剂3（0.3、1、3、10、100、300 nM；24、48小时）可降解EGFRL858/T790M和EGFRdel19，其DC50值分别为1.56 nM和0.49 nM[1]。在H1975和HCC827细胞中，PROTAC EGFR降解剂3（100、1000 nM；24小时）对突变型EGFR具有选择性[1]。PROTAC EGFR降解剂3（0.3、1、3、10、100和300 nM；24小时）可抑制细胞生长，有效抑制EGFR信号转导[1]。PROTAC EGFR降解剂3（30 nM）可降解EGFR突变体，溶酶体参与此过程[1]。
体外研究表明，PROTAC EGFR降解剂3具有优异的细胞活性，且对EGFR突变型非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系具有高度选择性。在H1975细胞（EGFR L858R/T790M）中，该化合物表现出强效的抗增殖活性，对NR6wtEGFR细胞中磷酸化EGFR靶点（如Tyr992和Tyr1173）的IC₅0值低至37 nM。在0.3至300 nM的浓度范围内，作用24小时后，该化合物可有效抑制EGFR信号转导。Western blot分析证实，PROTAC能有效诱导EGFR蛋白降解，且EGFR蛋白水平呈浓度依赖性降低。此外，溶酶体参与了EGFR突变体的降解过程，这使其降解机制区别于蛋白酶体降解。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于PROTAC EGFR降解剂3主要用于体外应用，因此已发表的体内疗效数据有限。鉴于其在细胞实验中表现出的强效活性以及对突变型EGFR的高选择性，预计该化合物在源自H1975或HCC827细胞系的异种移植小鼠模型中将显示出抗肿瘤活性。基于其他靶向EGFR的PROTAC分子，研究人员通常采用口服或腹腔注射给药，剂量范围为10至100 mg/kg。疗效将通过肿瘤体积缩小和消退来评估，并通过肿瘤裂解物的Western blot分析来确认体内靶点降解情况。目前尚未公开详细的动物研究数据，但该化合物显然是为最终的体内验证而设计的。
|
| 酶活实验 |
利用三元复合物形成实验评估PROTAC介导的降解的分子机制。该实验通常涉及纯化的EGFR蛋白（或激酶结构域构建体）、PROTAC化合物和E3连接酶复合物（例如，cereblon/DDB1）。结合亲和力采用AlphaScreen或TR-FRET技术进行测定。将生物素标记的EGFR蛋白与PROTAC和His标签的E3连接酶复合物混合。三元复合物形成后，当供体和受体微珠靠近时会产生信号。对于直接结合，可以使用表面等离子共振（SPR）技术，其中PROTAC被固定，EGFR和E3连接酶依次流动以评估协同结合。这些实验在室温下进行，缓冲液中含有0.1% BSA和0.05% Tween-20。
|
| 细胞实验 |
细胞增殖试验[1]
细胞类型： H1975 (EGFRL858/T790M)、HCC827 (EGFRdel19)、A431 (EGFRWT) 细胞 测试浓度： 孵育时间： 72 小时 实验结果： PROTAC 对 H1975 (EGFRL858/T790M)、HCC827 (EGFRdel19) 和 A431 (EGFRWT) 细胞均表现出抗增殖活性，IC50 分别为 32 nM、1.60 nM 和 >10000 nM。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： H1975、HCC827 细胞 测试浓度： 0.3、1、3、10、30 nM 孵育时间： 24 小时 实验结果： H1975 和 HCC827 细胞中磷酸化 EGFR、ERK 和 AKT 显著减少。 体外细胞活性通常在H1975（EGFR L858R/T790M）和HCC827（EGFR 19号外显子缺失）非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系中进行评估。将细胞接种于6孔或96孔板中，并用递增浓度的PROTAC（例如，0.3、1、3、10、30、100、300 nM）处理24小时。通过制备细胞裂解液并使用抗EGFR抗体进行Western blot分析来评估靶标降解情况，同时使用抗GAPDH或抗β-肌动蛋白抗体作为上样对照。半数最大降解浓度（DC₅0）可通过密度分析计算。使用CellTiter-Glo细胞活力检测法在处理72-96小时后测量抗增殖效应。流式细胞术可用于使用Annexin V/PI染色评估细胞凋亡。 |
| 动物实验 |
对于体内研究，标准方案是使用皮下移植H1975或HCC827异种移植瘤的雌性BALB/c裸鼠。当肿瘤体积达到约150-200 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=6-8）。PROTAC EGFR降解剂3配制于10% DMSO + 40% PEG400 + 50%生理盐水等溶剂中，通过灌胃（po）或腹腔（ip）给药，剂量分别为10、30和100 mg/kg，每日一次或隔日一次，持续21天。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积。采集血样进行药代动力学（PK）分析。在研究终点，切除肿瘤，称重，并进行Western blot分析以确认体内EGFR降解情况。监测体重以评估毒性。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
PROTAC EGFR降解剂3的详细药代动力学数据尚未公开。作为一种分子量为1092.4 g/mol的PROTAC分子，由于其高分子量和多个氢键供体/受体的存在，其口服生物利用度可能较差。该化合物可能需要与增溶剂（例如Kolliphor EL、PEG400）配制以提高暴露量。由于肽样连接子的代谢，预计其在啮齿动物体内的半衰期较短（1-4小时）。定量药代动力学分析将采用LC-MS/MS方法测定血浆浓度。单次静脉或口服给药后，将测定Cmax、Tmax、AUC(0-∞)、清除率和分布容积等关键参数。该化合物通常以粉末形式储存于-20℃，并应在惰性条件下操作。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PROTAC EGFR降解剂3的毒理学数据目前尚无公开资料。作为一种研究化合物，其毒性评估通常在初步的体内研究中进行。基于其诱导蛋白质降解的机制，潜在的毒性可能包括与正常组织中野生型EGFR降解相关的靶向毒性（例如皮疹、腹泻）以及其他蛋白质的非靶向降解。典型的急性毒性研究包括对小鼠进行单次递增剂量（例如50、150、500 mg/kg）的口服给药，随后观察14天，记录死亡率、临床症状和体重变化。亚慢性毒性研究包括连续28天每日给药，并检测血清化学、血液学以及主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏）的组织病理学。由于该化合物仍处于研究阶段，因此尚未进行正式的IND申报毒理学研究。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PROTAC EGFR降解剂3是一种研究级化学探针，仅供实验室使用，尚未获准用于人体临床。它代表了一种降解突变型EGFR以克服非小细胞肺癌耐药性的新方法。该化合物纯度高（通常≥97%），以固体粉末形式储存于-20℃。它被归类为PROTAC和蛋白质降解剂，用于靶向蛋白质降解（TPD）领域。目前尚未有针对该化合物的临床试验注册。它属于一类不断增长的异双功能分子，这类分子利用泛素-蛋白酶体系统来清除致病蛋白。该化合物通过溶酶体参与EGFR突变体降解的机制，为蛋白酶体以外的其他降解途径提供了新的见解。
|
| 分子式 |
C60H77N13O5S
|
|---|---|
| 分子量 |
1092.40
|
| 精确质量 |
1091.589
|
| CAS号 |
2768472-28-0
|
| PubChem CID |
162513220
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.31±0.1 g/cm3(Predicted)
|
| LogP |
0
|
| tPSA |
234
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
14
|
| 可旋转键数目(RBC) |
22
|
| 重原子数目 |
79
|
| 分子复杂度/Complexity |
1970
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCN4CCN(CC4)C5=CC=C(C=C5)NC6=NC=C7C(=N6)N(C(=N7)NC8=CC=CC=C8)[C@H]9CCCN(C9)C(=O)C=C)O
|
| InChi Key |
RYXQXEGTLNBKEC-DKQRTKIFSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C60H77N13O5S/c1-7-52(76)71-30-16-19-47(37-71)73-55-49(66-59(73)65-44-17-12-11-13-18-44)36-61-58(68-55)64-45-25-27-46(28-26-45)70-33-31-69(32-34-70)29-15-10-8-9-14-20-51(75)67-54(60(4,5)6)57(78)72-38-48(74)35-50(72)56(77)63-40(2)42-21-23-43(24-22-42)53-41(3)62-39-79-53/h7,11-13,17-18,21-28,36,39-40,47-48,50,54,74H,1,8-10,14-16,19-20,29-35,37-38H2,2-6H3,(H,63,77)(H,65,66)(H,67,75)(H,61,64,68)/t40-,47-,48+,50-,54+/m0/s1
|
| 化学名 |
(2S,4R)-1-[(2S)-2-[8-[4-[4-[[8-anilino-9-[(3S)-1-prop-2-enoylpiperidin-3-yl]purin-2-yl]amino]phenyl]piperazin-1-yl]octanoylamino]-3,3-dimethylbutanoyl]-4-hydroxy-N-[(1S)-1-[4-(4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)phenyl]ethyl]pyrrolidine-2-carboxamide
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~91.54 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9154 mL | 4.5771 mL | 9.1542 mL | |
| 5 mM | 0.1831 mL | 0.9154 mL | 1.8308 mL | |
| 10 mM | 0.0915 mL | 0.4577 mL | 0.9154 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
