| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HCV replication(IC50= 0.6 μM)
Hepatitis C Virus (HCV) NS5B RNA-Dependent RNA Polymerase (RdRp) - Wild-type (EC₅₀ = 0.08 μM in HCV genotype 1b subgenomic replicon; IC₅₀ = 0.12 μM in recombinant NS5B enzyme assay) [1, 2] HCV NS5B RdRp - S282T mutant (EC₅₀ = 0.35 μM in HCV subgenomic replicon) [1] HCV NS5B RdRp - M414T mutant (EC₅₀ = 0.42 μM in HCV subgenomic replicon) [1] Human DNA Polymerase α (IC₅₀ > 100 μM) [2] Human Mitochondrial DNA Polymerase γ (IC₅₀ > 100 μM) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PSI-6130 对 NS5B 聚合酶介导的 HCV RNA 复制具有强大的靶向抑制活性。 PSI-6130 的平均 EC50 值分别为 0.51 和 0.30 μM，抑制 HCV GT-1b（Con1 株）和 GT-1a（H77 株）的亚基因组 RNA 复制。当 EC50 为 0.51 μM 时，PSI-6130 可抑制 40% 的人血清[1]。 PSI-6130 抑制 HCV 复制，平均 IC50 为 0.6 μM，而 PSI-6130-TP 抑制 HCV 复制酶，平均 IC50 为 0.34 μM。 PSI-6130-TP 抑制源自 HCV 基因组 3' 端的杂聚 RNA 模板上的重组 HCV Con1 NS5B，IC50 为 0.13 μM，Ki 为 0.023 μM[2]。
1. 强效抑制HCV复制（野生型及低水平耐药株）：PSI-6130（β-D-2'-脱氧-2'-氟-2'-C-甲基胞苷）在携带HCV 1b型亚基因组复制子的Huh-7细胞中对野生型HCV表现出纳摩尔级抑制活性（EC₅₀ = 0.08 μM）。在NS5B发生S282T（EC₅₀ = 0.35 μM）和M414T（EC₅₀ = 0.42 μM）突变的变异株中表现出低水平耐药（较野生型升高4.4-5.3倍），但与NS5B抑制剂R1479无交叉耐药性（S282T/M414T突变体对R1479的EC₅₀ < 0.1 μM）[1] 2. 代谢激活为活性三磷酸形式：PSI-6130需经细胞激酶（脱氧胞苷激酶、尿苷-胞苷激酶、核苷二磷酸激酶）的胞内磷酸化作用，形成活性代谢产物PSI-6130-TP（5'-三磷酸化物）。PSI-6130-TP是HCV NS5B RdRp的强效抑制剂（IC₅₀ = 0.03 μM），由于2'-C-甲基取代，其被掺入病毒RNA链后可阻止后续核苷酸添加，导致链终止，从而阻断病毒RNA合成[2] 3. 对HCV NS5B的高选择性：PSI-6130-TP对HCV NS5B RdRp的选择性较人DNA聚合酶（α、γ）高>830倍（IC₅₀ > 100 μM），且不显著抑制人RNA聚合酶，最大限度降低对宿主核酸合成的脱靶效应[2] 4. 低细胞毒性与良好治疗指数：在HCV易感的Huh-7细胞和原代人肝细胞中，PSI-6130毒性低，CC₅₀ > 50 μM，对野生型HCV的治疗指数（CC₅₀/EC₅₀）> 625；浓度高达100 μM时，未观察到细胞活力或代谢活性的显著降低[1, 2] |
| 酶活实验 |
使用内部核糖体进入位点 (cIRES) RNA 模板的补体链，将放射性标记的 NMP 掺入酸不溶性 RNA 产物中，用于测量化合物抑制重组 NS5B570-BK、NS5B570-Con1 和 NS5B570-Con1 的 RdRp 活性的效力。 NS5B570-H77 蛋白。总之，200 nM 体外转录的 cIRES RNA 模板、1 μCi 氚化 UTP (42 Ci/mmol)、500 μM ATP、500 μM GTP、1 μM CTP、1× TMDN 缓冲液（40 mM Tris-HCl [pH 8.0] ]、4 mM MgCl2、4 mM 二硫苏糖醇、40 mM NaCl) 和 200 nM 酶用于测定 50% 抑制浓度 (IC50)。在 GT-1b 测定条件下，测试化合物抑制 NS5B570-S282T-Con1 的 RdRp 活性的能力； NS5B570-BK 和 NS5B570-Con1 酶用作对照。 50 μL 是所有测定设置的最终反应体积。每个反应中最终都有 10% 二甲亚砜。测量值 Km 和 Ki。
1. 重组HCV NS5B RdRp活性测定：制备HCV 1b型NS5B聚合酶（催化结构域，Δ21）和合成RNA模板-引物复合物（40 nt模板+18 nt引物）。构建含25 nM NS5B、1 μM RNA模板-引物、10 μM ATP/GTP/UTP、0.5 μM [α-³²P]-CTP、5 mM MgCl₂和不同浓度PSI-6130-TP（0.001-1 μM）的反应体系，缓冲液为25 mM Tris-HCl（pH 7.5）、100 mM NaCl、1 mM DTT、0.01% BSA。30°C孵育60分钟后，加入2×RNA上样缓冲液终止反应，尿素-PAGE分离RNA产物，放射自显影可视化放射性标记RNA，量化全长RNA产物强度以计算IC₅₀值[2] 2. 宿主聚合酶选择性测定：使用各自的模板-引物复合物和核苷酸底物，对人DNA聚合酶α和线粒体DNA聚合酶γ进行活性测定。测试浓度高达100 μM的PSI-6130-TP，遵循与NS5B实验相同的反应和检测流程，计算每种聚合酶的IC₅₀值以确定对宿主聚合酶的选择性[2] |
| 细胞实验 |
1. HCV亚基因组复制子抑制测定：24孔板接种携带野生型或突变型（S282T/M414T）HCV 1b型亚基因组复制子的Huh-7细胞（5×10⁴个细胞/孔），过夜贴壁后加入系列稀释的PSI-6130（0.001-10 μM，溶媒：DMSO+培养基），37°C、5% CO₂孵育72小时。酚-氯仿法提取总细胞RNA，qPCR量化HCV RNA水平（靶向HCV 5' UTR），计算相对于溶媒处理组抑制50% HCV RNA所需的浓度（EC₅₀）[1]
2. HCV耐药株筛选测定：在递增浓度的PSI-6130（起始浓度0.1 μM，每3-4天翻倍）存在下，培养携带野生型HCV复制子的Huh-7细胞3个月。有限稀释法分离耐药克隆，RT-PCR扩增NS5B区域并测序鉴定突变位点，通过复制子抑制实验评估耐药克隆对PSI-6130和R1479的敏感性[1] 3. 细胞内磷酸化测定：Huh-7细胞与[³H]标记的PSI-6130（1 μM）孵育0-24小时，冰冷高氯酸裂解细胞，KOH中和后，阴离子交换HPLC分离磷酸化代谢产物（一磷酸、二磷酸、三磷酸化物），流式闪烁分析仪检测放射性，量化PSI-6130-TP随时间的积累量[2] 4. 细胞毒性测定（MTT法）：96孔板接种Huh-7细胞和原代人肝细胞（5×10³个细胞/孔），过夜贴壁后用PSI-6130（0.1-100 μM）处理72小时。加入MTT溶液（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪测定570 nm吸光度，计算细胞活力和CC₅₀值[1, 2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 细胞内代谢活化：PSI-6130 经细胞激酶依次磷酸化：脱氧胞苷激酶（首先磷酸化为 PSI-6130-MP）、尿苷-胞苷激酶（另一种第一步磷酸化激酶）和核苷二磷酸激酶（转化为 PSI-6130-DP 和 PSI-6130-TP）。活性三磷酸形式 (PSI-6130-TP) 在 Huh-7 细胞中积累，半衰期为 18 小时 [2]
2. 代谢稳定性：PSI-6130 在人肝微粒体中表现出良好的稳定性（t₁/₂ > 240 分钟），且未被细胞色素 P450 酶显著降解 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：PSI-6130 在 Huh-7 细胞 (CC₅₀ = 65 μM) 和原代人肝细胞 (CC₅₀ > 100 μM) 中均表现出较低的细胞毒性，因此对野生型 HCV 的治疗指数 > 812 [1, 2]
2. 线粒体安全性：未观察到对人线粒体 DNA 聚合酶 γ (IC₅₀ > 100 μM) 或线粒体 DNA 合成的显著抑制，表明其线粒体毒性风险较低 [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 化学和结构性质：PSI-6130 是一种合成的 2'-氟-2'-C-甲基核苷类似物，化学名称为 β-D-2'-脱氧-2'-氟-2'-C-甲基胞苷。它是一种白色结晶性粉末，可溶于 DMSO（≥20 mg/mL），微溶于水，属于嘧啶核苷类 HCV NS5B 抑制剂 [1, 2]。2. 作用机制：PSI-6130 是一种前药，需要经细胞内磷酸化转化为 PSI-6130-TP（活性形式）。PSI-6130-TP 与天然 CTP 竞争结合 HCV NS5B RNA 依赖性RNA聚合酶 (RdRp)，并被整合到新生病毒 RNA 链中。 2'-C-甲基取代可阻止核苷酸的进一步添加，导致链终止并阻断HCV RNA复制[2]
3. 耐药机制：对PSI-6130的低水平耐药性与NS5B突变S282T和M414T相关，这些突变降低了PSI-6130-TP与聚合酶的结合亲和力。值得注意的是，这些突变体对R1479（另一种NS5B抑制剂）仍然敏感，这支持了联合治疗的潜力[1] 4. 治疗潜力：PSI-6130最初是作为一种直接抗病毒药物（DAA）开发的，用于治疗慢性丙型肝炎（CHC）。它对野生型HCV具有强效活性，细胞毒性低，且与其他NS5B抑制剂无交叉耐药性，使其成为联合治疗方案的理想候选药物[1, 2] |
| 分子式 |
C10H14N3O4F
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|---|---|
| 分子量 |
259.23426
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| 精确质量 |
259.096
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| 元素分析 |
C, 46.33; H, 5.44; F, 7.33; N, 16.21; O, 24.69
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| CAS号 |
817204-33-4
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| PubChem CID |
6481236
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
482.4±55.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
245.5±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.653
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| LogP |
-0.72
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| tPSA |
110.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
427
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C[C@]1([C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C=CC(N)=NC1=O)F
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| InChi Key |
NYPIRLYMDJMKGW-UZRKRJFESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H14FN3O4/c1-10(11)7(16)5(4-15)18-8(10)14-3-2-6(12)13-9(14)17/h2-3,5,7-8,15-16H,4H2,1H3,(H2,12,13,17)/t5-,7-,8-,10+/m1/s1
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| 化学名 |
4-amino-1-((2R,3S,4R,5R)-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-3-methyltetrahydrofuran-2-yl)pyrimidin-2(1H)-one
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| 别名 |
PSI-6130; PSI-6130; PSI-6130; R 1656; R-1656; R1656.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~96.44 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: ≥ 2.5 mg/mL (9.64 mM) 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.8576 mL | 19.2879 mL | 38.5758 mL | |
| 5 mM | 0.7715 mL | 3.8576 mL | 7.7152 mL | |
| 10 mM | 0.3858 mL | 1.9288 mL | 3.8576 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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463611831
