| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Smoothened ( IC50 = 1.5 μM )
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：Purmorphamine 通过直接结合并激活 Smoothened 来激活 Hedgehog 通路，与 Smo 拮抗剂环巴明竞争，IC50 约为 1.5 μM。 Purmorphamine 是多能 C3H10T1/2 细胞中骨生成的有效诱导剂。在 C3H10T1/2 细胞中，Purmorphamine 的 EC50（基于 ALP 表达）为 1 μM。 Purmorphamine (1 μM) 和 BMP-4 (100 ng/mL) 一起使 3T3-L1 细胞中的 ALP 活性提高 90 倍以上。与 BMP-4 不同，Purmorphamine 通过激活多能间充质祖细胞中的 Hedgehog 信号传导来诱导成骨。激酶测定：Smo 结合测定使用 BODIPY-环杷明和 Smo 过表达细胞进行，如前所述 4,5，使用基于 CMV 启动子、包含 SV40 起点的 Smo-Myc3 表达构建体，Smo-Myc3 是缺失突变体 SmoCRD（氨基酸缺失）氨基酸 68 至 182）和 SmoCT（删除氨基酸 556 至 793）。 HEK 293T 细胞在 12 孔板中经聚 D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上生长直至 70% 汇合，然后根据制造商的方案使用 FuGene 6 用适当的表达构建体（0.5 µg/孔）转染。转染两天后，将 HEK 293T 细胞与含有 0.5% 小牛血清、5 nM BODIPY-环杷明和不同浓度的嘌吗啡胺（0、1.5 或 5 μM）（1 mL/孔）的 DMEM 一起孵育 1 小时在37℃。然后用 1 × PBS 缓冲液（1 mL/孔）洗涤 Smo 过表达细胞，用含有 DAPI 的培养基封片，并使用 Leica DM4500B 荧光显微镜观察。对于使用固定细胞的结合测定，将 Smo 过表达 HEK 293T 细胞用 1 × PBS 缓冲液中的 3% 多聚甲醛在室温下固定 10 分钟（1 mL/孔），并用含有 10 mM 甘氨酸和 0.2% 的 1 × PBS 处理叠氮化钠 5 分钟（1 mL/孔），用 1 × PBS 缓冲液（1 mL/孔）洗涤，并用上述含嘌呤吗胺的培养基在室温下处理 4 小时。细胞测定：C3H10T1/2细胞在T175烧瓶中扩增；第 13 代细胞通过胰蛋白酶/EDTA 分离并在生长培养基中稀释。然后使用 Multi-dropTM 液体输送系统将所得细胞悬浮液接种到黑色透明底部 384 孔板中，每孔含 2500 个细胞，含有 100 µL 生长培养基。过夜孵育后，细胞附着于孔底部。使用 Mini TrakTM 多位分配器系统将每种 Purmorphamine 的 DMSO (500 nL) 储备溶液输送到相应的孔中，以制备 5μM Purmorphamine 的最终浓度。然后将细胞在 37 ℃、5% CO2 的空气气氛中孵育。 4 天后，除去培养基，并向每孔中添加 10 μL 被动裂解缓冲液。 5分钟后，每孔加入10μL碱性磷酸酶底物溶液。在室温下孵育 15 分钟后，按照制造商方案在 Acquest 高通量读板机上读取平板。
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| 体内研究 (In Vivo) |
Purmorphamine 上调大鼠基于人间充质干细胞的构建体中 ALP 的表达。
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| 酶活实验 |
Smo 结合测定使用 BODIPY-环杷明和 Smo 过表达细胞进行，如前所述 4,5。 Smo-Myc3、Smo⁄CRD（删除氨基酸 68 至 182）和 SmoCT（删除氨基酸 556 至 793）的表达构建体基于 CMV 启动子并包含 SV40 起点。据制造商介绍，HEK 293T 细胞在 12 孔板中的聚 D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上培养，直至 70% 汇合。之后，使用 FuGene 6 和适当的表达构建体（0.5 g/孔）对它们进行转染。
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| 细胞实验 |
在T175烧瓶中培养C3H10T1/2细胞；在第十三次传代时，使用胰蛋白酶/EDTA 分离细胞，然后在培养物中稀释。然后使用 Multi-dropTM 液体输送系统将所得细胞悬浮液接种到黑色透明底部 384 孔板中，每孔 2500 个细胞，置于 100 µL 生长培养基中。过夜孵育后，细胞粘附于孔底。使用 Mini TrakTM 多位分配器系统将 DMSO 中的每种嘌吗啡胺的 500 nL 原液转移到相应的孔中，从而得到 5μM 嘌吗啡胺的最终浓度。之后，将细胞在37°C、5% CO2的空气气氛中培养。四天后，除去培养基后，每孔接受 10 μL 被动裂解缓冲液。五分钟后向每个孔中添加十微升碱性磷酸酶底物溶液。在室温下孵育 15 分钟后，根据制造商的说明使用 Acquest 高通量读板器读取板。
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| 动物实验 |
Male C57BL/6J mouse pups
10 mg/kg i.p. |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Purmorphamine is a member of the class of purines that is purine substituted at C-2 by a 1-naphthyloxy group, at C-4 by a 4-morpholinophenylamino group, and at N-9 by a cyclohexyl group. It has a role as an osteogenesis regulator and a SMO receptor agonist. It is a member of purines, a member of morpholines, an aromatic ether and a secondary amino compound. It derives from a hydride of a 9H-purine.
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| 分子式 |
C31H32N6O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
520.62
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| 精确质量 |
520.258
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| 元素分析 |
C, 71.52; H, 6.20; N, 16.14; O, 6.15
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| CAS号 |
483367-10-8
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| 相关CAS号 |
Purmorphamine; 483367-10-8
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| PubChem CID |
5284329
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
790.3±70.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
210-212ºC
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| 闪点 |
431.8±35.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.711
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| LogP |
4.52
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| tPSA |
77.33
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
768
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N1(C2=CC=C(NC3=NC(OC4=CC=CC5=C4C=CC=C5)=NC6=C3N=CN6C7CCCCC7)C=C2)CCOCC1
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| InChi Key |
FYBHCRQFSFYWPY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H32N6O2/c1-2-9-25(10-3-1)37-21-32-28-29(33-23-13-15-24(16-14-23)36-17-19-38-20-18-36)34-31(35-30(28)37)39-27-12-6-8-22-7-4-5-11-26(22)27/h4-8,11-16,21,25H,1-3,9-10,17-20H2,(H,33,34,35)
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| 化学名 |
9-cyclohexyl-N-(4-morpholin-4-ylphenyl)-2-naphthalen-1-yloxypurin-6-amine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O: 1 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9208 mL | 9.6039 mL | 19.2079 mL | |
| 5 mM | 0.3842 mL | 1.9208 mL | 3.8416 mL | |
| 10 mM | 0.1921 mL | 0.9604 mL | 1.9208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RU-SKI 43 hydrochloride (RU-SKI 43 (hydrochloride))
RL-0070933
Hedgehog IN-5
Hedgehog IN-2
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COA
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