Pyrogallol   中文名称: 1,2,3-苯三酚

Pyrogallol is a polyphenol compound that generates superoxide anions (O₂•⁻) and induces cell death through oxidative stress mechanisms. [1]

焦棓酚 (PG) 是一种还原剂，常用于显影剂和染发剂中，因为它能产生自由基，特别是超氧阴离子 (O₂•⁻)。焦棓酚通过消耗谷胱甘肽 (GSH) 并诱导细胞凋亡来抑制 Calu-6 和 A549 肺癌细胞的生长。焦棓酚 (PG) 会影响丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)，导致肺癌细胞过度产生 O₂•⁻，进而诱导细胞凋亡 [1]。本研究探讨了焦棓酚对坏死性细胞死亡和人肺成纤维细胞 (HPF) 存活率的影响。在这些研究中，使用 0、50 或 100 µM 的焦棓酚，测定了在有或无特定 MAPK 抑制剂的情况下，细胞活力的抑制或死亡水平。 24小时后，50 µM和100 µM焦棓酚处理分别使HPF活性降低约40%和65%。MEK抑制剂略微增强了50 µM焦棓酚处理的HPF细胞的细胞活力抑制，而p38抑制剂则略微减弱了这种抑制。所有MAPK抑制剂均在一定程度上改善了100 µM焦棓酚处理的HPF细胞的活力抑制；单独使用p38抑制剂可提高HPF对照细胞的活力。乳酸脱氢酶（LDH）的释放用于检测细胞坏死。 50 µM 焦酚处理对 HPF 细胞的 LDH 释放没有影响，而 100 µM 焦酚处理则显著增加了 LDH 的释放 [1]。

---

细胞活力抑制：在人肺成纤维细胞 (HPF) 中，MTT 法检测显示，50 μM 和 100 μM 焦酚处理 24 小时后，细胞活力分别下降约 40% 和 65%。[1]
坏死性细胞死亡（LDH 释放）：100 μM 焦酚处理显著增加了 HPF 细胞的 LDH 释放，表明发生了坏死性细胞死亡。50 μM 焦酚处理对 LDH 释放没有影响。[1]
凋亡性细胞死亡（Annexin V/PI 染色）：焦酚（50 和 100 μM）显著增加了 HPF 细胞的凋亡率。 100 μM 焦棓酚处理也增加了坏死细胞的数量。p38 抑制剂使 50 μM 焦棓酚处理的细胞中凋亡细胞略有增加，并显著增加了 100 μM 焦棓酚处理的细胞中的凋亡细胞。[1]
PARP 裂解：50 μM 焦棓酚处理的 HPF 细胞中 PARP 蛋白水平未发生改变，但在 100 μM 焦棓酚处理的细胞中 PARP 蛋白水平降低，表明 caspase 被激活并引发细胞凋亡。[1]
线粒体膜电位 (MMP) 丧失：罗丹明 123 染色显示，50 和 100 μM 焦棓酚处理显著降低了 HPF 细胞中的 MMP (ΔΨm)。所有 MAPK 抑制剂均增强了焦棓酚处理细胞中 MMP 的降低。 [1]
超氧阴离子 (O₂•⁻) 水平：焦性没食子酸处理可增加 HPF 细胞内的 O₂•⁻ 水平（通过 DHE 荧光测定）和线粒体 O₂•⁻ 水平（通过 MitoSOX Red 荧光测定）。所有 MAPK 抑制剂均可增加 100 μM 焦性没食子酸处理的 HPF 细胞中的 O₂•⁻ 水平。[1]
总 ROS 水平：50 μM 焦性没食子酸可增加总 ROS 水平（通过 H₂DCFDA 荧光测定），而 100 μM 焦性没食子酸则无此作用。MAPK 抑制剂可降低焦性没食子酸处理的细胞中的 ROS 水平。[1]
谷胱甘肽 (GSH) 耗竭：与对照组相比，50 或 100 μM 焦性没食子酸处理显著增加了 GSH 耗竭的 HPF 细胞数量（通过 CMFDA 染色测定）。所有 MAPK 抑制剂均未显著改变焦酚处理细胞中的 GSH 消耗。[1]
MAPK 抑制剂的作用：MEK 抑制剂 (PD98059, 10 μM) 增强了焦酚处理的 HPF 细胞中细胞活力、细胞死亡和 MMP 丢失的抑制作用。JNK 抑制剂 (SP600125, 10 μM) 和 p38 抑制剂 (SB203580, 10 μM) 也增强了这些作用，表明所有三个 MAPK 通路可能在此过程中发挥促生存作用。[1]

细胞培养：人肺成纤维细胞 (HPF) 购自 PromoCell GmbH 公司，培养于含 10% 胎牛血清和 1% 青霉素-链霉素的 RPMI-1640 培养基中，置于 37°C、5% CO₂ 的加湿培养箱中培养。使用传代 4 至 8 代的细胞。[1]
细胞活力检测 (MTT)：将 HPF 细胞（5 × 10³ 个细胞/孔）接种于 96 孔板中，分别用 0、50 或 100 μM 焦棓酚处理，并加入或不加入 MAPK 抑制剂 (10 μM)，于 37°C 培养 24 小时。加入 MTT 溶液，测定吸光度值以确定细胞活力。 [1]
LDH 释放测定（坏死）：将 60 mm 培养皿中的 HPF 细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦性没食子酸和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。使用 LDH 检测试剂盒，按照制造商的说明书测定 LDH 释放量。LDH 释放量以细胞外 LDH 活性相对于对照细胞的百分比表示。[1]
细胞凋亡检测（Annexin V/PI 染色）：将 HPF 细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦性没食子酸和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。用 Annexin V-FITC 和碘化丙啶 (PI) 对细胞进行染色，并通过流式细胞术进行分析。[1]
线粒体膜电位 (MMP) 测定：将 HPF 细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦性没食子酸和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。细胞用罗丹明123荧光染料染色，并通过流式细胞术进行分析。罗丹明123染色缺失表明MMP丧失。[1]
蛋白质印迹分析：将高倍视野（HPF）细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦酚和/或MAPK抑制剂处理24小时。细胞在裂解缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.9，20%甘油，200 mM KCl，0.5 mM EDTA，0.5% NP40，0.5 mM DTT，1%蛋白酶抑制剂混合物）中裂解。取30 μg蛋白质进行12.5% SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜，并用抗PARP和抗GAPDH抗体进行检测。 [1]
活性氧（ROS）检测（H₂DCFDA）：将高倍视野（HPF）细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦性没食子酸和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。用 2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（H₂DCFDA）染色细胞，并通过流式细胞术进行分析。ROS 水平以平均荧光强度表示。[1]
超氧阴离子（O₂•⁻）检测（DHE 和 MitoSOX Red）：将高倍视野（HPF）细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦性没食子酸和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。用二氢乙锭（DHE）染色细胞以检测细胞内 O₂•⁻，或用 MitoSOX Red 染色线粒体 O₂•⁻，并通过流式细胞术进行分析。荧光水平以平均荧光强度表示。 [1]
谷胱甘肽检测 (CMFDA)：将高倍视野 (HPF) 细胞（1 × 10⁶ 个细胞）用焦酚和/或 MAPK 抑制剂处理 24 小时。用 5-氯甲基荧光素二乙酸酯 (CMFDA) 对细胞进行染色，并通过流式细胞术进行分析。谷胱甘肽 (GSH) 耗竭的细胞以 CMFDA 染色阴性细胞的百分比表示。[1]

吸收、分布和排泄
该物质可通过口服被人体吸收。它易于经皮肤吸收。……它易于从胃肠道和注射部位吸收。少量可通过完整皮肤吸收。……它易于与己糖醛酸、硫酸或其他酸结合，并在24小时内经肾脏排泄。部分以原形排出。代谢/代谢物……焦棓酚是鞣酸的代谢物……焦棓酚衍生物……中间体酚羟基被甲基化。儿茶酚衍生物的甲基化可以是间位甲基化或对位甲基化，具体取决于其他取代基的存在。焦棓酚经儿茶酚O-甲基转移酶甲基化生成2-甲基焦棓酚。焦性没食子酸在大鼠体内产生3-甲氧基儿茶酚和2-甲氧基间苯二酚。在草中，它产生2-甲氧基间苯二酚。（引自表格）焦性没食子酸在牛肉中产生紫红色没食子酸。茶叶中产生紫红色没食子酸。（引自表格）
有关焦性没食子酸代谢/代谢产物（共7种代谢产物）的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

---

相互作用
……通过比较对照组和焦酚处理组小鼠肝脏中差异表达的mRNA转录组，我们阐明了焦酚介导的肝毒性所涉及的各种分子事件。我们还研究了水飞蓟素对焦酚诱导的差异表达转录本的调控作用。瑞士白化小鼠接受焦酚处理或不接受焦酚处理。在一些实验中，小鼠在焦酚处理前2小时也接受了水飞蓟素处理。从肝脏中分离总RNA，并将多聚腺苷酸化的RNA反转录为用Cye 3或Cye 5标记的cDNA。将两组小鼠等量的标记cDNA混合，并与小鼠15k微阵列进行杂交。扫描杂交后的微阵列，进行分析，并计算每个转录本的表达水平。使用定量实时聚合酶链式反应验证差异表达。比较转录组分析显示，焦酚暴露导致肝脏中183个与氧化应激、细胞周期、细胞骨架网络、细胞间黏附、细胞外基质、炎症、细胞凋亡、细胞信号传导和中间代谢相关的转录本表达发生改变（150个上调，33个下调），而水飞蓟素预处理可调节其中许多转录本的表达。这些结果表明，焦酚诱导多种分子事件导致肝毒性，而水飞蓟素可有效拮抗焦酚介导的改变。本研究旨在评估白藜芦醇对焦酚诱导的肝损伤标志物、外源性代谢酶和氧化应激变化的影响。瑞士白化小鼠每日腹腔注射焦酚（40 mg/kg），持续1至4周，并设置相应的对照组。在一些实验中，动物在接受焦酚处理前2小时预先接受白藜芦醇（10 mg/kg）处理，并设置相应的对照组。测定了血浆中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和胆红素的水平，并测定了肝脏中细胞色素P-450 (CYP) 1A1、CYP1A2、CYP2E1、谷胱甘肽S-转移酶 (GST)-ya和GST-yc的mRNA表达水平。此外，还评估了CYP1A1、CYP1A2、CYP2E1、GST、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶的催化活性，以及脂质过氧化和还原型谷胱甘肽 (GSH) 的水平。白藜芦醇可降低焦棓酚诱导的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、胆红素、脂质过氧化以及CYP2E1和CYP1A2 mRNA表达和催化活性的升高。白藜芦醇可显著减轻焦棓酚诱导的GST-ya和GST-yc表达、GST、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶活性以及GSH水平的降低。所有治疗组的CYP1A1表达和催化活性基本保持不变。这些结果表明，白藜芦醇可调节焦棓酚诱导的肝毒性标志物、外源性代谢酶和氧化应激的变化。本研究还探讨了自由基生成剂焦棓酚对大鼠胃排空的影响。腹腔注射焦性没食子酸（剂量分别为25、50、100和150 mg/kg）可呈剂量依赖性地抑制胃排空。预先口服维生素C（100和500 mg/kg）和维生素E（100和500 mg/kg）可显著逆转100 mg/kg焦性没食子酸引起的胃排空抑制。然而，维生素C和维生素E（100 mg/kg）联合给药具有协同作用。静脉注射谷胱甘肽（100 mg/kg）5分钟也可逆转100 mg/kg焦性没食子酸引起的胃排空抑制。口服昂丹司琼（3 mg/kg）可显著逆转焦性没食子酸的作用。此外，本研究还探讨了焦性没食子酸对胃组织中丙二醛（MDA）和血清素（5-HT）水平的影响。腹腔注射100 mg/kg焦性没食子酸可显著提高胃组织中MDA和5-HT的水平。口服维生素C和维生素E（100 mg/kg）以及静脉注射谷胱甘肽（100 mg/kg）可显著降低焦性没食子酸诱导的胃组织中MDA水平升高，但对焦性没食子酸诱导的5-HT水平升高无显著影响。本研究还探讨了不同剂量5-HT对胃排空的影响。结果表明，5-HT对胃排空的影响存在差异。低剂量和高剂量（0.1、0.3 和 30 mg/kg，腹腔注射）均显著抑制胃排空，而 1–10 mg/kg 剂量范围则无显著影响。预先给予抗氧化剂，包括维生素 C 和维生素 E（各 100 mg/kg，口服）以及谷胱甘肽（100 mg/kg，静脉注射），对血清素（5-HT，0.3 mg/kg，腹腔注射）诱导的胃排空延迟无影响。这些结果表明，自由基在胃排空过程中发挥作用，抗氧化剂可能对已知会释放自由基且其胃肠道效应表现为药物治疗症状或副作用的疾病具有潜在的治疗价值。本研究旨在：(i)验证内皮源性超极化因子(EDHF)成分在乙酰胆碱(ACh)诱导的血管舒张和血管平滑肌细胞(SMC)超极化过程中暴露于超氧阴离子后受损的假设；(ii)进一步研究血管活性浓度下木犀草素和芹菜素是否对大鼠肠系膜动脉具有血管保护作用。本研究分离大鼠肠系膜动脉环，用于等长收缩力记录和电生理研究。测量肠系膜动脉床的灌注压，并使用荧光染料检测超氧阴离子的产生。300 μM焦棓酚显著降低了乙酰胆碱(ACh)诱导的血管舒张和超极化。木犀草素和芹菜素均能保护血管免受乙酰胆碱（ACh）诱导的血管舒张过程中内皮源性超极化因子（EDHF）成分的损伤，并减轻ACh诱导的超极化损伤。氧化荧光微形态分析显示，木犀草素和芹菜素均能显著降低超氧化物水平。结果表明，超氧阴离子通过抑制EDHF介导的反应，损害ACh诱导的阻力动脉平滑肌细胞（SMC）舒张和超极化。木犀草素和芹菜素能保护阻力动脉免受损伤，提示它们在治疗与氧化应激相关的血管疾病方面具有潜在疗效。
有关焦性没食子酸（共8种）相互作用的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

非人类毒性值

小鼠口服LD50：300 mg/kg
小鼠腹腔注射LD50：400 mg/kg
小鼠皮下注射LD50：566 mg/kg
兔口服LD50：1600 mg/kg

---

[1]. MAPK inhibitors enhance cell death in pyrogallol-treated human pulmonary fibroblast cells via increasing O2•- levels. Oncol Lett. 2017 Jul;14(1):1179-1185.

治疗用途
/实验治疗/...焦性没食子酸 (PGA) 对人肺癌细胞系具有较高的细胞毒性，但对人支气管上皮细胞系的作用相对较小。本研究旨在探讨 PGA 对人肺癌细胞系 H441（肺腺癌）和 H520（肺鳞癌）的治疗作用。MTT（细胞毒性试验）结果显示，PGA 处理后肺癌细胞的生长受到抑制。流式细胞术分析显示，肺癌细胞的细胞周期阻滞于 G2/M 期。Western blot 分析显示，PGA 处理 4 小时后，细胞周期相关蛋白 cyclin B1 和 Cdc25c 的表达呈时间依赖性下降，而磷酸化 Cdc2 (Thr14) 的表达则升高。此外，聚（ADP）核糖聚合酶（PARP）裂解水平升高，Bax蛋白表达增加，Bcl-2蛋白表达降低，表明PGA处理可诱导肺癌细胞凋亡。Annexin V-FITC和TUNEL染色也直接证实了细胞凋亡。此外，采用裸鼠异种移植瘤模型评估了焦酚的抗肿瘤作用。焦酚治疗5周后观察到肿瘤消退。体外和体内研究的综合结果表明，焦酚有望成为治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的有效抗肺癌药物。

---

背景：焦酚（苯-1,2,3-三醇）是一种常见于阔叶植物的多酚化合物，具有抗真菌和抗银屑病特性。它是一种还原剂，能产生自由基，特别是超氧阴离子（O₂•⁻），曾被用作照相显影剂和染发剂。[1]
作用机制：焦性没食子酸主要通过过度产生超氧阴离子（O₂•⁻）诱导细胞死亡，导致氧化应激、线粒体膜电位丧失和谷胱甘肽耗竭。根据浓度不同，它既能诱导细胞凋亡，也能诱导细胞坏死。[1]
毒理学问题：尽管焦性没食子酸具有多种有益作用，但其毒性仍然令人担忧。其他研究表明，它能诱发突变、致癌作用并损害免疫系统。 [1]
MAPK信号通路：该研究表明，MAPK抑制剂（MEK、JNK和p38抑制剂）可增强焦酚诱导的HPF细胞死亡，提示这三种MAPK通路可能在氧化应激下对正常肺成纤维细胞的存活起着促进作用。这与某些癌细胞中MAPK抑制剂的作用不同形成对比。[1]
细胞类型特异性：焦酚和MAPK抑制剂的作用因细胞类型而异。例如，在Calu-6肺癌细胞中，MEK抑制剂（而非JNK或p38抑制剂）略微减弱了焦酚的作用，而在HPF细胞中，所有三种抑制剂均增强了细胞死亡。[1]

C6H6O3

126.111

126.031

87-66-1

30813-84-4

1057

White to off-white solid powder

1.453

309 ºC

131-135 ºC

164.3±16.9 °C

0.0±0.6 mmHg at 25°C

1.677

0.29

60.69

3

3

0

9

84.3

0

OC1C(O)=C(O)C=CC=1

WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C6H6O3/c7-4-2-1-3-5(8)6(4)9/h1-3,7-9H

benzene-1,2,3-triol

2,3-Dihydroxyphenol Benzene-1,2,3-triolPyrogallol C.I. 76515 NSC 5035Fouramine Brown AP

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 100 mg/mL (~792.96 mM)
H2O : ~50 mg/mL (~396.48 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (19.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (19.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (19.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 130 mg/mL (1030.85 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。